【摘要】：目的:基于基底外側(cè)杏仁核神經(jīng)元信息編碼,研究酸棗仁對(duì)大鼠狀態(tài)性焦慮的干預(yù)作用及作用機(jī)制。方法:第一部分狀態(tài)性焦慮大鼠的行為學(xué)與BLA神經(jīng)元c-Fos蛋白表達(dá)及信息編碼的變化一、狀態(tài)性焦慮大鼠行為學(xué)的變化選取SD雄性大鼠10只,適應(yīng)7天后,利用動(dòng)物行為學(xué)采集和分析系統(tǒng),以跨格次數(shù)、站立次數(shù)、修飾次數(shù)、總運(yùn)動(dòng)時(shí)間、進(jìn)入中央格次數(shù)、中央格運(yùn)動(dòng)時(shí)間及中央格/總運(yùn)動(dòng)時(shí)間(%)為指標(biāo),記錄10min內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中的行為學(xué)表現(xiàn)。每日1次,連續(xù)觀察7天。二、狀態(tài)性焦慮大鼠BLA神經(jīng)元c-Fos蛋白表達(dá)的變化選取SD雄性大鼠,適應(yīng)7天后,隨機(jī)分為空白對(duì)照組與模型組,每組10只。模型組大鼠進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)1Omin,每日1次,連續(xù)7天。此期間空白對(duì)照組不做任何處理。末次曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,將兩組大鼠灌流取腦并制作腦組織切片,利用免疫組織化學(xué)技術(shù),測(cè)定兩組大鼠BLA神經(jīng)元c-Fos蛋白的表達(dá)水平。三、狀態(tài)性焦慮大鼠BLA神經(jīng)元信息編碼的變化選取SD雄性大鼠10只,麻醉后固定在腦立體定位儀上,將16(4×4)通道在體記錄電極埋置于大鼠的BLA區(qū)域。手術(shù)后恢復(fù)4天,每日先監(jiān)測(cè)大鼠在日常飼養(yǎng)環(huán)境下的BLA神經(jīng)元基底放電(10min),再監(jiān)測(cè)大鼠在曠場(chǎng)中的BLA神經(jīng)元放電信號(hào)(10min),每日1次,連續(xù)7天。以神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢环烹婎l率為指標(biāo),觀察大鼠BLA神經(jīng)元信息編碼的變化。電信號(hào)采集全部結(jié)束后,利用腦組織切片的HE染色技術(shù)判定記錄電極是否準(zhǔn)確插入BLA區(qū)。第二部分酸棗仁對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠的干預(yù)作用及作用機(jī)制一、酸棗仁對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠行為學(xué)的影響選取SD雄性大鼠,適應(yīng)7天后,隨機(jī)分為模型對(duì)照組與酸棗仁組,每組10只。每日經(jīng)灌胃途徑給予酸棗仁組大鼠酸棗仁水煎液(17.5g/kg),模型對(duì)照組給予同等體積生理鹽水。每日給藥30min后,利用動(dòng)物行為學(xué)采集和分析系統(tǒng),以跨格次數(shù)、站立次數(shù)、修飾次數(shù)、總運(yùn)動(dòng)時(shí)間、進(jìn)入中央格次數(shù)、中央格運(yùn)動(dòng)時(shí)間及中央格/總運(yùn)動(dòng)時(shí)間(%)為指標(biāo),記錄1Omin內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中的行為學(xué)表現(xiàn)。每日1次,連續(xù)觀察7天。二、酸棗仁對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠BLA神經(jīng)元c-Fos蛋白表達(dá)的影響選取SD雄性大鼠,適應(yīng)7天后,隨機(jī)分為模型對(duì)照組與酸棗仁組,每組10只。每日經(jīng)灌胃途徑給予酸棗仁組大鼠酸棗仁水煎液(17.5g/kg),模型對(duì)照組給予同等體積生理鹽水,給藥30min后,兩組大鼠進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)10min,每日1次,連續(xù)7天。末次曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,將兩組大鼠灌流取腦,制作腦組織切片,利用免疫組織化學(xué)技術(shù),測(cè)定兩組大鼠BLA神經(jīng)元c-Fos蛋白的表達(dá)水平。