【摘要】：目的觀察強(qiáng)骨寶對(duì)疲勞性大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨的形態(tài)學(xué)改變及檢測(cè)關(guān)節(jié)軟骨中MMP-3和ADAMTS-7表達(dá)的影響,以探討該方的作用機(jī)制。方法1.疲勞性損傷誘發(fā)去勢(shì)大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型的建立與鑒定6月齡雌性SD大鼠24只,隨機(jī)分為空白組,去卵巢組和跑步組,每組8只。去卵巢組和跑步組在無(wú)菌條件下摘除雙側(cè)卵巢,空白組不做任何處理。空白對(duì)照組和去卵巢組正�；顒�(dòng),跑步組大鼠進(jìn)行上坡跑臺(tái)運(yùn)動(dòng),以建立勞損模型。跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)方案設(shè)定為30m/min、30min/次,60min/d、坡度為16°,每周休息1天,連續(xù)訓(xùn)練6周。然后取大鼠股骨,觀察關(guān)節(jié)軟骨大體形態(tài),光鏡下觀察形態(tài)學(xué)改變,取腹主動(dòng)脈血,檢測(cè)血清中TNF-α、IL-1β、COMP含量,以鑒定疲勞性KOA模型。2.強(qiáng)骨寶的作用機(jī)制研究6月齡雌性SD大鼠32只,隨機(jī)分為空白組、生理鹽水組、筋骨痛消丸組、強(qiáng)骨寶組,每組8只,除空白組外,其余三組按上述跑步組方法建立模型大鼠。空白組常規(guī)飼養(yǎng),另3組分別給予0.9%生理鹽水、筋骨痛消丸、強(qiáng)骨寶灌胃治療,每日兩次,治療周期為1個(gè)月。然后取腹主動(dòng)脈血、關(guān)節(jié)、關(guān)節(jié)軟骨。ELISA法檢測(cè)血清中IL-1β、TNF-α、COMP含量,膝關(guān)節(jié)固定脫鈣后行HE染色,光鏡下觀察形態(tài)學(xué)改變,Western blot法及qPCR法檢測(cè)軟骨中MMP-3、ADAMTs-7的表達(dá)情況。結(jié)果1.模型鑒定結(jié)果:造模6周后,軟骨Mankin評(píng)分結(jié)果顯示:與空白對(duì)照組相比,去卵巢組和跑步組均升高(P0.01);與去卵巢組相比,跑步組較高(P0.01)。IL-1β、TNF-α及COMP含量比較:與空白對(duì)照組比較,其余2組均明顯升高(P0.01);與去卵巢組比較,跑步組更高(P0.01)。因此,無(wú)論是從血清學(xué)檢測(cè)還是對(duì)形態(tài)學(xué)鏡下觀察均說(shuō)明本次模型成功。2.強(qiáng)骨寶作用機(jī)制探討結(jié)果:(1)軟骨Mankin評(píng)分結(jié)果,與空白組相比,其余3組較高(P0.01);與生理鹽水組相比,筋骨痛消丸組及強(qiáng)骨寶組均降低(P0.01)。(2)血清中IL-1β、TNF-α及COMP含量比較顯示,與生理鹽水組相比,筋骨痛消丸組及強(qiáng)骨寶組均降低(P0.01)。(3)Western blot結(jié)果顯示:各組軟骨中MMP-3、ADAMTs-7蛋白均有表達(dá),與生理鹽水組相比,筋骨痛消丸組及強(qiáng)骨寶組明顯降低(P0.05);強(qiáng)骨寶組與筋骨痛消丸組比較無(wú)差異(P0.05)。(4)qPCR結(jié)果顯示:生理鹽水組、筋骨痛消丸組及強(qiáng)骨寶組的MMP-3 mRNA、ADAMTs-7 mRNA表達(dá)均高于空白組(P0.01);與生理鹽水組相比,筋骨痛消丸組及強(qiáng)骨寶組均降低,有顯著差異(P0.01);強(qiáng)骨寶組與筋骨痛消丸組無(wú)差異(P0.05)。結(jié)論強(qiáng)骨寶湯通過(guò)抑制MMP-3、ADAMTs-7的表達(dá),減少COMP的降解,穩(wěn)定軟骨細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)環(huán)境,從而有利于膝骨關(guān)節(jié)炎的修復(fù)。
【圖文】：

圖 1 各組大鼠關(guān)節(jié)軟骨大體形態(tài)觀察3.1.3 光鏡下觀察關(guān)節(jié)軟骨組織形態(tài)學(xué)比較 空白對(duì)照組軟骨表層規(guī)則，細(xì)胞數(shù)量及形態(tài)正常，基質(zhì)著色均勻，潮線清晰，軟骨面無(wú)破壞；與空白組相比，去卵巢組軟骨表層及中深層細(xì)胞輕微減少，潮線不及空白組清晰，基質(zhì)著色變淺。而去勢(shì)加跑步組鼠軟骨表面毛糙，，不光滑，基質(zhì)著色不均，表層、移行層、輻射層、鈣化層分層不明顯，彌漫性細(xì)胞過(guò)多且排序規(guī)則，潮線紊亂。（見(jiàn)圖 2）

強(qiáng)骨寶對(duì)疲勞性大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨的作用機(jī)制軟骨表層規(guī)則，細(xì)胞數(shù)量及形態(tài)正常，無(wú)簇集現(xiàn)象，基質(zhì)著色均勻軟骨表面無(wú)明顯裂隙，軟骨表層及中深層細(xì)胞輕微減少，基質(zhì)著色變毛糙，不光滑，中深層彌漫性細(xì)胞過(guò)多且排序不規(guī)則，潮線紊亂，鼠關(guān)節(jié)軟骨 Mankin 評(píng)分 Mankin 評(píng)分結(jié)果顯示：與空白組有顯著差異（P<0.01）；與去卵巢組組比較，跑步組差異明。（見(jiàn)圖 3）
【學(xué)位授予單位】：福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5

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本文編號(hào)：2645863