發(fā)布時(shí)間：2020-04-17 17:26

【摘要】：目的:研究發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病是以尿蛋白漏出,腎功能進(jìn)行性惡化為主要特征,而研究蛋白尿大多是關(guān)于細(xì)胞外基質(zhì)、腎小球基底膜等領(lǐng)域,但是系膜基質(zhì)堆積并不能夠徹底解釋清楚產(chǎn)生蛋白尿的原因,近年發(fā)現(xiàn)腎小球?yàn)V過膜的屏障足細(xì)胞在糖尿病腎病的演變有著關(guān)鍵的作用,而足細(xì)胞受諸多因素的影響,而在這些起始因素的下游,又有多條信號傳導(dǎo)通路在其中發(fā)揮著重要作用。近年來發(fā)現(xiàn)Notch信號通路與足細(xì)胞密切相關(guān)且在DN的發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要作用。為糖尿病腎病的預(yù)防和治療開辟了新的途徑。根據(jù)“毒損腎絡(luò),邪伏膜原”理論,南征教授針對糖尿病腎病而制定的臨床常用有效方劑“榛花消腎安膠囊”,在臨床治療過程中療效顯著。本實(shí)驗(yàn)通過檢測糖尿病大鼠足細(xì)胞相關(guān)分子Synaptopodin、TRPC6的蛋白表達(dá)情況及Notch信號通路相關(guān)蛋白Notch1、Jagged1、NICD、Hes1的表達(dá)的影響,探討“榛花消腎安膠囊”治療糖尿病大鼠腎臟足細(xì)胞損傷與Notch信號通路相關(guān)性的機(jī)理。方法:1.100只wistar雄性大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周,隨機(jī)分為正常對照組(10只)和造模組(90只),對造模組進(jìn)行腹腔注射1%STZ(35mg/Kg),72小時(shí)后進(jìn)行尾靜脈采血,當(dāng)檢測空腹血糖≥16.7mmol/L者認(rèn)為造模成功。將造模成功的77只實(shí)驗(yàn)性大鼠模型隨機(jī)分為模型對照組20只,中藥(榛花消腎安膠囊)高、低劑量組,西藥(厄貝沙坦片)組各19只。中藥高劑量組給予1g/kg/d,中藥低劑量組給予0.25g/kg/d,榛花消腎安膠囊混懸液灌胃;西藥對照組予厄貝沙坦混懸液20mg/kg/d灌胃,連續(xù)灌胃觀察12周。觀察大鼠一般狀態(tài),記錄24小時(shí)體重、尿量;實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)記錄腎重/體重,檢測空腹血糖、24h尿微量白蛋白;檢測TC、TG,Scr、BUN。2.光學(xué)顯微鏡和透射電鏡對腎組織病理形態(tài)學(xué)變化及足細(xì)胞變化進(jìn)行觀察,分析榛花消腎安膠囊對糖尿病大鼠腎臟組織結(jié)構(gòu)的影響,研究足細(xì)胞Synaptopodin、TRPC6的蛋白表達(dá)。3.應(yīng)用Rt-PCR檢測榛花消腎安膠囊對糖尿病大鼠Notch信號通路相關(guān)蛋白Jagged1、Notch1、Synaptopodin、TRPC6、Hes1 m RNA表達(dá)。4.利用Western blot觀察榛花消腎安膠囊對糖尿病大鼠Notch信號通路相關(guān)蛋白Jagged1、NICD、Hes1的影響及與足細(xì)胞損傷的相關(guān)性。結(jié)果:1.榛花消腎安膠囊具有調(diào)理糖尿病大鼠的“三多一少”臨床癥狀。2.榛花消腎安膠囊能夠降低糖尿病大鼠膽固醇、空腹血糖值、低密度脂蛋白、甘油三酯,提高高密度脂蛋白的含量。3.榛花消腎安膠囊能夠抑制糖尿病大鼠腎臟體積肥大,使早期糖尿病大鼠尿中蛋白的排出減少,BUN和Scr的含量降低,提高腎功能。4.榛花消腎安膠囊能夠修復(fù)糖尿病大鼠腎臟組織生理形態(tài),毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞未見異常,足突組織部分融合,GBM尚未明顯增厚,系膜區(qū)未見顯著增加。5.榛花消腎安膠囊能夠下調(diào)糖尿病大鼠的腎臟中的TRPC6蛋白的表達(dá),上調(diào)Synaptopodin的表達(dá),具有保護(hù)腎小球足細(xì)胞作用。6 Rt-PCR的結(jié)果顯示榛花消腎安膠囊對實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠腎臟足細(xì)胞中與對照組比較,給藥糖尿病組小鼠的Jagged1、Notch1、TRPC6、Hes1mRNA的表達(dá)量明顯下調(diào)(P0.01),Synaptopodin表現(xiàn)為上調(diào)。7.Western blot的結(jié)果顯示榛花消腎安膠囊對實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠腎臟足細(xì)胞中與正常對照組比較,給藥糖尿病組小鼠的Jagged1、NICD1、Hes1蛋白表達(dá)量明顯下調(diào)(P0.01)。8.榛花消腎安膠囊對腎臟的保護(hù)作用呈現(xiàn)藥物濃度依賴性,高劑量組優(yōu)于低劑量組。結(jié)論:榛花消腎安膠囊能夠調(diào)理糖尿病大鼠生理狀態(tài)和治療三多一少的癥狀;抑制早期腎臟腫大;降低空腹血糖、血脂,使腎臟功能得到保護(hù),其作用機(jī)制考慮是榛花消腎安膠囊通過干預(yù)Synaptopodin、TRPC6,下調(diào)Notch1、Jagged1、Hes1的表達(dá),從而抑制Notch信號通路以降低足細(xì)胞的損害而實(shí)現(xiàn)對腎臟的保護(hù)作用;榛花消腎安膠囊對腎臟的保護(hù)作用呈現(xiàn)藥物濃度依賴性,高劑量組優(yōu)于低劑量組。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)南征教授對消渴腎病的“解毒通絡(luò),益腎達(dá)原”的醫(yī)治理念與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制中足細(xì)胞損傷相結(jié)合,通過抑制Notch信號通路對腎小球?yàn)V過膜足細(xì)胞相關(guān)蛋白表達(dá)的下調(diào)而發(fā)揮治療糖尿病腎病的作用。
【圖文】：

