【摘要】：目的對(duì)原“逆萎康”組方進(jìn)行優(yōu)化,在確保其療效的基礎(chǔ)上,減輕藥物副作用,并在細(xì)胞層面探討優(yōu)化組方的藥理作用。方法1、用乙醇水楊酸鈉溶液給小鼠灌胃建立胃炎模型,分別用雪膽、黃芪、老龍皮、朱砂七、半枝蓮、海螵蛸以及生理鹽水給小鼠灌胃,通過觀察小鼠食用高嶺土和鼠糧的量,篩查原“逆萎康”組方致嘔成分。2、分別用原組方、原組方朱砂七減半、原組方朱砂七減半加生姜、原組方朱砂七減半加陳皮、原組方朱砂七減半加半夏、生理鹽水給小鼠灌胃,篩選止嘔效果最佳的組方。3、分別用優(yōu)化組方、原組方和生理鹽水給小鼠灌胃,通過免疫組化方法測(cè)定COX-2和TNF-α,對(duì)優(yōu)化組方和原組方進(jìn)行效果對(duì)比。4、優(yōu)化“逆萎康”組方作用于MC細(xì)胞(模擬癌前病變細(xì)胞),使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)MC細(xì)胞凋零狀況;使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)測(cè)定C-myc,CyclinD1基因的表達(dá);用免疫印跡法(Western blot)測(cè)定Bcl-2、Bax,Caspase-3、β-catenin、PTEN、GSK-3β和p-GSK-3β蛋白的表達(dá)量。結(jié)果1、灌胃10天后小鼠精神萎靡,體重減輕,HE染色可見黏膜下水腫和炎細(xì)胞浸潤(rùn)、糜爛以及淺潰瘍。朱砂七組小鼠食用高嶺土與食用鼠糧的比值最高。2、陳皮組和生姜組小鼠食用高嶺土與食用鼠糧的比值最低。連續(xù)對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃2周后,小鼠的精神狀態(tài)、體重均有明顯恢復(fù)。3、與模型組相比,原逆萎康組和優(yōu)化組COX-2和TNF-α的平均光密度值均顯著降低(P0.01),原逆萎康組與優(yōu)化組COX-2和TNF-α的平均光密度值無明顯改變。4、優(yōu)化逆萎康組方能夠促進(jìn)MC細(xì)胞的凋零,呈濃度依賴性遞增。逆萎康作用MC細(xì)胞48 h后,能夠顯著下調(diào)C-myc、CyclinD1基因的表達(dá)量。逆萎康作用MC細(xì)胞48 h后,顯著下調(diào)MC細(xì)胞Bcl-2、β-catenin、p-GSK-3β蛋白表達(dá)量,上調(diào)Bax、Caspase-3、PTEN、GSK-3β蛋白表達(dá)量。結(jié)論1、朱砂七可能是致嘔的主要成分,將優(yōu)化組方中朱砂七的劑量減半。2、陳皮組和生姜組小鼠惡心程度最輕。確定將雪膽15 g、半枝蓮15 g、黃芪10 g、朱砂七3 g、老龍皮10 g、海螵蛸10 g、陳皮6 g、生姜6 g作為優(yōu)化“逆萎康”的組方成分。3、優(yōu)化組方和原“逆萎康”組方都能夠改善小鼠胃炎模型的臨床指征,二者療效相當(dāng),沒有顯著性差異。4、優(yōu)化“逆萎康”組方能夠誘導(dǎo)MC細(xì)胞凋亡,該組方可能對(duì)Wnt/β-catenin信號(hào)通路的激活起到有效的抑制作用。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5

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