【摘要】：目的:采用藥動(dòng)學(xué)與藥效學(xué)相結(jié)合手段肝引經(jīng)藥對(duì)大黃引藥入肝的作用研究,包括引經(jīng)藥柴胡與大黃配伍前后對(duì)大黃所含的蒽醌類成分在正常大鼠與α-萘異硫氰酸酯(ANIT)造成的黃疸型肝炎大鼠模型體內(nèi)不同的分布情況及大黃與柴胡配伍后對(duì)大黃保肝作用的影響。方法:1.采用HPLC-UV法測(cè)定正常大鼠與模型大鼠體內(nèi)大黃中大黃酸和蘆薈大黃素的含量,包括大鼠血液及心、肝、脾、肺、腎五臟內(nèi)的含量。色譜柱為Hypersil BDS C18(4.6mm×250mm,5μm);流動(dòng)相A相為甲醇,B相為0.1%磷酸水溶液,流速1 m L·min-1,梯度洗脫(0~10 min,75%~75%A;10~12 min,75%~80%A;12~28min,80%~80%A;28~29 min,80%~95%A;29~39min,95%~95%A);柱溫為30℃;進(jìn)樣量均為10μL。考察各給藥組在10 min、15 min、30 mim、45 mim、60 min、90 mim、120 min、3 h、4 h、6 h、8 h、10 h、12 h的13個(gè)時(shí)間點(diǎn)大黃酸與蘆薈大黃素在血液、心、肝、脾、肺和腎五臟內(nèi)的含量,并通過(guò)SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。2.采用生化指標(biāo)及病理切片法考察大黃與柴胡配伍后對(duì)大黃保肝作用的影響。生化指標(biāo)為谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、膽汁酸(TBA)、總膽紅素(TBIL)、堿性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA);病理切片主要考察對(duì)肝臟的影響,常規(guī)石蠟切片,HE染色。結(jié)果:1.建立了大黃酸、蘆薈大黃素在正常大鼠與黃疸型肝炎大鼠血液與心肝脾肺腎五臟中的HPLC檢測(cè)方法。在正常大鼠中,大黃酸與蘆薈大黃素的線性相關(guān)系數(shù)介于0.9908~0.9989之間;大黃酸及蘆薈大黃素的不同濃度的血液及心、肝、脾、肺、腎的樣品日內(nèi)精密度RSD介于4.15%~12.48%之間,日間精密度RSD位于4.54%~8.84%之間;大黃酸及蘆薈大黃素在常溫情況下,RSD介于4.35%~7.14%;大黃酸及蘆薈大黃素在反復(fù)凍融情況下RSD介于5.05%~9.64%之間;大黃酸及蘆薈大黃素在長(zhǎng)期放置情況下RSD介于4.91%~9.60%之間;大黃酸及蘆薈大黃素不同濃度的血液及心、肝、脾、肺、腎等樣品相對(duì)回收率位于82.33%~100.72%之間;絕對(duì)回收率位于70.17%~83.28%之間,滿足實(shí)驗(yàn)需要。在黃疸型肝炎大鼠體內(nèi),大黃酸及蘆薈大黃素相關(guān)線性系數(shù)位于0.9906~0.9979之間;大黃酸及蘆薈大黃素的不同濃度的血液及心、肝、脾、肺、腎的樣品日內(nèi)精密度RSD介于4.67%~8.83%之間,日間精密度RSD位于4.54%~8.84%之間;大黃酸及蘆薈大黃素在常溫情況下,RSD介于4.05%~8.68%;大黃酸及蘆薈大黃素在反復(fù)凍融情況下RSD介于4.23%~8.09%之間;大黃酸及蘆薈大黃素在長(zhǎng)期放置情況下RSD介于4.12%~8.89%之間;大黃酸及蘆薈大黃素不同濃度的血液及心、肝、脾、肺、腎等樣品相對(duì)回收率位于86.14%~98.28%之間;絕對(duì)回收率位于70.22%~81.39%之間,滿足實(shí)驗(yàn)需要。2.通過(guò)對(duì)正常大鼠與黃疸型肝炎大鼠在灌服大黃煎液與大黃柴胡煎液后在13個(gè)時(shí)間點(diǎn)在血液、心、肝、脾、肺和腎內(nèi)大黃酸與蘆薈大黃素的含量,對(duì)正常大鼠而言,配伍柴胡后可以改變大黃酸與蘆薈大黃素的達(dá)峰時(shí)間,且能明顯增加大黃酸和蘆薈大黃素在肝臟內(nèi)的分布。相比較大黃液,正常在使用大黃柴胡液后,血液中大黃酸的含量為原來(lái)的5.26倍,肝臟中大黃酸的含量為原來(lái)的3.31倍,其他臟器也有增加,但比較少,心臟中大黃酸的含量為原來(lái)的1.40倍,脾臟為1.36倍,腎臟為1.41倍,肺臟為1.17倍。從蘆薈大黃素看,大黃柴胡液血液中含量為大黃液的9.64倍,肝臟中的含量為原來(lái)的4.12倍,腎中為1.77倍,而在心臟、脾和肺中含量較少,檢測(cè)不到。但從結(jié)果仍可以看到正常大鼠在使用大黃柴胡液后可以顯著增加肝臟內(nèi)大黃酸與蘆薈大黃素的含量。在黃疸型肝炎大鼠體內(nèi),在使用大黃柴胡液后,以大黃酸計(jì),除肝臟與脾臟內(nèi)成分增加,其余臟器內(nèi)的含量均減少包括血液、心臟、肺臟和腎臟。肝臟內(nèi)增加8.84%,脾內(nèi)增加29.19%,腎臟中減少量較少,為19.97%,血液中降低56.70%,心臟中降低48.59%,肺內(nèi)降低了38.27%。以蘆薈大黃素計(jì),血液中降低了62.46%,腎臟內(nèi)降低了58.04%。肝臟中增加了8.82%。3.通過(guò)大黃、大黃柴胡、柴胡液對(duì)ANIT造成黃疸型肝炎大鼠的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、膽汁酸(TBA)、總膽紅素(TBIL)、堿性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量的檢測(cè)以及與正常大鼠與該模型大鼠的比較,發(fā)現(xiàn)大黃對(duì)該模型確有良好的治療作用;柴胡僅對(duì)該模型中肝細(xì)胞的保護(hù)有作用,影響指標(biāo)ALT,但對(duì)該模型中SOD、MDA等氧化性指標(biāo)及TBA、TBIL及AKP黃疸指標(biāo)無(wú)作用;在將大黃柴胡合用后可以起到更好的治療黃疸型肝炎大鼠的作用。結(jié)論:無(wú)論在正常大鼠體內(nèi)還是黃疸型肝炎大鼠體內(nèi),在加入柴胡后,均可以顯著增加大黃中大黃酸和蘆薈大黃素在肝臟內(nèi)分布,說(shuō)明柴胡對(duì)大黃確有引藥入肝的作用。從藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)看,在加入柴胡后,大黃對(duì)黃疸型肝炎的預(yù)防與治療作用更加顯著,對(duì)黃疸型肝炎的特征指標(biāo)作用明顯,且柴胡僅起到保護(hù)肝細(xì)胞的作用,對(duì)黃疸的特征指標(biāo)無(wú)明顯作用,表明治療作用的加強(qiáng)可能與柴胡的引藥入肝作用有關(guān)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果從藥效學(xué)的角度為柴胡的引藥入肝作用提供了一種佐證,也為后續(xù)引經(jīng)藥的研究提供了一定的基礎(chǔ)。
【圖文】：