estern blot 檢測 Hes1 在榛花消腎安膠囊對實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠腎臟足00.20.40.60.811.21.4正常對照組 模型對照組 西藥對照組 中藥低劑量 中藥高esH /GAPDH1
【學(xué)位授予單位】：長春中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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1 陳樹華;;血清胱抑素C和β2-微球蛋白檢測在糖尿病腎病早期診斷的應(yīng)用價(jià)值[J];醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與臨床;2016年02期

2 徐艷艷;范秋靈;丁紅;盧新星;汪旭;王力寧;;高糖誘導(dǎo)腎小球系膜細(xì)胞Notch信號通路活化及百令提取液的干預(yù)作用[J];中華腎臟病雜志;2016年02期

3 靳曉華;任美芳;郭曉玲;康麗霞;司鈺媚;楊鳳文;袁國棟;崔領(lǐng)秀;檀金川;;益腎通絡(luò)方對膜性腎病大鼠腎組織Nephrin、Podocin mRNA表達(dá)的影響[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2015年11期

4 王世英;時(shí)軍;陳寶平;;活性維生素D對糖尿病腎病大鼠足細(xì)胞損傷的抑制效果及其可能機(jī)制[J];中國老年學(xué)雜志;2015年20期

5 丁海華;邱原野;王盈盈;倪偉建;唐麗琴;魏偉;;小檗堿對糖尿病腎病大鼠nephrin、podocin和α3β1整合素表達(dá)的影響[J];中國藥理學(xué)通報(bào);2015年10期

6 王雪;殷雪蓮;;糖尿病腎病患者不同時(shí)期的心理特點(diǎn)及心理護(hù)理[J];承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2015年05期

7 侯曉;李純璞;郭冬梅;倪梅;陳麗;程雪梅;張開剛;;應(yīng)用GSI藥物阻斷Notch-1通路對骨肉瘤小鼠模型腫瘤生長及血管形成的影響[J];中國矯形外科雜志;2015年19期

8 劉建林;陳明亮;李惠;王慧超;張威;;雷公藤多苷聯(lián)合厄貝沙坦對糖尿病腎病患者足細(xì)胞損傷的影響[J];中國現(xiàn)代醫(yī)生;2015年15期

9 李全歡;崔荷英;金明玉;;淺談朝醫(yī)學(xué)的毒邪理論[J];中國民族民間醫(yī)藥;2015年07期

10 謝可煒;魏凱;顧明穎;向們;顧樂怡;;白藜蘆醇通過Sirtuin1激活足細(xì)胞Notch1信號[J];中華腎臟病雜志;2015年04期

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1 李典鶴;南征;;南征教授治療消渴腎病(毒損脾腎之陽證)三則[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會內(nèi)科分會消渴病第五屆學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 韓香蓮;榛花消腎安膠囊干預(yù)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠足細(xì)胞損傷與氧化應(yīng)激相關(guān)性的研究[D];長春中醫(yī)藥大學(xué);2015年

2 孫煜;神經(jīng)標(biāo)志蛋白在足細(xì)胞中的表達(dá)及其調(diào)節(jié)作用[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

3 任志龍;Caveolin-1在血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)足細(xì)胞Nephrin磷酸化改變中的作用及機(jī)制[D];武漢大學(xué);2012年

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1 王金華;miR-155在糖尿病腎病發(fā)病中的作用研究[D];蘭州大學(xué);2016年

2 陸文松;小檗堿對糖尿病腎病大鼠足細(xì)胞黏附功能的影響和機(jī)制研究[D];暨南大學(xué);2015年

3 武鑫;高糖及糖基化終末產(chǎn)物刺激足細(xì)胞產(chǎn)生微囊泡的初步研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2014年

4 陳舟;FAM40A的足細(xì)胞定位及其對細(xì)胞骨架的影響[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

5 趙美姣;原發(fā)性腎小球疾病患者血清和尿液對小鼠足細(xì)胞Synaptopodin和Podocalyxin表達(dá)的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

6 劉迎九;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在糖尿病腎組織足細(xì)胞損傷中的表達(dá)和意義[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

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本文編號：2631110