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平菇子實(shí)體化學(xué)成分及不同極性部位對(duì)四種細(xì)胞增殖作用的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-22 20:38
【摘要】:平菇(Pleurotus ostreatus)是一種常見的藥食兩用真菌。平菇子實(shí)體中含有多種化學(xué)成分主要為多糖、甾類、揮發(fā)油類、多酚類等,具有抗腫瘤、抗炎、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、降血糖、降血脂、保肝、殺蟲、抑菌等多種藥理活性,對(duì)治療股骨頭壞死、阿爾茨海默癥也有一定療效。本文首先綜述了平菇的化學(xué)成分、藥理活性,然后提取分離純化平菇子實(shí)體中的化學(xué)成分,并對(duì)其結(jié)構(gòu)鑒定,為更好的研究開發(fā)平菇資源,并將其應(yīng)用到醫(yī)藥、保健品、食品等相關(guān)領(lǐng)域提供參考依據(jù)。1.平菇子實(shí)體化學(xué)成分的系統(tǒng)分離鑒定研究。通過數(shù)次硅膠柱色譜、制備薄層色譜法、ODS反向柱色譜、凝膠柱色譜、制備型高效液相色譜等多種分離技術(shù),對(duì)平菇不同極性部位進(jìn)行了分離純化,共得到19個(gè)化合物,結(jié)合1H-NMR、13C-NMR、DEPT、MS等多種光譜共鑒定出16個(gè)化合物,分別為麥角甾醇(ergosterol)(1)、麥角甾-7,9(11),22-三烯-3β,5α,6α-三醇(ergost-7,9(11),22-trien-3β,5α,6α-triol)(2)、鄰苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate)(3)、鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(bis(2-ethylhexyl)benzene-1,2-di carboxyl ate)(4)、鄰苯二甲酸二戊酯(dipentyl phthalate)(5)、鄰苯二甲酸二異丁酯(diisobutyl phthalate)(6)、鄰苯二甲酸二(2-甲基)庚酯(bis(2-methylheptyl)phthalate)(7)、苯丙氨酸(phenylalanine)(8)、焦谷氨酸甲酯(pyroglutamic acid methyl ester)(9)、甲酰胺(Formamide)(10)、leptosphaerin(11)、1,2-dihydroxymintlactone(12)、α-dimorphecolic acid(13)、4-hydroxy-17R-methylincisterol(14)、volemolide(15)、(1'R,2'R,3'S,4'R)-1,2,4-三唑核苷((1'R,2'R,3'S,4'R)-1,2,4-triazole nucleoside)(16)。其中在石油醚部位共鑒定出5個(gè)化合物,分別為化合物1、6、13-15,在乙酸乙酯部位得到6個(gè)化合物,分別為化合物2-5、7、12,在正丁醇部位分離得到5個(gè)化合物,分別為化合物8-11、16。其中化合物2-15為首次從平菇中分離獲得。2.不同極性部位對(duì)四種細(xì)胞增殖作用的研究。本文采用CCK-8法研究了平菇的乙醇浸膏、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位四種不同極性部位對(duì)腺癌人類肺泡基底上皮細(xì)胞(A549)、人肝癌細(xì)胞(HepG-2)、大鼠成肌細(xì)胞(L6)、小鼠成骨細(xì)胞(MC3T3)的抑制或增殖作用。結(jié)果表明:乙醇浸膏對(duì)HepG-2腫瘤細(xì)胞的抑制作用效果最好,IC50值為35.3μg·mL-1,在500.0μg·mL-1時(shí),抑制率可達(dá)到66.6%,乙酸乙酯部位對(duì)HepG-2腫瘤細(xì)胞的IC50值為42.1 μg·mL-1,正丁醇部位對(duì)HepG-2腫瘤細(xì)胞的IC50值為48.9 μg·mL-1,石油醚部位較弱,IC50值為88.5μg·mL-1;平菇各部位浸膏對(duì)A549腫瘤細(xì)胞作用較弱;平菇乙醇浸膏對(duì)L6成肌細(xì)胞的促增殖作用稍優(yōu)于陽性藥,但其它部位浸膏作用效果明顯弱于乙醇浸膏;平菇乙酸乙酯部位對(duì)MC3T3成骨細(xì)胞的促增殖作用最好且明顯優(yōu)于陽性藥,在250.0 μg·mL-1時(shí),細(xì)胞活力可達(dá)到199.7%,其它部位浸膏作用較弱。本文首先對(duì)平菇子實(shí)體的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分離純化,并做了不同極性部位的藥理活性初篩,可為下一步探究單體化合物藥理活性提供理論依據(jù)。
【圖文】:

平菇,香氣,維生素


平菇中麥角甾醇可經(jīng) UV-B 輻射后轉(zhuǎn)化成維生素 D[51],由此看來可作為生產(chǎn)維生素 D 的天然原料。a b c圖 1.1 平菇中甾類化合物結(jié)構(gòu)Fig.1.1 Chemical structures of steroids in P. ostreatus 揮發(fā)性化合物平菇鮮品具有特殊香氣,干品香氣會(huì)減輕,,可能為干燥后會(huì)損耗掉部分揮發(fā)性中揮發(fā)性成分主要包括 1,1-二乙氧基乙烷、1-辛烯-3-醇、3-辛酮、3-辛醇和(1E,碳三烯-5,14-二醇、油酸、亞油酸、亞油酸乙酯、十五烷酸(d)、正十六烷酸(f)、9-十八碳烯酸、3-甲基環(huán)戊酮、2-戊基呋喃、四甲基硫脲、2,6-二叔丁酚等[39,52-54]。部分化合物結(jié)構(gòu)見圖 1.2。

平菇,文獻(xiàn)來源,正十五烷,D-甘露醇


圖 1.3 平菇中其它類化合物結(jié)構(gòu)Fig.1.3 Chemical structures of others in P. ostreatus表 1.1 平菇子實(shí)體主要化學(xué)成分Table.1.1 Main chemical compositions of fruiting bodies of P. ostreatus別 化合物 文獻(xiàn)來源化合物 22E,24R-5α,6α-環(huán)氧麥角甾-8(14),22-二烯-3β,7α-二醇(22E,24R-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-diene-3β,7α-diol)[39]麥角甾醇(22E,24R-ergosta-5,7,22-trien-3β-ol)[39,50-51]麥角甾醇過氧化物(24R-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol)[39]及苷類 D-甘露醇(D-mannitol)[39,50]三唑核苷(1’R,2’R,3’R,4’R-1,2,4-ribavirin)[50]腺苷(adenosine)[39]尿苷(uridine)[39,50]酸類 正十六烷酸(palmitic acid)[50]正十五烷酸(penta- decanoic acid)[50]
【學(xué)位授予單位】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R285;R284.1

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