【摘要】：目的:通過(guò)觀察凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表達(dá)情況,探討小柴胡湯聯(lián)合順鉑對(duì)Hep-G2細(xì)胞凋亡的影響,為臨床使用小柴胡湯聯(lián)合順鉑化療提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。材料與方法:提供血清的動(dòng)物為SPF大鼠15只,根據(jù)《傷寒論》中小柴胡湯的配伍,煎取藥液,予其中5只每只7.18g/Kg·d生藥量灌胃5天,其余10只等量等頻生理鹽水灌胃,末次灌胃后1h腹主動(dòng)脈取血,制備含藥血清。將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的Hep-G2細(xì)胞隨機(jī)分為三組,分別為空白血清組、空白血清+順鉑組、小柴胡湯血清+順鉑組,空白血清組加入空白血清,空白血清+順鉑組加入空白血清與終濃度為2.4mg/L的順鉑,小柴胡湯血清+順鉑組加入小柴胡湯含藥血清及終濃度為2.4mg/L的順鉑。48h后收集樣本,流式細(xì)胞儀PI染色法測(cè)定細(xì)胞凋亡率,相同樣本重復(fù)三次試驗(yàn);Western blot檢測(cè)Bcl-2、Bax、Caspase-3的表達(dá),相同樣本重復(fù)三次。采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,三組細(xì)胞凋亡率運(yùn)用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)并比較中位數(shù),Bcl-2、Bax、Caspase-3的表達(dá)運(yùn)用Image J進(jìn)行灰度分析,用多組間單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn),比較平均值,α=0.05。結(jié)果:1小柴胡湯含藥血清順鉑組中位凋亡率為11.8%,空白血清順鉑組中位凋亡率為1.2%,空白血清組中位凋亡率為0.6%(p0.05)。2小柴胡湯含藥血清加順鉑處理的Hep-G2細(xì)胞Bcl-2蛋白表達(dá)低于空白血清加順鉑組,空白血清組表達(dá)量最高(p0.05)。3小柴胡湯含藥血清加順鉑處理的Hep-G2細(xì)胞Bax蛋白表達(dá)高于空白血清加順鉑組,空白血清組表達(dá)量最低(p0.05)。4小柴胡湯含藥血清加順鉑處理的Hep-G2細(xì)胞Caspase-3蛋白表達(dá)高于空白血清加順鉑組,空白血清組表達(dá)量最低(p0.05)。5空白血清組、空白血清加順鉑組、小柴胡湯含藥血清加順鉑組Bcl-2/Bax依次降低。結(jié)論:1順鉑可以促進(jìn)Hep-G2肝癌細(xì)胞的凋亡,順鉑誘導(dǎo)下的Hep-G2細(xì)胞凋亡途徑與Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白參與的線粒體凋亡途徑有關(guān)。2小柴胡湯可以增強(qiáng)順鉑對(duì)Hep-G2肝癌細(xì)胞促凋亡效果,其機(jī)制與和順鉑協(xié)同進(jìn)一步減少抑凋亡蛋白Bcl-2表達(dá),增加促凋亡蛋白Bax、Caspase-3蛋白的表達(dá)有關(guān)。3本研究結(jié)論可作為臨床使用小柴胡湯聯(lián)合順鉑化療,以達(dá)到增加化療效果,減少順鉑劑量,減少化療毒性及副作用的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。
【圖文】：

小柴胡湯對(duì)順鉑促肝癌 Hep-G2 細(xì)胞凋亡的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果測(cè) Hep-G2 細(xì)胞凋亡細(xì)胞分布如圖 1，空白血清組三次重復(fù)試驗(yàn) Hep-G2 凋亡率分別為 白血清+順鉑組三次重復(fù)試驗(yàn) Hep-G2 凋亡率分別為 3.6%、1.8%、清組+順鉑組三次重復(fù)試驗(yàn) Hep-G2 凋亡率分別為 7.9%、12.3%、1ruskal-Wallis 檢驗(yàn)三組存在差異（p=0.036<0.05），比較中位數(shù)與血清加順鉑組凋亡率高于空白血清加順鉑組高于空白血清組（如 Hep-G2 細(xì)胞的凋亡，且小柴胡湯含藥血清+順鉑使 Hep-G2 細(xì)胞的
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285.5

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