【摘要】：目的:觀察淫羊藿苷對產(chǎn)前應(yīng)激子鼠行為學(xué)影響,檢測海馬區(qū)、前額葉皮層區(qū)Ⅰ族代謝型谷氨酸受體mGluR1、mGluR5和轉(zhuǎn)運(yùn)體EAAT2表達(dá)變化,探究淫羊藿苷的抗抑郁作用。方法:1.對懷孕后期SD大鼠,建立產(chǎn)前慢性束縛應(yīng)激動物模型,將雄性子鼠隨機(jī)分成5組:空白對照組(CON)、產(chǎn)前應(yīng)激組(PS)、生理鹽水組(NS)、淫羊藿苷高劑量組(80mg/kg/day)、淫羊藿苷低劑量組(40mg/kg/day)。2.分別運(yùn)用糖水偏好、強(qiáng)迫游泳和曠場實(shí)驗(yàn)評價各組子鼠抑郁樣行為。3.采用蛋白免疫印跡法(WesternBlot)測定各組子鼠海馬區(qū)、前額葉皮層區(qū) mGluRl、mGluR5、EAAT2 蛋白表達(dá)。4.采用實(shí)時定量PCR實(shí)驗(yàn)測定各組子鼠海馬區(qū)及皮層區(qū)mGluR1、mGluR5、EAAT2mRNA 表達(dá)。結(jié)果:1.糖水偏好實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,五組子鼠飲水總量不變,與CON相比較,PS組糖水偏好所占百分?jǐn)?shù)明顯下降,淫羊蕾苷高低劑量組糖水偏好所占百分?jǐn)?shù)與NS組相比明顯上升。2.強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,PS誘導(dǎo)子鼠不動時間明顯延長,掙扎時間明顯縮短,淫羊藿苷灌胃給藥后不動時間顯著縮短,掙扎時間延長。3.廣場實(shí)驗(yàn)中,PS組子鼠穿越中央方格的次數(shù),中央格停留時間較CON組顯著減少,淫羊藿苷(80mg/kg或40mg/kg)給藥后,子鼠穿越中央格次數(shù)和中央格停留時間顯著增加;PS也能導(dǎo)致直立次數(shù)減少,淫羊藿苷干預(yù)后直立次數(shù)較NS組顯著增加,但各組間并沒有統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05);在曠場試驗(yàn)中,五組子鼠的理毛次數(shù)也無顯著差異性(p0.05)。4.Western Blot結(jié)果表明,在海馬區(qū)和前額葉皮層區(qū),PS組與CON組相比,mGluR1、mGluR5蛋白表達(dá)顯著升高,EAAT2蛋白表達(dá)顯著降低;淫羊藿苷高劑量組能使PS子鼠海馬區(qū)、前額葉皮層區(qū)mGluR5蛋白表達(dá)明顯下調(diào),海馬區(qū)EAAT2蛋白水平明顯上調(diào),前額葉皮層區(qū)mGluR1蛋白水平顯著下調(diào);與NS組相比,而淫羊蕾苷低劑量組使海馬區(qū)與皮層區(qū)mGluR1蛋白水平明顯降低,EAAT2蛋白水平明顯增高,使海馬區(qū)mGluR5蛋白水平顯著下調(diào)。5.實(shí)時定量PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,PS子鼠海馬區(qū)與皮層區(qū)mGluR1、mGluR5 mRNA表達(dá)顯著升高,EAAT2mRNA表達(dá)顯著降低;淫羊藿苷灌胃給藥后(80mg/kg或40mg/kg),可顯著逆轉(zhuǎn)PS 鼠海馬區(qū)與前額葉皮層區(qū)mGluR1、mGluR5 及 EAAT2 mRNA 表達(dá)。結(jié)論:1.PS引起雄性子鼠抑郁樣行為,淫羊藿苷灌胃給藥能改善雄性子代鼠抑郁樣行為。2.PS引起雄性子鼠海馬區(qū)、前額葉皮層區(qū)I族mGluRs過表達(dá),EAAT2表達(dá)降低,淫羊藿苷能逆轉(zhuǎn)兩個腦區(qū)I族mGluRs和EAAT2的表達(dá),緩解雄性子代鼠抑郁樣行為。
【圖文】：

圖１谷氨酸突觸傳遞圖逡逑１．４谷氨酸受體及轉(zhuǎn)運(yùn)體（ＥＡＡＴｓ）逡逑１．４．邋１谷氨酸受體與ＰＳ逡逑谷氨酸受體可以分為兩類，離子型受體（ｉｏｎｏｔｒｏｐｉｃ邋ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ｉＧｌｕＲｓ）和代逡逑謝型受體（ｍｅｔａｂｏｔｒｏｐｉｃ邋ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ｍＧｌｕＲｓ）。ｉＧｌｕＲｓ邋主要可分為三類，ＮＭＤＡＲ、逡逑ＡＭＰＡ及ＫＡＲ，這些ｉＧｌｕＲｓ通常與離子通道相結(jié)合，轉(zhuǎn)變?yōu)閺?fù)合物，主要用于逡逑轉(zhuǎn)導(dǎo)快反應(yīng)信號而ｍＧｌｕＲｓ—般是與細(xì)胞膜內(nèi)的Ｇ－蛋白相偶聯(lián)，根據(jù)氨基逡逑酸序列的同源性及胞內(nèi)信號傳導(dǎo)機(jī)制的不同可將其分為３族８亞型，Ｉ族包括逡逑ｍＧｌｕＲｌ和ｍＧｌｕＲ５，可被Ｑｕｉｓ活化并與磷脂酶Ｃ邋（ＰＬＣ）途徑相偶聯(lián)，對調(diào)節(jié)逡逑后突觸興奮性及突觸可塑性起到關(guān)鍵的作用［５９，６（）］；邋ＩＩ族ｍＧｌｕＲｓ包含ｍＧｌｕＲ２和逡逑１３逡逑

圖３淫羊藿苷氋效液相色譜圖逡逑實(shí)驗(yàn)方法逡逑１實(shí)驗(yàn)動物分組逡逑實(shí)驗(yàn)用雄性大鼠體重保持在２８０－３５０ｇ，雌性大鼠體重保持在２３０－２５０ｇ，３只逡逑大鼠和１只雄性大鼠于實(shí)驗(yàn)當(dāng)晚合籠飼養(yǎng)，第二天清晨進(jìn)行陰道涂片檢查，逡逑學(xué)顯微鏡下檢測到精子呈陽性的雌鼠被單獨(dú)喂養(yǎng)，并被認(rèn)定為妊娠第０天。逡逑隨后被隨機(jī)分成對照組和應(yīng)激組，對照組不進(jìn)行任何干預(yù)，應(yīng)激組的每只孕逡逑給予束縛應(yīng)激。孕鼠于第２１天分娩，子鼠與母親同籠飼養(yǎng)至產(chǎn)后第２１天逡逑Ｄ２１），子鼠斷奶，雌雄子代鼠分開飼養(yǎng)。每組隨機(jī)抽�。钢蛔哟凼筮M(jìn)行逡逑，同一窩選取的子代雄鼠不得多于兩只。逡逑實(shí)驗(yàn)將子代雄鼠共分為５組，對照組（Ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ，邋Ｃ０Ｎ），８只，來自對逡逑孕鼠，子代出生后不進(jìn)行任何干預(yù)；產(chǎn)前應(yīng)激組（Ｐｒｅｎａｔａｌ邋Ｓｔｒｅｓｓ邋ｇｒｏｕｐ，，邋ＰＳ），逡逑
【學(xué)位授予單位】：西北大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

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本文編號：2678327