【摘要】：目的:研究壽胎丸對復發(fā)性流產(chǎn)大鼠的影響,用代謝組學來探究壽胎丸組及西藥對照組大鼠血漿樣本,找尋血漿代謝模型中的潛在生物標記物,從而探索壽胎丸的安胎作用機理,并進一步完善復發(fā)性流產(chǎn)的機制,從代謝組角度出發(fā)為壽胎丸治療復發(fā)性流產(chǎn)提供藥理實驗依據(jù)。方法:1.動物實驗造模部分,雌雄大鼠交配后的孕鼠,采用羥基脲加米非司酮灌胃的方法成功制造復發(fā)性流產(chǎn)大鼠的模型,并設定了壽胎丸治療組、黃體酮西藥治療組及正常妊娠組,于第10天麻醉后腹主動脈取血,離心后獲得血漿樣本;2.GC-MS技術支持部分,樣本收集后進行預處理,將預處理的樣本進行GC-MS上機檢測得到原始數(shù)據(jù),再對原始數(shù)據(jù)進行總面積歸一化處理,使用主成分分析(Principal Component Analysis,PCA)進行無監(jiān)督的數(shù)據(jù)分析,用偏最小二乘判別分析(Partial Least Squares-Discriminant Analysis,PLS-DA)進行有監(jiān)督的數(shù)據(jù)分析,從整體上把握模型的準確性和組間的差異;3.最后用學生氏t-test和PLSDA第一主成分的變量重要性(VIP1)對差異變量進行篩選比較對照組和模型組得到差異性代謝產(chǎn)物;4.根據(jù)GC-MS總離子流圖中各峰的保留時間挑選峰值,獲取各峰與內(nèi)標峰的峰面積數(shù)據(jù),用相對峰面積(與內(nèi)標峰的比值)表示代謝物的含量。各組模式識別采用主成分分析(PCA-DA)應用SIMCA2P1110軟件。結果:1.成功制造復發(fā)性流產(chǎn)大鼠模型,流產(chǎn)大鼠不同情況的出現(xiàn)了陰道流血,毛發(fā)枯槁,精神萎靡,體重下降等情況;2.在實驗中,共檢測到了188個峰,根據(jù)已有數(shù)據(jù)庫和標準品,其中共有83個物質(zhì)獲得了注釋。這些物質(zhì)主要集中于初級代謝產(chǎn)物,主要物質(zhì)為有機酸(31%)及氨基酸(30%),另有糖醇(11%)、磷酸(7%)、脂肪酸(6%)、糖(6%)、胺類(3%)等;3.篩選出血漿中焦磷酸、丙胺酸、甘氨酸,分別是木糖醇、蛋氨酸、天冬酰胺、半胱氨酸、脯氨酸、己二酸、棕櫚酸、十九烷酸、肉豆蔻酸、9,12-(Z,Z)-十八碳二烯酸、硬脂酸、9(Z)-十八碳烯酸、2,4-dihydroxybutanoic酸為復發(fā)性流產(chǎn)潛在的生物標記物。4.壽胎丸治療復發(fā)性流產(chǎn)的大鼠血漿中發(fā)現(xiàn)了,蘇糖酸、核糖酸、蘇糖醇、β-丙氨酸、焦磷酸、葡糖酸、α-生育酚、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、2-氨基丁酸10種潛在生物標記物,取得較好的預測效果。結論:本研究推測根據(jù)四組大鼠血漿代謝圖譜的變化,從血漿中篩選出的代謝物對協(xié)助診斷復發(fā)性流產(chǎn),探究壽胎丸對于治療復發(fā)性流產(chǎn)的作用機理有重大的指導意義。
【圖文】：

1壽胎丸中藥鑒定預處理路線圖

2本實驗整體路線
【學位授予單位】：湖南中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5;R-332

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