【摘要】：目的乳腺癌嚴(yán)重危害女性健康,且發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。他莫昔芬耐藥是臨床面臨的重要問(wèn)題,耐藥的發(fā)生很大程度上限制了患者內(nèi)分泌治療獲益。中藥槐耳具有抗多種腫瘤作用,本研究探討槐耳清膏對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖、凋亡的以及他莫昔芬耐藥性的影響。方法體外培養(yǎng)乳腺癌細(xì)胞MCF-7和乳腺癌他莫昔芬耐藥細(xì)胞LCC2,用不同濃度的槐耳清膏作用于兩細(xì)胞。采用MTT法檢測(cè)槐耳清膏對(duì)乳腺癌MCF-7細(xì)胞及他莫昔芬耐藥的LCC2細(xì)胞增殖的影響。并通過(guò)MTT法驗(yàn)證槐耳清膏能否增強(qiáng)耐藥細(xì)胞對(duì)他莫昔芬的敏感性。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)MCF-7、LCC2細(xì)胞經(jīng)濃度梯度的槐耳清膏作用48 h后細(xì)胞凋亡狀態(tài)。Western blot方法檢測(cè)他莫昔芬耐藥細(xì)胞LCC2經(jīng)濃度梯度槐耳清膏作用48 h后,細(xì)胞內(nèi)ERα、AIB1、Survivin等他莫昔芬耐藥相關(guān)蛋白表達(dá)情況。計(jì)量資料多樣本間比較采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)單因素方差分析,兩樣本間比較采用t檢驗(yàn)。結(jié)果1.MTT實(shí)驗(yàn)表明槐耳清膏能明顯抑制乳腺癌細(xì)胞MCF-7、LCC2增殖,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05,兩細(xì)胞在24 h、48 h、72 h的IC_(50)分別為(9.58±0.52、6.43±0.20、4.25±0.13 mg/mL)vs(18.16±0.16、13.10±0.97、8.66±0.18 mg/mL),表明槐耳清膏對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖抑制作用更明顯;2.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示槐耳清膏能誘導(dǎo)MCF-7、LCC2兩種細(xì)胞發(fā)生不同程度的早期、晚期凋亡。隨藥物濃度增高,發(fā)生早期凋亡細(xì)胞數(shù)目逐漸增多。MCF-7細(xì)胞經(jīng)0、2、4、8 mg/mL槐耳清膏作用48 h后,不同藥物濃度作用下細(xì)胞早期凋亡率分別為(2.03±0.61)%、(6.27±1.16)%、(12.53±0.57)%、(14.27±1.10)%,單因素方差分析,F=118.42,P0.001。LCC2細(xì)胞經(jīng)0、2、4、8 mg/mL槐耳清膏作用48 h后,不同濃度藥物作用下細(xì)胞早期凋亡率分別為(3.33±0.64)%、(7.17±1.25)%、(10.27±2.02)%、(12.77±0.21)%,單因素方差分析,F=33.59,P0.001,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;3.Western blot顯示槐耳清膏能下調(diào)他莫昔芬耐藥細(xì)胞LCC2中ERα、AIB1、Survivin等蛋白表達(dá);分別用0、2、4、8、16 mg/mL槐耳清膏作用后,與對(duì)照組相比ERα表達(dá)逐漸減少,P0.01。藥物作用前,與MCF-7細(xì)胞相比較,AIB1、Survivin在他莫昔芬耐藥細(xì)胞LCC2中表達(dá)明顯增多,經(jīng)不同濃度(0、2、4、8、16 mg/mL)槐耳作用后,LCC2細(xì)胞中AIB1、Survivin表達(dá)與對(duì)照組相比明顯呈遞減趨勢(shì),P0.01;4.最后MTT試驗(yàn)表明,2 mg/mL和4 mg/mL槐耳清膏與他莫昔芬聯(lián)合作用于LCC2細(xì)胞均能增強(qiáng)他莫昔芬耐藥細(xì)胞對(duì)他莫昔芬的敏感性,并且較高濃度的槐耳清膏更能增強(qiáng)他莫昔芬對(duì)耐藥細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用。結(jié)論槐耳清膏能以濃度依賴(lài)的方式抑制乳腺癌MCF-7、LCC2細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)其發(fā)生凋亡,降低他莫昔芬耐藥細(xì)胞LCC2中ERα、AIB1、survivin等他莫昔芬耐藥相關(guān)蛋白表達(dá),增強(qiáng)他莫昔芬耐藥細(xì)胞對(duì)他莫昔芬敏感性。
【圖文】：

20-7）and B (LCC2) cells were treated with increased conc~16 mg/mL）for 24、48、72 h, then the cell viability was hod. Data are shown as mean ± SD for the three replicat group. 法檢測(cè)不同濃度及時(shí)間槐耳清膏對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖的Cell proliferation assessed by MTT after increased conceatment for different time

Data are shown as mean ± SD for the three replicates, *P<0.05, **P<0.01 vscontrol group.圖2 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同濃度槐耳清膏處理后對(duì)細(xì)胞凋亡的影響4 mg/mL 8 mg/mL
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 楊?lèi)?ài)琳;胡仲冬;屠鵬飛;;槐耳抗腫瘤作用研究進(jìn)展[J];中國(guó)中藥雜志;2015年24期

2 李慶霞;潘海燕;刑雅軍;張炎;苗軍程;張秀智;蘭艷芹;;AIB1蛋白在乳腺癌中的表達(dá)及在內(nèi)分泌治療中的臨床意義[J];中國(guó)腫瘤;2012年06期

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本文編號(hào)：2676537