【摘要】：為了揭示連翹葉作為茶飲抗氧化、保肝及解酒的保健作用以及探尋其作用的物質(zhì)基礎(chǔ),本文研究了連翹葉紅茶、綠茶動(dòng)物體內(nèi)保肝作用、體外抗氧化及活性成分。在細(xì)胞水平進(jìn)一步研究了連翹葉紅茶、綠茶及其主要活性成分對(duì)酒精肝損傷細(xì)胞的保護(hù)作用。具體研究?jī)?nèi)容如下:一.整體動(dòng)物水平上分別研究了:(1)連翹葉紅茶急性毒性研究(2)連翹葉紅茶對(duì)CCl_4肝損傷小鼠的保護(hù)作用(3)連翹葉紅茶、綠茶對(duì)急性酒精中毒小鼠的保護(hù)作用(即解酒作用)(4)連翹葉紅茶、綠茶對(duì)急性酒精肝損傷小鼠的保護(hù)作用。(1)連翹葉紅茶急性毒性研究表明:單次給予小鼠連翹葉紅茶水提取物的最大劑量即38.8g/kg,不會(huì)影響小鼠的生長(zhǎng)(各組小鼠體重?zé)o明顯變化P0.05),且對(duì)小鼠的臟器沒有影響(各組小鼠臟器系數(shù)無(wú)顯著性差異P0.05)。(2)選擇CCl_4肝損傷模型觀察連翹葉紅茶對(duì)化學(xué)性肝損傷小鼠的作用。結(jié)果顯示:連翹葉紅茶可以有效降低CCl_4肝損傷小鼠血清ALT、AST活性、TBIL含量,升高CAT、GSH活性以及降低小鼠肝臟MDA含量,提高SOD活性;肝臟病理學(xué)檢測(cè)顯示除正常(Z)組和連翹葉紅茶高劑量(HG)組外,其它各組均見不同程度的肝細(xì)胞壞死、炎細(xì)胞浸潤(rùn)。其中,陽(yáng)性(Y)、連翹葉紅茶中劑量(HZ)、連翹葉紅茶低劑量(HD)三組較模型(M)組病變程度輕。以上結(jié)果表明:連翹葉紅茶對(duì)CCl_4致肝損傷小鼠具有保護(hù)作用。(3)以醉酒小鼠翻正反射及血清ADH活性為指標(biāo),觀察了連翹葉紅茶、綠茶的解酒作用。結(jié)果表明:預(yù)防性給予小鼠連翹葉紅茶、綠茶后,連翹葉紅茶、綠茶組小鼠的醉酒潛伏期時(shí)間均有顯著的延長(zhǎng)(P0.05),睡眠時(shí)間顯著的減短(P0.01),醉酒時(shí)間縮短(P0.01),量效關(guān)系明顯;連翹葉紅茶、綠茶均能顯著升高急性酒精中毒小鼠血清ADH活性(P0.05)。綜上,連翹葉紅茶、綠茶對(duì)急性酒精中毒小鼠均具有保護(hù)作用。(4)以小鼠血清、肝臟各項(xiàng)生化指標(biāo)以及組織病理變化為觀察對(duì)象,研究了連翹葉紅茶、綠茶對(duì)急性酒精肝損傷小鼠的保護(hù)作用。結(jié)果表明:與M組相比,連翹葉紅茶、綠茶均能降低急性酒精性肝損傷小鼠血清TG含量、ALT活力,提高血清CAT活力,降低肝臟MDA含量、增強(qiáng)肝臟SOD活力,增強(qiáng)血清及肝臟GSH活性(P0.05);肝組織鏡檢結(jié)果顯示,正常小鼠肝臟細(xì)胞未見異常,其余組小鼠肝細(xì)胞均出現(xiàn)不同程度的肝細(xì)胞水樣變、脂肪變及腫脹。其中,M組肝細(xì)胞損傷程度高于其他組。HG、LG組小鼠部分肝細(xì)胞未見異常,肝細(xì)胞損傷程度也低于HZ、HD、LZ及LD組。二.系統(tǒng)的研究了連翹葉茶(原葉、綠茶和紅茶)的體外抗氧化活性,并進(jìn)一步探討連翹葉及其茶抗氧化作用的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)。