發(fā)布時間：2020-05-24 21:17

【摘要】：帕金森病(Parkinson disease,PD)又稱震顫麻痹,是錐體外系功能紊亂引起的一種慢性中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,病理上主要表現(xiàn)為腦和(或)脊髓發(fā)生神經(jīng)元退行性變性、脫失,并伴有神經(jīng)細(xì)胞大量死亡。迄今為止,該病的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。有研究表明氧化應(yīng)激與PD密切相關(guān)。桃紅四物湯(Taohongsiwu Decoction,THSWT)是活血化瘀、養(yǎng)血補血的代表方,在臨床上有非常廣泛的應(yīng)用,常用于血瘀引起的多種病癥。近年來研究發(fā)現(xiàn),桃紅四物湯及主要成分在抗氧化損傷、神經(jīng)保護(hù)等方面能夠發(fā)揮很好的效果。本實驗利用魚藤酮誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷模型進(jìn)行體外實驗研究。待細(xì)胞貼壁達(dá)70-80%時,通過MTT法依次進(jìn)行魚藤酮損傷模型的建立、桃紅四物湯及主要成分(羥基紅花黃色素A、阿魏酸、苦杏仁苷、梓醇和芍藥苷)安全濃度范圍篩選和發(fā)揮保護(hù)作用時的濃度篩選;利用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化;通過Elisa實驗比較細(xì)胞損傷前后α-synuclein寡聚體形成情況;通過JC-1線粒體膜電位檢測評價藥物干預(yù)前后線粒體膜電位的變化。此外,通過western blot實驗比較給藥干預(yù)前后Bax、bcl-2、ERK1/2、p-ERK、caspase-3、p53等氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)水平的變化,初步探討桃紅四物湯及其有效成分發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制。結(jié)果顯示,在安全劑量范圍內(nèi),桃紅四物湯及羥基紅花黃色素A、梓醇和芍藥苷等成分均可以提高魚藤酮損傷的SH-SY5Y細(xì)胞活力(P0.01),且呈劑量依賴性增加。倒置顯微鏡下觀察到細(xì)胞變圓,突觸短而少。在魚藤酮誘導(dǎo)的PD模型中,α-synuclein寡聚體形成顯著增多(P0.001),而桃紅四物湯可以抑制α-synuclein寡聚體形成(P0.05)。桃紅四物湯及羥基紅花黃色素A、阿魏酸、苦杏仁苷、梓醇和芍藥苷等可以逆轉(zhuǎn)魚藤酮導(dǎo)致的Δψ下降的現(xiàn)象。Western blot結(jié)果顯示桃紅四物湯、羥基紅花黃色素A和芍藥苷等能夠下調(diào)Bax/Bcl-2、caspase-3、p53的表達(dá)水平,同時上調(diào)p-ERK/ERK,從而拮抗魚藤酮引起的細(xì)胞凋亡。而阿魏酸和苦杏仁苷對p53、梓醇對p-ERK/ERK無明顯逆轉(zhuǎn)作用。綜上所述,桃紅四物湯在神經(jīng)保護(hù)作用方面有積極作用。此外,體外實驗還發(fā)現(xiàn)桃紅四物湯中的主要成分羥基紅花黃色素A、阿魏酸、苦杏仁苷、梓醇和芍藥苷同樣具有保護(hù)神經(jīng)元的作用。這可能是氧化應(yīng)激、線粒體功能、細(xì)胞凋亡共同作用的結(jié)果,可能由ERK通路介導(dǎo)發(fā)生(梓醇除外)。
【學(xué)位授予單位】：河北北方學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張偉;陳芒芒;;桃紅四物湯對骨折延遲愈合患者血液流變學(xué)和炎癥因子水平的影響[J];浙江中醫(yī)雜志;2017年01期

2 王飛龍;韓嵐;樊玲;汪蒙蒙;咼瑜琪;郭棟棟;吳歡茹;彭代銀;;桃紅四物湯對實驗性腦缺血大鼠血清中ET-1,Ang-1,VEGF的影響[J];中國實驗方劑學(xué)雜志;2017年01期

3 李雙;郭春燕;劉豐熙;;桃紅四物湯對魚藤酮誘導(dǎo)帕金森細(xì)胞模型保護(hù)作用[J];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志;2016年10期

4 利順欣;彭智;尚發(fā)軍;;桃紅四物湯對老年急性腦梗死患者神經(jīng)功能影響的臨床研究[J];中藥藥理與臨床;2016年04期

5 范瑞娟;羅亞非;陳永順;何光志;唐中生;陸瑩;;桃紅四物湯對大鼠腦缺血再灌注損傷后大腦皮質(zhì)神經(jīng)元Caspase-3與p53表達(dá)的影響[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2015年06期

6 王雁梅;申現(xiàn)鋒;康美清;史恒軍;;桃紅四物湯中阿魏酸的含量測定[J];中醫(yī)學(xué)報;2015年08期

7 蔡江暉;饒夢琳;唐蜜;向麗;封莎;肖成燕;劉穎菊;;芍藥苷激活2型大麻素受體保護(hù)腦缺血再灌注大鼠海馬神經(jīng)元[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2015年04期

8 季兆潔;韓嵐;彭代銀;陳衛(wèi)東;李珊珊;周貞貞;朱光宇;;桃紅四物湯對早期閉合性骨折祛瘀生新作用的初步探討[J];中國實驗方劑學(xué)雜志;2015年03期

9 東惟玲;方琪;單立冬;;新型PD模型研究進(jìn)展[J];中國神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志;2014年03期

10 蔡f+;盧敏;;桃紅四物湯對大白兔股骨干骨折術(shù)后血液流變學(xué)的影響[J];湖南中醫(yī)雜志;2014年02期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 秦崢;羥基紅花黃色素A抗興奮毒性神經(jīng)元死亡的神經(jīng)保護(hù)作用[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前5條

1 張琳;α-突觸核蛋白與帕金森病的相關(guān)性[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2016年

2 季兆潔;桃紅四物湯對血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及機(jī)制研究[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2015年

3 胡楠;桃紅四物湯對骨痂中成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞形態(tài)影響的實驗研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2012年

4 彭友華;PF對TNF-a誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞增殖、STAT-3激活及MMP-2、VEGF分泌的影響[D];汕頭大學(xué);2011年

5 王悅;魚藤酮誘導(dǎo)多巴胺能神經(jīng)細(xì)胞損傷的機(jī)制研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

，

本文編號：2679003