三、酸棗仁對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠BLA神經(jīng)元信息編碼的影響選取SD雄性大鼠,適應(yīng)7天后,隨機(jī)分為模型對(duì)照組與酸棗仁組,每組10只。麻醉后,將大鼠固定在腦立體定位儀上,將16(4×4)通道在體記錄電極埋置于大鼠的BLA區(qū)域。手術(shù)后恢復(fù)4天,每日經(jīng)灌胃途徑給予酸棗仁組大鼠酸棗仁水煎液(17.5g/kg),模型對(duì)照組給予同等體積生理鹽水。每日給藥30min后,監(jiān)測(cè)兩組大鼠在曠場(chǎng)中的BLA神經(jīng)元放電信號(hào)(10min),每日1次,連續(xù)7天。以神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢环烹婎l率為指標(biāo),觀察大鼠BLA神經(jīng)元信息編碼的變化。電信號(hào)采集全部結(jié)束后,利用腦組織切片的HE染色技術(shù)判定記錄電極是否準(zhǔn)確插入BLA區(qū)。結(jié)果:第一部分狀態(tài)性焦慮大鼠的行為學(xué)與BLA神經(jīng)元c-Fos蛋白表達(dá)及信息編碼的變化一、狀態(tài)性焦慮大鼠行為學(xué)的變化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與第一天的行為學(xué)表現(xiàn)比較,大鼠的跨格次數(shù)、站立次數(shù)、修飾次數(shù)、總運(yùn)動(dòng)時(shí)間在第2-7天均無(wú)明顯變化(p0.05);進(jìn)入中央格次數(shù)在第2天增加,存在顯著性差異(p0.05),在第3-7天增加,存在極顯著性差異(p0.01);中央格運(yùn)動(dòng)時(shí)間在第2-7天增加,存在極顯著性差異(p0.01);中央格/總運(yùn)動(dòng)時(shí)間(%)在第2-7天增加,存在極顯著性差異(p0.01)。二、狀態(tài)性焦慮大鼠BLA神經(jīng)元c-Fos蛋白表達(dá)的變化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與空白對(duì)照組比較,模型組大鼠BLA神經(jīng)元c-Fos蛋白表達(dá)增多,兩組之間存在極顯著性差異(p0.01);三、狀態(tài)性焦慮大鼠BLA神經(jīng)元信息編碼的變化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:將大鼠BLA區(qū)采集到的神經(jīng)元分為A、B兩類。與基底放電頻率比較:A類神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢环烹婎l率在第1-7天均增加,兩組之間存在極顯著性差異(p0.01);B類神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢环烹婎l率在第1、4、5天增加,兩組之間存在顯著性差異(p0.05),在第2、3、6、7天增加,兩組之間存在極顯著性差異(p0.01)。第二部分酸棗仁對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠的干預(yù)作用及作用機(jī)制一、酸棗仁對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠行為學(xué)的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與模型對(duì)照組比較,酸棗仁組大鼠的跨格次數(shù)在第5、7天減少,兩組之間存在顯著性差異(p0.05);站立次數(shù)在第2、4、5、7天減少,兩組之間存在極顯著性差異(p0.01);修飾次數(shù)與總運(yùn)動(dòng)時(shí)間在1-7天均無(wú)明顯變化(p0.05);進(jìn)入中央格次數(shù)在第1天增加,兩組之間存在極顯著性差異(p0.01);中央格運(yùn)動(dòng)時(shí)間在第1、3、6天增加,兩組之間存在極顯著性差異(p0.01),在第2天增加,兩組之間存在顯著性差異(p0.05);中央格/總運(yùn)動(dòng)時(shí)間(%)在第1、3、6天增加,兩組之間存在極顯著性差異(p0.01),在第5、7天增加,兩組之間存在顯著性差異(p0.05)。