采用四種不同體外抗氧化模型,DPPH自由基清除能力、氧自由基吸收能力(ORAC)、總抗氧化能力(FRAP)和亞硝酸鹽清除能力比較研究了連翹葉、連翹葉紅茶、連翹葉綠茶的體外抗氧化能力;利用福林酚法和NaNO_2-Al(NO_3)_3-NaOH比色法測(cè)定了連翹葉及其茶的總多酚和總黃酮含量;HPLC法比較研究了連翹葉及其茶主要成分含量。研究結(jié)果表明:連翹葉茶和連翹原葉均表現(xiàn)出較好的抗氧化作用。其中,連翹原葉和連翹葉綠茶的抗氧化能力優(yōu)于連翹葉紅茶,且三者的總多酚、總黃酮含量和它們的抗氧化能力一致。主要化學(xué)成分含量測(cè)定結(jié)果顯示,連翹葉紅茶與連翹原葉和連翹葉綠茶在化學(xué)成分上存在較大差異,其中連翹葉紅茶中未檢測(cè)出連翹酯苷A,連翹苷和蘆丁在連翹葉紅茶中含量?jī)H是原葉和連翹葉綠茶中的1/7~1/6,而連翹葉紅茶中連翹脂素含量約為連翹葉及連翹葉綠茶的42倍。上述結(jié)果表明連翹葉和連翹葉綠茶的抗氧化化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)可能為連翹葉中的苯乙醇苷和蘆丁等總多酚類物質(zhì)。而連翹葉紅茶經(jīng)過發(fā)酵,在葉子及連翹葉綠茶中含量極少的連翹脂素在連翹葉紅茶中反而大量生成,成為連翹葉紅茶的主要活性物質(zhì)之一。三.以細(xì)胞生存率、細(xì)胞培養(yǎng)液TG含量、ALT和ADH活性為指標(biāo),研究了連翹葉紅茶、綠茶、連翹葉紅茶大孔樹脂乙醇洗脫組分(H-20、H-40、H-60、H-80)以及連翹葉茶主要活性成分(連翹酯苷A、連翹苷、蘆丁、連翹脂素)對(duì)酒精肝損傷細(xì)胞的影響,分析連翹葉紅茶、綠茶對(duì)酒精肝損傷細(xì)胞保護(hù)作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。結(jié)果表明:連翹葉紅茶、綠茶能提高酒精肝損傷細(xì)胞的生存率,同時(shí)降低酒精肝損傷細(xì)胞培養(yǎng)液ALT活力,亦具有降低培養(yǎng)液TG含量、升高ADH活性的趨勢(shì),對(duì)酒精肝損傷細(xì)胞起到了保護(hù)作用,與體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。進(jìn)一步對(duì)連翹葉紅茶大孔樹脂乙醇洗脫組分進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)H-20、H-40、H-60和H-80均能提高酒精肝損傷細(xì)胞的生存率,均有降低酒精肝損傷細(xì)胞培養(yǎng)液ALT活力、TG含量和升高ADH的趨勢(shì),且組分H-80保護(hù)酒精肝損傷細(xì)胞的作用略優(yōu)于其余三個(gè)組分。而組分H-80的主要化學(xué)物質(zhì)為木脂素類化合物,這也說明木脂素類化合物為連翹葉紅茶的主要活性物質(zhì)。接著對(duì)連翹酯苷A、連翹脂素、蘆丁和連翹苷作了同樣的研究,結(jié)果表明四個(gè)活性成分均表現(xiàn)出一定保肝作用,但是差異不顯著。本文從動(dòng)物體內(nèi)、體外(分子及細(xì)胞水平)系統(tǒng)的研究了連翹葉紅茶、綠茶的抗氧化和解酒保肝作用,同時(shí)研究了其功效的物質(zhì)基礎(chǔ),為連翹葉紅茶、綠茶的合理開發(fā)利用提供了科學(xué)的理論依據(jù)。
【圖文】：

