【摘要】：目的:制備MRI可見的酶響應(yīng)性的透明質(zhì)酸兩親性聚合物膠束,并將去氫駱駝蓬堿包裹在內(nèi),在此基礎(chǔ)上,對(duì)聚合物膠束的體外性質(zhì)和體外抗腫瘤活性進(jìn)行了研究。方法:首先將透明質(zhì)酸的羧基與3,5雙(三氟甲基)芐胺的氨基通過酰胺化反應(yīng)得到透明質(zhì)酸三氟甲基兩親性聚合物,通過紅外光譜,核磁共振~1H-NMR和~(19)F-NMR法對(duì)聚合物結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征,并計(jì)算其取代度。以取代度為指標(biāo),對(duì)處方進(jìn)行摸索,以最優(yōu)處方采用透析法制備空白膠束和載去氫駱駝蓬堿膠束,并對(duì)形成膠束的粒徑、電位、形態(tài)、釋放度、酶響應(yīng)性進(jìn)行表征。建立CD44受體高表達(dá)的人乳腺癌MADA-MB231細(xì)胞和CD44受體低表達(dá)的MCF-7兩種細(xì)胞模型,分別考察膠束的細(xì)胞毒性、細(xì)胞攝取、細(xì)胞凋亡情況,從而對(duì)膠束的體外抑瘤效果和CD44靶向性進(jìn)行考察。在此基礎(chǔ)上,建立荷瘤裸鼠模型,將膠束給予動(dòng)物后,采用核磁共振成像儀考察膠束的MRI成像效果。結(jié)果:核磁共振~1H-NMR、~(19)F-NMR和紅外光譜結(jié)果均顯示本研究成功制備了HA-F聚合物,動(dòng)態(tài)光散射粒度儀測得空白膠束粒徑為(344.4?25.46)nm、PDI為(0.283±0.15)、電位為(-23.50?1.47)mv。經(jīng)處方篩選,HA∶F的最佳反應(yīng)比例為10∶10,HM∶HA-F的最佳比例為10∶15,以最優(yōu)處方制備三批載藥膠束,測得載藥膠束載藥量為(2.78±0.81)%、粒徑為(255.1±27.8)nm、PDI為(0.27±0.06)、電位為(-23.84±0.56)mv。釋放度測定結(jié)果顯示,載藥膠束在pH5.0的PBS溶液加酶處理組的釋放量比在pH5.0的PBS溶液不加酶的對(duì)照組的釋放量明顯增加,表明膠束具有pH響應(yīng)性和酶響應(yīng)性。細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與人乳腺癌細(xì)胞MCF-7相比,膠束在高表達(dá)CD44受體的人乳腺癌MDA-MB231細(xì)胞中攝取增多,并與溶酶體共定位,證明了膠束的靶向性;空白膠束加透明質(zhì)酸酶處理3h后,F信號(hào)變強(qiáng)而不加酶對(duì)照組信號(hào)幾乎為零,驗(yàn)證了酶響應(yīng)性效果;各個(gè)濃度的空白膠束對(duì)MCF-7與MDA-MB231細(xì)胞在24 h、48 h、72 h基本無毒性,20μg·mL~(-1)的載藥膠束作用于MCF-7細(xì)胞48 h后,細(xì)胞活力減少為50%左右,作用72h后,細(xì)胞活力降至25%左右,說明載藥膠束作用可達(dá)72 h,顯示了載藥膠束的緩釋性。載藥膠束對(duì)MCF-7細(xì)胞在24 h的IC50為20μg·mL~(-1),對(duì)MDA-MB231細(xì)胞24h的IC50為10μg·mL~(-1),說明載藥膠束對(duì)CD44受體高表達(dá)的MDA-MB-231細(xì)胞的抑制率更強(qiáng)。在注射HA-F聚合物膠束之前,腫瘤部位沒有明顯的信號(hào);在注射HA-F聚合物膠束后的4 h,腫瘤部位的成像信號(hào)最強(qiáng),8h時(shí),納米顆粒被代謝掉,成像信號(hào)分散;結(jié)論:HA-F聚合物可在水中自組裝成膠束并能包載去氫駱駝蓬堿,形成的膠束具有pH響應(yīng)性和酶響應(yīng)性,在酸性環(huán)境下,膠束與透明質(zhì)酸酶作用后,膠束解離,三氟甲基中的F游離出來,起到成像的作用。載藥膠束對(duì)CD44受體高表達(dá)的MDA-MB231細(xì)胞抑制率更強(qiáng),預(yù)示載藥膠束具有一定靶向作用。體內(nèi)核磁共振成像結(jié)果顯示,HA-F聚合物膠束能靶向到腫瘤部位并有良好的成像作用。以上結(jié)果表明,本課題設(shè)計(jì)的酶響應(yīng)性透明質(zhì)酸聚合物膠束可用于包裹去氫駱駝蓬堿,并且形成的膠束粒徑在200nm左右,荷負(fù)電,具有一定包封率和載藥量,藥物釋放緩慢,成像作用明顯,預(yù)示該劑型在體內(nèi)能靶向到腫瘤組織起到治療和診療一體化的作用。
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5;R283.6

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 宗蕊;沈麗霞;;聚合物膠束載藥系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J];神經(jīng)藥理學(xué)報(bào);2015年06期

2 潘攀;張浩;易喻;;聚合物膠束的穩(wěn)定性及影響因素[J];浙江化工;2017年12期

3 魏淑明;范清英;宋煜;;載紫杉醇聚合物膠束的制備工藝優(yōu)化[J];福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2017年06期

4 翟宏強(qiáng);丁維明;李桂玲;;聚合物膠束注射給藥系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J];中國醫(yī)藥生物技術(shù);2015年05期

5 李平祝;楊卓理;楊可偉;王菲;劉艷;;多功能聚合物膠束的最新研究進(jìn)展[J];中國新藥雜志;2008年03期

6 張琰,汪長春,楊武利,沈錫中,府壽寬;聚合物膠束作為藥物載體的研究進(jìn)展[J];高分子通報(bào);2005年02期

7 張曉君;王東凱;韓曉;;聚合物膠束作為藥物傳遞系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J];中國藥劑學(xué)雜志(網(wǎng)絡(luò)版);2009年03期

8 馬曉星;韓翠艷;劉暢;隋小宇;袁橙;黃海濤;;正交試驗(yàn)優(yōu)化葛根素聚合物膠束的制備工藝[J];中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育;2017年10期

9 周順長;吳越;王兵;王姝;徐戎;曾繁典;鄒聲泉;;雷公藤內(nèi)酯醇聚合物膠束的急性毒性研究[J];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2013年12期

10 鄧薇;張洪;高潔芳;范月瑩;;大蒜素聚合物膠束的制備及質(zhì)量評(píng)價(jià)[J];中國藥師;2019年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 馮龍寶;藍(lán)詠;郭瑞;;一種谷胱甘肽響應(yīng)型的藥物基因共遞送聚合物膠束載體[A];中國化學(xué)會(huì)2017全國高分子學(xué)術(shù)論文報(bào)告會(huì)摘要集——主題G：藥物控釋載體高分子[C];2017年

2 吳瑾;畢秋燕;駱青松;鐘紅;陳章寶;李，

本文編號(hào)：2665410