【摘要】：第一部分龍膽苦苷對(duì)匹羅卡品誘導(dǎo)癲癇小鼠的抗癲癇作用及腦內(nèi)炎癥反應(yīng)的影響目的:探討龍膽苦苷對(duì)匹羅卡品誘發(fā)癲癇小鼠的抗癲癇作用及腦內(nèi)炎癥反應(yīng)的影響。方法:腹腔注射匹羅卡品(Pilocarpine,PILO 280mg/kg)建立小鼠癲癇模型,隨機(jī)分為正常組,龍膽苦苷(Gentiopicroside,Gent 800mg/kg)組,模型(PILO)組和龍膽苦苷Gent(800mg/kg)+模型(PILO)組。采用SMUP-U4生物信號(hào)處理系統(tǒng)檢測(cè)各組小鼠大腦皮層癇樣放電;采用膠質(zhì)纖維酸性蛋白免疫組織化學(xué)染色的方法檢測(cè)各組小鼠腦內(nèi)星形膠質(zhì)細(xì)胞(Astrocyte,AST)的活化;采用Western blot方法檢測(cè)各組小鼠腦內(nèi)TLR-4、IKK-β、p-IKK-β、IκB-α、p-IκB-α、NF-κB、p-NF-κB、IL-1β、TNF-α和IL-6蛋白表達(dá)。結(jié)果:與模型組比較,Gent(800 mg/kg)能顯著減少腦電圖的平均波幅及總功率;與模型組比較,Gent(800 mg/kg)可以抑制PILO誘導(dǎo)的小鼠癲癇后星形膠質(zhì)細(xì)胞活化增殖;Western blot結(jié)果顯示,與模型組比較,Gent(800mg/kg)能顯著性抑制TLR-4、p-IKK-β、p-IκB-α、NF-κB、p-NF-κB、IL-1β、TNF-α和IL-6蛋白的表達(dá)(p0.05),IκB-α的蛋白表達(dá)也明顯上調(diào)(p0.05),但不影響IKK-β和NF-κB的蛋白的表達(dá)(p0.05)。結(jié)論:Gent對(duì)PILO誘發(fā)癲癇小鼠具有明顯的抗癲癇作用,并抑制癲癇小鼠腦內(nèi)炎癥反應(yīng),調(diào)節(jié)TLR-4/NF-κB信號(hào)通路,可能與龍膽苦苷抑制星形細(xì)胞炎癥反應(yīng)有關(guān)。第二部分龍膽苦苷對(duì)脂多糖誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響目的:探討Gent對(duì)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘發(fā)的星形膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響。方法:采用LPS(1μg/ml)誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng),并隨機(jī)分為正常組,模型組和不同濃度龍膽苦苷Gent干預(yù)組。采用ELISA法檢測(cè)各組細(xì)胞培養(yǎng)液內(nèi)IL-1β、IL-6和TNF-α等促炎癥因子的含量;采用Western blot法檢測(cè)檢測(cè)各組細(xì)胞中TLR-4、IKK-β/p-IKK-β、IκB-α/p-IκB-α以及NF-κB/p-NF-κB蛋白的表達(dá)。結(jié)果:與模型組比較,ELISA結(jié)果顯示Gent可以明顯減少LPS誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞炎癥因子IL-1β(p0.05),TNF-α(p0.05)和IL-6(p0.05)的釋放;Western blot結(jié)果顯示,與模型組相比,Gent對(duì)IKK-β、IκB-α和NF-κB的蛋白表達(dá)無影響(p0.05),但能顯著性抑制TLR-4(p0.05)、p-IKK-β(p0.05)、p-IκB-α(p0.05)、p-NF-κB(p0.05)的蛋白表達(dá)。結(jié)論:龍膽苦苷調(diào)節(jié)星形膠質(zhì)細(xì)胞TLR-4/NF-κB信號(hào)通路抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng),可能是龍膽苦苷抗癲癇的作用機(jī)制。
【圖文】：

43圖 1 龍膽苦苷對(duì) PILO 誘發(fā)癲癇小鼠大腦皮層腦電的影響( x±SEM, n=6 )注：（A）小鼠腦電活動(dòng)代表圖，（B）小鼠第一次癇樣發(fā)作時(shí)，腦電活動(dòng)代表圖，（C）小鼠進(jìn)入癲癇持續(xù)性狀態(tài)時(shí)，腦電活動(dòng)代表圖，（D）小鼠大腦皮層平均振幅統(tǒng)計(jì)圖，（E）小鼠大腦皮層總功率統(tǒng)計(jì)圖，與正常組比較，#p < 0.05；與模型組比較，*p < 0.05

44圖 2 Gent 對(duì)癲癇后腦組織內(nèi)星形膠質(zhì)細(xì)胞活化增殖的影響( x±SEM, n=6 )注：與正常組比較，，#p < 0.05；與模型組比較，*p < 0.05
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R965

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本文編號(hào)：2681926