圖 3.1 不同劑量 CCl4對(duì)小鼠肝臟的影響表 3.2 連翹葉紅茶不同劑量對(duì)小鼠血清 ALT、AST 的影響(n=7)組別 ALT ASTZ 20.5 ± 5.7 41.2 ± 21.9M 191.0 ±76.0#75.2 ± 14.6#Y (100 mg/kg) 98.1 ± 82.6*66.8 ± 17.3*HG (4.5 g/kg) 180.6 ±33.3 76.5 ± 30.0HZ (1.5 g/kg) 176.5 ± 21.1 63.6 ± 15.9HD (0.5 g/kg) 201.3 ± 19.0 75.0 ± 30.2：表 3.2 中 ALT、AST 為卡門氏單位。#表示與 Z 組相比，具有顯著性差異(P＜0.05)；示與 M 組相比，具有顯著性差異(P＜0.05)。

圖 4.1 是實(shí)驗(yàn)中對(duì)部分小鼠出現(xiàn)翻正反射的記錄。圖 4.1 左圖是給予酒精后，其中的 3 只小鼠已經(jīng)出現(xiàn)了翻正反射消失現(xiàn)象，而另外兩只也呈深度醉酒狀態(tài)但翻正反射并未消失。人為將出現(xiàn)翻正反射消失的小鼠擺放成如圖4.1右圖所示（此為翻正反射消失）。隨著時(shí)間的推移，小鼠漸漸酒醒，，四肢逐漸有活動(dòng)的跡象，最終翻轉(zhuǎn)身體為正常的爬行狀態(tài)（此為翻正反射恢復(fù)）。灌胃酒精后，M 組和 Y 組小鼠醉酒潛伏期明顯短于給藥組。進(jìn)入睡眠后（翻正反射消失），M 組睡眠深度明顯高于連翹葉紅茶、綠茶組，且連翹葉紅茶、綠茶劑量越高小鼠越不容易入睡（即 M 組與 Y 組小鼠在有外界聲音等干擾時(shí)，基本沒有反應(yīng)，而連翹葉紅茶、綠茶組小鼠在外界聲音等干擾時(shí)出現(xiàn)明顯活動(dòng)趨勢(shì)，且劑量越高活動(dòng)趨勢(shì)越明顯）。
【學(xué)位授予單位】：山西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 魏晉寶;楊光義;陳歡;葉方;張晨寧;杜士明;陳吉炎;;連翹苷的提取方法、藥理毒理及藥動(dòng)學(xué)研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥師;2015年12期

2 原江鋒;趙君峰;孫軍杰;何靈美;張志琪;劉賀;;河南、山西連翹葉黃酮類和三萜酸類化合物含量比較[J];食品科學(xué);2015年10期

3 趙艷;王進(jìn)明;;連翹茶制作方法探析[J];園藝與種苗;2015年05期

4 馮芹;夏文凱;王現(xiàn)珍;宋洪運(yùn);姚景春;;連翹苷元對(duì)四氯化碳大鼠急性肝損傷的保護(hù)作用[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2015年03期

5 原江鋒;邱智軍;劉建利;劉賀;張森;;連翹葉綠茶制備及活性成分分析[J];河南科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2015年02期

6 太海燕;張善玉;樸蓮荀;;中藥抗酒精性肝損傷的實(shí)驗(yàn)研究現(xiàn)狀[J];醫(yī)學(xué)綜述;2014年19期

7 王儉;;連翹茶與砂茶壺[J];娘子關(guān);2012年04期

8 田維毅;王慶學(xué);王文佳;楊柱;;葛根散對(duì)急性酒精性肝損傷小鼠肝微粒體CYP450含量及CYP2E1活性的影響[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志;2012年04期

9 徐永清;;連翹茶:醇厚怡人[J];茶.健康天地;2011年01期

10 程凌飛;褚揚(yáng);胡晨旭;郭嘉華;萬(wàn)梅緒;周水平;郭治昕;閆希軍;;連翹酯苷A在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)及其血漿蛋白結(jié)合率研究[J];中國(guó)新藥雜志;2010年23期

本文編號(hào)：2633782