【摘要】：目前組織工程學(xué)是解決組織和器官替代品不足的一種有效方式。選擇合適的生物材料來(lái)模擬細(xì)胞外基質(zhì)是組織工程學(xué)的重點(diǎn)。細(xì)胞外基質(zhì)是細(xì)胞之間的動(dòng)態(tài)富含水的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),由膠原、蛋白聚糖及糖蛋白等大分子物質(zhì)組成,而這種結(jié)構(gòu)與具有多孔三維網(wǎng)狀的水凝膠很類(lèi)似,所以目前組織和器官體外重建時(shí)常選用水凝膠作為細(xì)胞外基質(zhì)。但天然的細(xì)胞外基質(zhì)分子除膠原外,其它分子制備成本較高,我們前期研究顯示中藥多糖活性廣泛,如果能與明膠制備成水凝膠,則可能模擬細(xì)胞外基質(zhì),甚至賦予細(xì)胞外基質(zhì)更多的活性。因此本研究選擇了兩種具有很多生物活性的中藥多糖,大黃多糖和淫羊藿多糖,與明膠一起制備了水凝膠,探索該水凝膠在組織工程學(xué)中的應(yīng)用的可能性。本研究首先提取了大黃多糖和淫羊藿多糖,然后用不同量的高碘酸鈉氧化了兩種多糖,且測(cè)定了氧化后多糖中的醛基含量;用乙二胺改性明膠,且用TNBS法(三硝基苯磺酸法)測(cè)定改性前后明膠中的氨基含量。再以氧化后的大黃多糖和氨基化明膠為材料,按體積比為1:1、2:1、1:2制備出六種水凝膠(DGH-1、DGH-2、DGH-3、DGH-1’、DGH-2’、DGH-3’),氧化后的淫羊藿多糖也用此法制備了六種水凝膠(YGH-1、YGH-2、YGH-3、YGH-1’、YGH-2’、YGH-3’),通過(guò)電鏡分析、紅外光譜分析、體外溶脹、降解、釋放實(shí)驗(yàn)、流變分析、細(xì)胞相容性實(shí)驗(yàn)等對(duì)制備的水凝膠進(jìn)行評(píng)價(jià),紅外光譜分析結(jié)果表明,制備的大黃多糖明膠水凝膠出現(xiàn)了席夫堿鍵的特征吸收峰,電鏡結(jié)果顯示大黃多糖明膠水凝膠和淫羊藿多糖明膠水凝膠都具有明顯的多孔結(jié)構(gòu),且互相貫穿連接,多孔的直徑大小不一,從幾十微米到幾百微米不等。體外溶脹結(jié)果表明,在酸性溶液中,大黃多糖明膠水凝膠和淫羊藿多糖明膠水凝膠的溶脹率都高于中性和堿性溶液。體外降解結(jié)果顯示,在測(cè)試的降解期限內(nèi),多糖和氨基化明膠的體積比為1:1時(shí),大黃多糖明膠水凝膠和淫羊藿多糖明膠水凝膠的降解率都高于其它比例。體外釋放結(jié)果表明,在釋放144h后,多糖和氨基化明膠的體積比為1:1時(shí),大黃多糖明膠水凝膠和淫羊藿多糖明膠水凝膠的釋放率都高于其它比例。流變結(jié)果顯示,兩種多糖水凝膠都具有一定的機(jī)械強(qiáng)度。細(xì)胞相容性結(jié)果顯示,兩種多糖水凝膠對(duì)BMSC細(xì)胞(骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞)無(wú)毒性,且具有一定的促增殖作用。綜上所述,由共價(jià)交聯(lián)法制備的大黃多糖明膠水凝膠和淫羊藿多糖明膠水凝膠,可以在模擬細(xì)胞外基質(zhì),組織工程學(xué)中有一定的應(yīng)用潛力。
【圖文】：

大黃多糖的色譜圖

12圖 2.2 淫羊藿多糖的色譜圖圖中 LS 為激光掃描，DRI 為示差掃描，根據(jù)軟件分析后得出大黃多糖的重均分子量(Mw)為 1.682×106，多分散系,數(shù)(Mw/Mn)為 2.764，，屬于中等分布寬度樣品，淫羊藿多糖的重均分子量(Mw)為 6.495×105，多分散系,數(shù)(Mw/Mn)為 2.898，也屬于中等分布寬度樣品；多分散系數(shù)(Mw/Mn) 在 2 ～ 3 時(shí)，屬于中等分布寬度樣品，多分散系數(shù)接近 1 時(shí)，屬于窄分布樣品，當(dāng)多分散系數(shù)(Mw/Mn)等于 1 時(shí)，則可以認(rèn)定待測(cè)樣品的相對(duì)分子質(zhì)量分布是均一的[122]。2.4.2 大黃多糖、淫羊藿多糖的含量由圖 2.3 可知，葡萄糖的標(biāo)準(zhǔn)方程為 y=8.7382x+0.0193，將測(cè)得大黃多糖的吸光度為 0.521 和淫羊藿多糖的吸光度 0.333 代入到該方程，最后推算出提取的大黃多糖的含
【學(xué)位授予單位】：蘭州理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R283.6

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本文編號(hào)：2670207