【摘要】：本論文以牡丹種子為原料,通過(guò)酶輔助-正己烷萃取法提取牡丹籽油,并考察各因素對(duì)牡丹籽油得率的影響。在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上采用響應(yīng)面法對(duì)牡丹籽油提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,并測(cè)定種子油理化性質(zhì)及其成分分析。并對(duì)牡丹籽油改善果蠅認(rèn)知障礙作用進(jìn)行研究。主要研究?jī)?nèi)容如下:1.采用酶輔助-正己烷萃取法提取牡丹籽油,通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)研究,確定了酶的種類、酶解pH值、酶解時(shí)間及酶解溫度對(duì)牡丹籽油提取率的影響,在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上采用響應(yīng)面法對(duì)各影響因素進(jìn)行優(yōu)化。得到最優(yōu)提取條件:pH=5.1,酶解時(shí)間為68min、酶解溫度為50℃。在此條件下進(jìn)行5次重復(fù)驗(yàn)證,牡丹籽油平均得率為38.2%。未經(jīng)酶預(yù)處理組牡丹籽油得率為27.8%,最優(yōu)條件下牡丹籽油得率較其提高了 37.4%。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果與回歸方程預(yù)測(cè)值吻合性較好,此提取工藝條件可靠性較高。2.采用動(dòng)植物油脂國(guó)標(biāo)法(GB/T5530-2005、GB/T5532-2008、GB/T5538-2005、GB/T5534-2008、GB2716-2005)對(duì)牡丹籽油的酸值、碘值、過(guò)氧化值、皂化值、有機(jī)溶劑殘留量進(jìn)行測(cè)定,理化指標(biāo)結(jié)果符合國(guó)家食用油標(biāo)準(zhǔn)。GC/MS檢測(cè)技術(shù)分析測(cè)定甲酯化后牡丹籽油的主要成分。牡丹籽油的不飽和脂肪酸含量在90%左右,以亞麻酸和亞油酸為主,其中還包括棕櫚酸、花生酸、亞油酸、亞麻酸、硬脂酸。亞麻酸含量很高,達(dá)到了 59%。酶預(yù)處理與未經(jīng)酶預(yù)處理提取的牡丹籽油的主要成分幾乎無(wú)差別。3.由巴普洛夫嗅覺(jué)逃避條件反射實(shí)驗(yàn)、嗅覺(jué)短期記憶能力及攀爬能力果蠅行為學(xué)實(shí)驗(yàn),分別檢測(cè)正常組、陽(yáng)性對(duì)照組、模型組、牡丹籽油組果蠅的嗅覺(jué)短期記憶能力和攀爬能力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,牡丹籽油可以顯著提高轉(zhuǎn)tau基因果蠅的攀爬能力并改善認(rèn)知功能障礙。4.通過(guò)Gal4/UAS系統(tǒng)原理雜交獲得野生型對(duì)照果蠅和阿爾茨海默病AD果蠅模型(轉(zhuǎn)tau基因),并做病理切片實(shí)驗(yàn),進(jìn)行果蠅模型鑒定。AD果蠅造模成功后,根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,隨機(jī)分成6組,分別是正常組、模型組、牡丹籽油低劑量組(0.2%組)、牡丹籽油中劑量組(1%組)、牡丹籽油高劑量組(5%組)、陽(yáng)性對(duì)照組。給藥30天后測(cè)定果蠅腦組織中cAMP及AchE的含量,并觀察喂養(yǎng)牡丹籽油后果蠅腦部病理變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明牡丹籽油能夠減少轉(zhuǎn)tau基因果蠅腦部病變空泡及神經(jīng)纖維纏結(jié)。降低果蠅腦內(nèi)cAMP水平,抑制AchE活性,從而提高果蠅學(xué)習(xí)記憶能力,改善認(rèn)知功能障礙。
【圖文】：

實(shí)驗(yàn)溶液的配置逡逑萄糖標(biāo)準(zhǔn)液：配置濃度為ｌｍｇ／ｍＬ的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。４°Ｃ冰箱中保存?zhèn)溆�。逡逑Ｓ溶液配置逡逑稱�。�，邋５－二硝基水楊酸０．６３ｇ于５０ｍＬ大燒杯中，用少量蒸餾水溶解后，加邋（０．８ｇ于１００ｍｌ）氧氧化鈉溶液２６．２ｍＬ，再加到５０ｍＬ含有１８．５ｇ酒石酸鐘鈉中，再加0．５ｇ結(jié)品酚和０．５ｇ無(wú)水亞硫酸鈉，攬拌溶解，冷卻后移入１００ｍＬ容餾水定容至ｌＯＯｍＬ，充分混勻。保存于棕色瓶中，室溫放置一周后使用。逡逑ｍｏｌ／ＬｐＨ＝４．８醋酸緩沖溶液逡逑制Ｏ．ｌｍｏｌ／Ｌ醋酸鈉，再定容（根據(jù)緩沖液的用量來(lái)確定是要２５０ｍｌ、５００ｍｌ然后用ｐＨ計(jì)測(cè)定酸度，再用冰醋酸調(diào)節(jié)ｐＨ值至４．８．逡逑羧甲基纖維素鈉水溶液（ＣＭＣ）：用０．１ｍｏｌ／ＬｐＨ４．８醋酸－醋酸鈉緩沖溶液配萄糖標(biāo)準(zhǔn)品溶液稀釋成不同濃度，充分搖勻后加入２ｍｌＤＮＳ溶液，沸水浴ｌＯｍ后加蒸餾水定容到２５ｍＬ，于５５０ｎｍ下測(cè)ＯＤ值，１號(hào)為空白調(diào)零管。以含量，以ＯＤ值為縱坐標(biāo)，繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖２－１。其回歸方程為：ｘ－０．０４０４，邋Ｒ２＝０．９９９７。逡逑標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖光吸收曲線（ＯＤ值）逡逑

邐逡逑Ａ２邐４９．０３邐１邐４９．０３邐７６．８７邐＜０．０００１逡逑Ｂ２邐１１．６４邐１邐１１．６４邐１８．２４邐０．００３７逡逑Ｃ２邐７．８２邐１邐７．８２邐１２．２５邐０．０１００逡逑殘差邐４．４７邐７邐０．６４逡逑失擬項(xiàng)邐１．９７邐３邐０．６６邐１．０５邐０．４６２８邐不顯著逡逑純誤差邐２．５０邐４邐０．６３逡逑總差邐９５．７８邐１６逡逑．３．４．２響應(yīng)面圖形分析及牡丹籽油最佳提取條件逡逑響應(yīng)面圖形作為響應(yīng)值與試驗(yàn)因子Ａ、Ｂ、Ｃ所構(gòu)成的三維空間曲面圖，可從分析圖逡逑形象地看出各參數(shù)之間的相互作用。本試驗(yàn)根據(jù)回歸方程進(jìn)行了不同因子的響應(yīng)面分逡逑，結(jié)果如圖２－５？２－７所示。由圖可看出，三個(gè)響應(yīng)面開(kāi)口皆向下，隨著各因素變量的逡逑大，響應(yīng)值增大，當(dāng)響應(yīng)值增大到極值后，隨著因素變量的增大，響應(yīng)值逐漸減小。逡逑Ｈ值、酶解時(shí)間、酶解溫度這三個(gè)因素與牡丹籽油得率呈拋物線關(guān)系，，且在考察范圍內(nèi)逡逑在響應(yīng)值的極高值。逡逑
【學(xué)位授予單位】：東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R284;R285.5

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本文編號(hào)：2644636