【摘要】：胃損傷是由多種因素共同作用引起的胃部疾病,過量飲酒是其發(fā)病的重要因素之一。猴頭菌是一種傳統(tǒng)的藥食兩用真菌,主要用于治療包括胃潰瘍、急慢性胃炎在內(nèi)的消化道疾病�；诤镱^菌對胃腸道的保護作用,本課題嘗試評價猴頭發(fā)酵菌粉對急慢性酒精性胃損傷小鼠的作用,并探究其作用機制。主要研究工作如下:(1)探究猴頭菌粉對小鼠急性酒精性胃損傷的預(yù)防作用。實驗以急性灌胃酒精小鼠為模型,給小鼠連續(xù)6天灌胃不同劑量的猴頭菌粉(125~500 mg/kg),然后單次灌胃無水乙醇造模。觀察小鼠胃黏膜出血、水腫、細胞壞死脫落、炎細胞浸潤等情況,并檢測胃液pH,胃組織中脂質(zhì)過氧化指標丙二醛(MDA)的變化,炎癥因子TNF-α、IL-1β和MPO的mRNA的表達情況,以及炎癥相關(guān)蛋白Caspase-1、NLRP3、IL-1β、TNF-α和TLR4的含量,探討猴頭菌粉對酒精引起的急性胃損傷的預(yù)防效果。結(jié)果表明:猴頭菌粉能顯著改善急性酒精性胃損傷小鼠胃黏膜中出血、潰爛、細胞壞死脫落情況,猴頭菌粉低、中、高劑量組胃黏膜組織形態(tài)學(xué)變化得分與模型組相比分別降低了16.93%、19.52%、42.89%。和模型組相比,猴頭菌粉低、中、高劑量組小鼠胃組織中TNF-αmRNA表達量分別下降了49.02%、54.64%、63.10%;IL-1βmRNA表達量分別下降了27.79%、43.87%、48.26%;高劑量組MPO mRNA表達量下降了42.69%。各治療組小鼠胃組織中炎癥相關(guān)蛋白Caspase-1、NLRP3、IL-1β、TNF-α和TLR4的含量明顯下降(P0.05),且呈一定的劑量依賴性。表明猴頭菌粉能顯著改善胃黏膜狀態(tài),降低胃組織中炎癥因子TNF-α、IL-1β和MPO的mRNA表達量;能減少炎癥相關(guān)蛋白Caspase-1、NLRP3、IL-1β、TNF-α和TLR4的產(chǎn)生,減輕炎癥程度。但對胃液pH和MDA的影響有限。(2)探究猴頭菌粉對小鼠慢性酒精性胃損傷的治療作用。實驗以慢性酒精喂養(yǎng)加單次大劑量酒精灌胃小鼠為模型,在小鼠飼料中添加低劑量乙醇,連續(xù)喂養(yǎng)10天,然后單次灌胃63%乙醇,造模完成后灌胃不同劑量猴頭菌粉(0.5~1 g/kg)進行治療。觀察小鼠胃黏膜出血、水腫、細胞壞死脫落、炎細胞浸潤等情況,并檢測胃組織中炎癥因子TNF-α、IL-1β和MPO的mRNA的表達情況,以及炎癥相關(guān)蛋白Caspase-1、NLRP3、IL-1β、TNF-α和TLR4的含量,探討猴頭菌粉對長期飲用酒精導(dǎo)致的慢性胃損傷的治療效果。結(jié)果表明:猴頭菌粉能顯著改善慢性酒精性胃損傷小鼠胃黏膜出血、水腫、炎細胞浸潤、上皮細胞脫落情況,猴頭菌粉低劑量組、高劑量組的組織形態(tài)評分比模型組低了63.61%、74.55%;猴頭菌粉低、高劑量組TNF-αmRNA的表達量比模型組低45.84%、43.67%;IL-1βmRNA的表達量比模型組低37.59%、34.83%;MPO mRNA的表達量低33.43%、42.16%。表明猴頭菌粉能顯著改善胃黏膜狀態(tài),降低胃組織中炎癥因子TNF-α、IL-1β和MPO的mRNA表達量;能減少炎癥相關(guān)蛋白Caspase-1、NLRP3、IL-1β、TNF-α和TLR4的產(chǎn)生,減輕炎癥程度。達到治療胃損傷的效果。(3)探究猴頭菌粉治療小鼠慢性酒精性胃損傷的機制。提取正常組(CTL)、模型組(ETOH)、猴頭菌粉高劑量組(HEH)三組小鼠胃組織中的蛋白質(zhì),用iTRAQ蛋白組學(xué)技術(shù)進行定量檢測。通過與數(shù)據(jù)庫的比對,共得到5842個蛋白。將三組蛋白進行兩兩對比,ETOH vs.CTL、HEH vs.CTL、HEH vs.ETOH分別有308、205、230個差異蛋白。將鑒定得到的蛋白進行GO注釋,并將差異蛋白進行富集分析,發(fā)現(xiàn)角化作用(keratinization)、上皮細胞分化(epidermal cell differentiation)、角化細胞分化(keratinocyte differentiation)、上皮發(fā)展過程(epidermis development)、角質(zhì)化包膜(cornified envelope)和中間絲(intermediate filament)相關(guān)蛋白富集率較高。將蛋白進行KEGG信號通路注釋,并將差異蛋白進行富集分析,發(fā)現(xiàn)p53信號通路相關(guān)蛋白富集率較高,表明此通路可能會影響胃黏膜狀態(tài)。推測猴頭菌粉可能通過影響胃黏膜上皮細胞分化達到治療慢性酒精性胃損傷的效果。
【圖文】：

圖 3-1 猴頭菌粉對急性酒精性胃損傷小鼠體重變化的影響 3-1 Effect of HE on weight change in mice with ethanol-induced gastric inju液 pH鼠胃液pH值如圖3-2所示，對比正常組，模型組小鼠胃液pH明影響小鼠胃液pH。各給藥組pH與模型組pH值接近，，沒有顯著使小鼠胃液pH恢復(fù)，可能在其他方面對胃有影響。

Fig. 3-1 Effect of HE on weight change in mice with ethanol-induced gastric injury3.1.2 小鼠胃液 pH各組小鼠胃液pH值如圖3-2所示，對比正常組，模型組小鼠胃液pH明顯升高，表明乙醇灌胃會影響小鼠胃液pH。各給藥組pH與模型組pH值接近，沒有顯著差異。說明猴頭菌粉不能使小鼠胃液pH恢復(fù)，可能在其他方面對胃有影響。圖 3-2 猴頭菌粉對急性酒精性胃損傷小鼠胃液 pH 的影響Fig. 3-2 Effect of HE on pH change in mice with ethanol-induced gastric injury3.1.3 小鼠胃黏膜的肉眼觀察將小鼠全胃沿胃大彎剪開，用冷生理鹽水漂洗內(nèi)容物，將胃壁展開后內(nèi)部胃黏膜如圖 3-3 所示。正常組小鼠胃粘膜光澤紅潤，完整無損傷（圖 3-3a）。乙醇灌胃后模型組
【學(xué)位授予單位】：江南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

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2 Dipanjana Datta De;Susanta Roychoudhury;;To be or not to be:The host genetic factor and beyond in Helicobacter pylori mediated gastro-duodenal diseases[J];World Journal of Gastroenterology;2015年10期

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本文編號：2632959