【摘要】：大黃為蓼科大黃屬多年生草本植物,主要分布在亞洲溫帶及亞熱帶的高寒山區(qū),在我國(guó)主要分布于青海、甘肅、四川、云南等西北和西南部地區(qū)。大黃味苦性寒,具有瀉下攻積,清熱瀉火、涼血解毒、逐淤通經(jīng)、利濕退黃等功效�，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,大黃還具有抗菌、抗炎、保肝利膽、抗腫瘤、抗氧化等廣泛的功效。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)6種不同溶劑提取的唐古特大黃提取物對(duì)10種膽囊炎致病菌的抑菌試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)乙醇提取物體外抑菌實(shí)驗(yàn)的抑菌作用最好。通過(guò)柱層析、薄層色譜和重結(jié)晶等分離純化方法,從唐古特大黃醇提部分中分離得到了9個(gè)化合物單體,并對(duì)單體化合物進(jìn)行了體外抑菌實(shí)驗(yàn),篩選出具有良好抑菌活性的化合物。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)柱層析、薄層色譜等分離技術(shù)對(duì)唐古特大黃的醇提部位進(jìn)行分離純化,得到9種單體化合物,分別為1:Catechin(兒茶素)、2:Emodin(大黃素)、3:Chrysophanol(大黃酚)、4:Aloeemodin(蘆薈大黃素)、5:Physcion(大黃素甲醚)、6:4-(4'-Hydroxyphenyl)-2-butanone-4'-O-(2-O-galloyl-6-O-cinnamoyl)glucoside(4-(4'-羥基苯基)-2-丁酮4'-O-(2-O-沒(méi)食子�；�-6-O-肉桂�；�)葡糖苷)、7:4-(4'-Hydroxyphenyl)-2-butanone 4'-O-(6-O-cinnamoyl)glucoside(4-(4'-羥基苯基)-2-丁酮4'-O-(6-O-肉桂�；�)葡萄糖苷)、8:Chrysophanol-1-O-glucoside(大黃酚-1-O-葡萄糖苷)、9:Chrysophanol-8-O-glucoside(大黃酚-8-O-葡萄糖苷)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)分離得到的8種唐古特大黃的單體化合物進(jìn)行體外抑菌實(shí)驗(yàn),選取10種常見(jiàn)的膽囊炎致病菌,結(jié)果發(fā)現(xiàn):化合物2和4對(duì)以上10種菌抑菌作用極顯著(P0.01)�；衔�1對(duì)除產(chǎn)氣腸桿菌之外的9種膽囊炎致病菌具有抑菌作用,其中對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌作用顯著(P0.05),對(duì)其余8種致病菌抑菌作用極顯著(P0.01)�；衔�3對(duì)肺炎克雷伯氏菌肺炎亞種具有顯著抑菌作用(P0.05),對(duì)變形桿菌、屎腸球菌、產(chǎn)酸克雷伯氏菌抑菌作用極顯著(P0.01)�；衔�5對(duì)變形桿菌、糞鏈球菌、大腸桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌、屎腸球菌、產(chǎn)酸克雷伯氏菌、肺炎克雷伯氏菌肺炎亞種抑菌作用極顯著(P0.01),對(duì)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、陰溝腸桿菌陰溝亞種抑菌作用不明顯�；衔�6對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌作用顯著(P0.05),對(duì)變形桿菌、糞鏈球菌、大腸桿菌、陰溝腸桿菌陰溝亞種、屎腸球菌抑菌作用顯著(P0.01)�；衔�8對(duì)變形桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌、肺炎克雷伯氏菌肺炎亞種和屎腸球菌抑菌作用極顯著(P0.01)�；衔�9對(duì)變形桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌、陰溝腸桿菌陰溝亞種、屎腸球菌、產(chǎn)酸克雷伯氏菌抑菌作用極顯著(P0.01)對(duì)肺炎克雷伯氏菌肺炎亞種抑菌作用顯著(P0.05)。在8種化合物中,大黃素對(duì)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、產(chǎn)氣腸桿菌、產(chǎn)酸克雷伯氏菌和肺炎克雷伯氏菌肺炎亞種抑菌作用最好。蘆薈大黃素對(duì)糞鏈球菌、陰溝腸桿菌陰溝亞種和屎腸球菌抑菌作用最好。大黃素甲醚對(duì)大腸桿菌的抑菌作用最好�；衔�6(4-(4'-羥基苯基)-2-丁酮4'-O-(2-O-沒(méi)食子�；�-6-O-肉桂�；�)葡糖苷)對(duì)變形球菌抑菌作用最好。
【圖文】：

圖 3.1 大黃提取分離流程圖Figure 3.1 Flowchart for extraction and separation of Rheum tanguticum Maxim.ex Balf3.2.3 分離樣品處理：本實(shí)驗(yàn)主要采用濕法上柱，干法上樣。稱(chēng)取編號(hào)為 60C 的部分 30g，用甲醇溶解，然后加入同重硅膠攪拌均勻，揮干，，研細(xì)。上柱：將 3000 g 硅膠 110℃活化、放冷，石油醚浸泡過(guò)夜，濕法上柱，干法上樣。洗脫：用石油醚∶乙酸乙酯（1:0～0:1）和乙酸乙酯∶甲醇（1:0～0:1）梯度洗脫切段，每 100 mL 收集一次，收集液進(jìn)行點(diǎn)板，合并相同部分，濃縮。細(xì)分：將所得的各個(gè)部分，分別用溶劑溶解，加入等質(zhì)量的硅膠，揮干，研細(xì)，濕法上柱，干法上樣，用在硅膠板上展開(kāi)最好的溶劑進(jìn)行洗脫，每 10 mL 收集一次，點(diǎn)板合并，濃縮，得到單體。詳見(jiàn)圖：

圖 3.1 大黃提取分離流程圖Figure 3.1 Flowchart for extraction and separation of Rheum tangutic2.3 分離樣品處理：本實(shí)驗(yàn)主要采用濕法上柱，干法上樣。稱(chēng)取編號(hào)用甲醇溶解，然后加入同重硅膠攪拌均勻，揮干，研細(xì)。上柱：將 3000 g 硅膠 110℃活化、放冷，石油醚浸泡過(guò)夜。洗脫：用石油醚∶乙酸乙酯（1:0～0:1）和乙酸乙酯∶甲醇切段，每 100 mL 收集一次，收集液進(jìn)行點(diǎn)板，合并相同部細(xì)分：將所得的各個(gè)部分，分別用溶劑溶解，加入等質(zhì)量濕法上柱，干法上樣，用在硅膠板上展開(kāi)最好的溶劑進(jìn)行次，點(diǎn)板合并，濃縮，得到單體。詳見(jiàn)圖：
【學(xué)位授予單位】：青海師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R284

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2644858