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新橙皮苷對RBL-2H3細胞脫顆粒的抑制作用及其對OVA誘導過敏性哮喘的影響

發(fā)布時間:2020-04-29 22:36
【摘要】:食物過敏是一種常見的過敏性疾病,能夠引發(fā)惡心、嘔吐、腹瀉、過敏性哮喘、過敏性皮炎、過敏性鼻炎、過敏性休克等癥狀。食物過敏的發(fā)病率呈逐年上升趨勢,給家庭和社會造成嚴重負擔。新橙皮苷是一種二氫黃酮苷類化合物,為蕓香科柑橘屬植物次生代謝產(chǎn)物,廣泛分布于多種植物中,是一種天然的強抗氧化劑,具有抗炎、抗腫瘤、抗病毒活性以及保護心血管系統(tǒng)的作用。但未見新橙皮苷對食物過敏引發(fā)的過敏性哮喘的影響方面的應(yīng)用。本論文通過體內(nèi)和體外實驗對新橙皮苷可能存在的抗過敏活性進行研究?疾煨鲁绕ぼ諏乖T導RBL-2H3細胞脫顆粒的影響;明確新橙皮苷對OVA誘導過敏性哮喘小鼠的影響。具體研究內(nèi)容如下:1.體外實驗:采用MTT法檢測新橙皮苷對RBL-2H3細胞活性的影響,采用顯色法檢測RBL-2H3細胞β-氨基己糖苷酶(β-HEX)的釋放情況,利用熒光顯微鏡法觀察新橙皮苷對細胞活化脫顆粒胞內(nèi)鈣離子變化的影響。結(jié)果表明:在不同濃度的新橙皮苷作用下,細胞存活率均保持在90%以上,且RBL-2H3細胞活性不隨新橙皮苷濃度的增加而降低,說明新橙皮苷對細胞活性無顯著性影響。不同濃度的新橙皮苷能夠抑制由抗原誘導的RBL-2H3細胞脫顆粒β-HEX的釋放,在新橙皮苷的濃度為3.13μmol/L時,對β-HEX釋放的抑制作用最好。新橙皮苷能抑制細胞活化脫顆粒胞內(nèi)鈣離子濃度的升高。2.體內(nèi)實驗:建立小鼠過敏性哮喘模型,獲取樣品。稱量小鼠胸腺和脾臟質(zhì)量并計算胸腺和脾臟指數(shù);采用ELISA測定血清中抗體IgE和IgG1的水平并檢測各組小鼠肺泡灌洗液(BALF)中Th2細胞因子IL-4和IL-5以及Th1細胞因子IFN-γ的水平;通過流式細胞術(shù)檢測各組小鼠脾臟中CD4~+、CD8~+T細胞的數(shù)量變化;通過肺組織HE染色觀察小鼠肺組織炎性細胞浸潤情況。結(jié)果表明:新橙皮苷對小鼠血清中的OVA特異性IgE與IgG1的水平影響不大,但是新橙皮苷能降低小鼠BALF中IL-4和IL-5的水平,升高BALF中IFN-γ的水平,降低小鼠脾臟中CD4~+T細胞的比例,升高CD8~+T細胞的比例。新橙皮苷還能減輕肺組織中嗜酸性粒細胞的浸潤情況,緩解肺泡及支氣管水腫癥狀并改善支氣管、血管周圍及管腔內(nèi)的炎性細胞浸潤情況。
【圖文】:

新橙皮苷,RBL-2H3細胞


G.新橙皮苷(50.00 μmol/L)3.13-50.00 μmol/L)對抗原誘導 RBL粒胞內(nèi)鈣離子濃度的影響Neohesperidin(3.13-50.00 μmol/L) acellular Ca2+ mobilization in RBL-2H傳導的第二信使,胞內(nèi)鈣離子濃度的o 3-AM是一類不帶電荷的親脂性化合細胞內(nèi)能夠被酯酶水解成以游離酸形身無熒光,但其能與細胞內(nèi)游離的C光。因此在本實驗中,我們通過鈣微鏡的方法定性觀察了新橙皮苷對抗子濃度的影響。B、C、D、E、F、G分別為對照組、模l/L的新橙皮苷、12.50 μmol/L的新橙

肺組織,小鼠,HE染色,地塞米松


(E.地塞米松組小鼠肺組織 HE 染色圖 3.10 小鼠肺組織 HE 染色e hematoxylin and eosin staining of lungA、B、C、D、E 分別為空白組、模藥物組(50 mg/kg)和地塞米松組小從圖 3.10 可以看出,空白組小鼠肺組血管和支氣管含有極少量炎性細胞;組嚴重,肺組織支氣管和血管周圍大37
【學位授予單位】:吉林大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:R285

【參考文獻】

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10 宋澤慶;林t,

本文編號:2645073


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