△表示與模型組相比 P＜0.05*表示與大黃組相比 P＜0.05**表示與大黃組相比 P＜0.01由表40可見，模型組的TBA、TBIL及AKP與正常組比較，三者數(shù)據(jù)均明顯升高，將每組數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；大黃組、大黃柴胡組的TBA、TBIL及AKP與模型組組比較，，數(shù)據(jù)均降低，且將每組數(shù)據(jù)進(jìn)行比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；柴胡組TBA、TBIL及AKP與模型組比較，數(shù)據(jù)相差不多，每組數(shù)據(jù)比較，沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；大黃組與大黃柴胡組在TBA、TBIL及AKP進(jìn)行比較，大黃柴胡組更低一些，更靠近正常組，且每組數(shù)據(jù)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。由表40可見，模型組ALT與正常組比較，數(shù)據(jù)升高，且兩者比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；大黃組、大黃柴胡組與柴胡組ALT與模型組比較，均顯著降低，數(shù)據(jù)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），大黃柴胡組與大黃組比較，數(shù)據(jù)降低更明顯，兩者比較，數(shù)據(jù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。3.5.2 對(duì)肝組織的形態(tài)的影響研究

△表示與模型組相比 P＜0.05*表示與大黃組相比 P＜0.05**表示與大黃組相比 P＜0.01由表40可見，模型組的TBA、TBIL及AKP與正常組比較，三者數(shù)據(jù)均明顯升高，將每組數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；大黃組、大黃柴胡組的TBA、TBIL及AKP與模型組組比較，數(shù)據(jù)均降低，且將每組數(shù)據(jù)進(jìn)行比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；柴胡組TBA、TBIL及AKP與模型組比較，數(shù)據(jù)相差不多，每組數(shù)據(jù)比較，沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；大黃組與大黃柴胡組在TBA、TBIL及AKP進(jìn)行比較，大黃柴胡組更低一些，更靠近正常組，且每組數(shù)據(jù)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。由表40可見，模型組ALT與正常組比較，數(shù)據(jù)升高，且兩者比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；大黃組、大黃柴胡組與柴胡組ALT與模型組比較，均顯著降低，數(shù)據(jù)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），大黃柴胡組與大黃組比較，數(shù)據(jù)降低更明顯，兩者比較，數(shù)據(jù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。3.5.2 對(duì)肝組織的形態(tài)的影響研究
【學(xué)位授予單位】：山西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285.5;R-332

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2680955