二、酸棗仁對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠BLA神經(jīng)元c-Fos蛋白表達(dá)的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與模型對(duì)照組比較,酸棗仁組大鼠BLA神經(jīng)元c-Fos蛋白表達(dá)減少,兩組之間存在顯著性差異(p0.05)。三、酸棗仁對(duì)狀態(tài)性焦慮大鼠BLA神經(jīng)元信息編碼的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:將大鼠BLA區(qū)采集到的神經(jīng)元分為A、B兩類。與模型對(duì)照組比較,酸棗仁組大鼠的BLA區(qū)A類神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢环烹婎l率在第3、5、6天減少,兩組之間存在顯著性差異(p0.05);B類神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢环烹婎l率在第3、6天減少,兩組之間存在顯著性差異(p0.05)。結(jié)論:1.通過(guò)曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)復(fù)制大鼠狀態(tài)性焦慮,大鼠表現(xiàn)出基底外側(cè)杏仁核神經(jīng)元c-Fos蛋白表達(dá)增加,以及基底外側(cè)杏仁核神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢环烹婎l率增加。2.酸棗仁具有拮抗?fàn)顟B(tài)性焦慮的作用。3.酸棗仁的抗?fàn)顟B(tài)性焦慮的作用機(jī)制與抑制基底外側(cè)杏仁核神經(jīng)元c-Fos蛋白表達(dá)、及降低基底外側(cè)杏仁核神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢环烹婎l率有關(guān)。
【圖文】：

逡逑的細(xì)胞核呈棕黃色或棕褐色，陰性神經(jīng)元的細(xì)胞核呈藍(lán)紫色。（圖１－８）逡逑Ａ民尸＇邐７￣ｌ（Ａ）逡逑十，逡逑／邋ｊ邋０ＬＡ邋ｒ邋Ｒｌ．ｐ逡逑」，，ｌ逡逑．／？Ｘ．．．邋．邋（Ｂ）邐／＾ｘ邋？邋ｃｃ＞逡逑．．：：．．逡逑；／邋ｂｕ．邋／：邋，邋／邋ｂｕ邋ｉ：－逡逑圖１－８大鼠ＢＬＡ區(qū)域進(jìn)行ｃ－Ｆｏｓ蛋白免疫組化的陰性對(duì)照和陽(yáng)性反應(yīng)。逡逑（注：圖Ａ為大鼠腦立體定位圖譜所示ＢＬＡ區(qū)位置，圖Ｂ為正常羊血清代替ｏＦｏｓ逡逑一抗的陰性對(duì)照，圖Ｃ為使用Ｃ－Ｆｏｓ邋—抗的陽(yáng)性反應(yīng)。逡逑切片圖放大倍數(shù)為１００倍，標(biāo)尺為２００ｐｍ。）逡逑利用邋Ｉｍａｇｅｐｒｏ－Ｐｌｕｓ邋６．０邋專業(yè)圖像軟件（Ｍｅｄｉａ邋Ｃｙｂｅｒｎｅｔｉｃｓ邋Ｉｎｃ，邋Ｓｉｌｅｒ邋Ｓｐｒｉｎｇ，邋ＭＤ，逡逑ＵＳＡ）統(tǒng)計(jì)每只大鼠ＢＬＡ區(qū)連續(xù)切片中ｃ－Ｆｏｓ陽(yáng)性神經(jīng)元的累積光密度（ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ逡逑ｏｐｔｉｃａｌ邋ｄｅｎｓｉｔｙ

逡逑的細(xì)胞核呈棕黃色或棕褐色，陰性神經(jīng)元的細(xì)胞核呈藍(lán)紫色。（圖１－８）逡逑Ａ民尸＇邐７￣ｌ（Ａ）逡逑十，逡逑／邋ｊ邋０ＬＡ邋ｒ邋Ｒｌ．ｐ逡逑」，，，ｌ逡逑．／？Ｘ．．．邋．邋（Ｂ）邐／＾ｘ邋？邋ｃｃ＞逡逑．．：：．．逡逑；／邋ｂｕ．邋／：邋，邋／邋ｂｕ邋ｉ：－逡逑圖１－８大鼠ＢＬＡ區(qū)域進(jìn)行ｃ－Ｆｏｓ蛋白免疫組化的陰性對(duì)照和陽(yáng)性反應(yīng)。逡逑（注：圖Ａ為大鼠腦立體定位圖譜所示ＢＬＡ區(qū)位置，圖Ｂ為正常羊血清代替ｏＦｏｓ逡逑一抗的陰性對(duì)照，圖Ｃ為使用Ｃ－Ｆｏｓ邋—抗的陽(yáng)性反應(yīng)。逡逑切片圖放大倍數(shù)為１００倍，標(biāo)尺為２００ｐｍ。）逡逑利用邋Ｉｍａｇｅｐｒｏ－Ｐｌｕｓ邋６．０邋專業(yè)圖像軟件（Ｍｅｄｉａ邋Ｃｙｂｅｒｎｅｔｉｃｓ邋Ｉｎｃ，邋Ｓｉｌｅｒ邋Ｓｐｒｉｎｇ，邋ＭＤ，逡逑ＵＳＡ）統(tǒng)計(jì)每只大鼠ＢＬＡ區(qū)連續(xù)切片中ｃ－Ｆｏｓ陽(yáng)性神經(jīng)元的累積光密度（ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ逡逑ｏｐｔｉｃａｌ邋ｄｅｎｓｉｔｙ
【學(xué)位授予單位】：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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3 潘t熺

本文編號(hào)：2679889