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白籽仁粗多糖的提取優(yōu)化及其免疫活性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-10 08:31
【摘要】:白籽仁是皂莢的內(nèi)胚乳,主要產(chǎn)地為云南騰沖,白籽仁有著很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,具有養(yǎng)心通脈,清肝明目,健脾滋腎,祛痰開竅等功效,是調(diào)和人體臟腑功能的珍貴純天然綠色滋補(bǔ)食品。目前對(duì)白籽仁中的一些營(yíng)養(yǎng)成分的開發(fā)利用還不是很深入,有待進(jìn)一步的研究。本課題利用單因素和響應(yīng)面的方法優(yōu)化白籽仁粗多糖的最佳提取工藝,并以小鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型對(duì)白籽仁粗多糖的免疫活性進(jìn)行評(píng)價(jià),為白籽仁產(chǎn)品的開發(fā)提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。通過單因素實(shí)驗(yàn)考察溫度、時(shí)間、液料比對(duì)白籽仁復(fù)水的影響,確定復(fù)水條件為:溫度80℃、時(shí)間75 min、液料比40mL/g。通過單因素實(shí)驗(yàn)考察各影響參數(shù)的合理范圍,利用響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)篩選最終得到白籽仁粗多糖的最佳提取條件為:提取溫度93 ℃、提取時(shí)間1.7 h,提取液料比180 mL/g,提取次數(shù)為2次,以該優(yōu)化條件提取白籽仁中粗多糖的提取得率為57.54%,經(jīng)真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溶劑,濃縮到原來體積的1/2,加入2.8倍體積的95%的乙醇并迅速攪拌,4℃靜置過夜,4500r/min離心20min后,60℃烘干,得到粗多糖含量為86.88%。選用小鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型研究白籽仁粗多糖的免疫活性。通過給環(huán)磷酰胺造模的免疫低下小鼠灌胃不同劑量的白籽仁粗多糖,低、中、高劑量組分別灌胃50、100、150mg/(Kg·bw)的白籽仁粗多糖,正常對(duì)照組灌胃等量的蒸餾水,陽性對(duì)照組灌胃黃芪精口服液。兩周后,測(cè)定小鼠的體重、臟器指數(shù)、自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)殺傷活性、淋巴細(xì)胞增殖能力和巨噬細(xì)胞吞噬能力。結(jié)果表明,與模型對(duì)照組相比,白籽仁粗多糖能夠顯著提高免疫低下小鼠的體重和臟器指數(shù),對(duì)小鼠NK細(xì)胞的殺傷活性和淋巴細(xì)胞增殖能力有極顯著的恢復(fù)作用,且呈一定的劑量依賴性,對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力有一定的提高作用;對(duì)肝臟和血清中GSH-PX、SOD、CAT、AKP等酶的活性有不同程度的提高作用;通過RT-PCR的方法,發(fā)現(xiàn)白籽仁粗多糖對(duì)IL-2、IL-6、IFN-γ、Mcl-1以及Bcl-xL等與免疫相關(guān)的基因的表達(dá)具有增加的趨勢(shì)。因此,白籽仁粗多糖可改善環(huán)磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫功能。
【圖文】:

標(biāo)準(zhǔn)曲線,甘露糖,標(biāo)準(zhǔn)曲線


3.1苯酚-硫酸法甘露糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制逡逑采用苯酚-硫酸法測(cè)定粗多糖提取液中總糖含量,得回歸方程為y=0.0128X-0.0002,逡逑R2=0.9992,,根據(jù)苯酸-硫酸法測(cè)定的甘露糖標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖3-1所示的N歸方程可以計(jì)逡逑算出提取液中總糖含量。逡逑0.6逡逑y邋=邋0.0128x-0.0002逡逑0.5邋-邐R2邋=邋0.9992逡逑0.4邋-逡逑O嗗澹埃沖澹危掊義希埃卞澹澹掊義希ǎ╁澹懾濉觥鰣危懾危懾危懾危懾危懾義希板危保板危玻板危常板危矗板危擔(dān)板義嚇ǘ齲歟椋紓恚獺卞義賢跡常備事短潛曜記咤義希疲椋紓澹常卞澹裕瑁邋澹螅簦幔睿洌幔潁溴澹悖酰潁觶邋澹錚駑澹恚幔睿睿錚螅邋義希常插澹模危臃ǜ事短潛曜記叩幕嬤棋義喜捎茫模危臃ú舛ù侄嗵翹崛∪芤哄乖菍,得丨"棺T匠濤截矗敦埃埃保罰常義希遙玻劍埃梗梗福罰藎模危臃ú舛ǖ母事短潛曜記呷繽跡常菜鏡幕毓櫸匠炭梢約撲慍鰣義咸崛∫夯乖嗆。辶x希卞澹у義希ǎ瑰澹危澹澹桑保矗叮眨埃埃保罰沖義希耄澹澹埃梗梗福峰義希埃峰澹義希垮

本文編號(hào):2657035

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