【摘要】：藥用植物及其內(nèi)生真菌作為一類具有巨大開發(fā)潛力的資源,現(xiàn)已成為國內(nèi)外研究者發(fā)掘新型天然抗生素的主要來源。本文以民間傳統(tǒng)藥用植物苦玄參和藥用植物華南毛蕨內(nèi)生真菌作為研究對象,對苦玄參的化學成分及華南毛蕨內(nèi)生真菌的次級代謝產(chǎn)物進行了系統(tǒng)的研究,并對部分化合物進行了抑菌活性測定,為開發(fā)新型抗菌藥物提供新的資源。研究內(nèi)容主要包括:本文第一章首先對耐藥菌及其抗生素的研究現(xiàn)狀進行了介紹,接著講述了藥用植物苦玄參和華南毛蕨的化學成分及其藥理活性的研究,最后綜述了近些年植物內(nèi)生真菌及其次級代謝產(chǎn)物的多樣性以及在抗菌活性方面的研究概況。本文第二章對傳統(tǒng)中藥苦玄參的乙酸乙酯提取物進行研究,運用硅膠、凝膠Sephadex LH20柱色譜以及重結(jié)晶等手段從中分離得到6個已知化合物,通過理化性質(zhì)和NMR技術(shù)鑒定了其結(jié)構(gòu),分別為28-O-acetylbetulin(PFL-1),豆甾醇(PFL-2),白樺脂醇(PFL-3),苦玄參苷IA(PFL-4),苦玄參酮I(PFL-5),苦玄參苷元VI(PFL-6)。其中化合物PFL-1和PFL-2為首次從苦玄參中分離得到。本文第三章采用組織塊法對藥用植物華南毛蕨內(nèi)生真菌進行分離,從其根、莖、葉及根狀莖中共獲得40株內(nèi)生真菌。以敏感型金黃色葡萄球菌、耐藥型金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和銅綠假單胞菌作為測試菌,運用瓊脂擴散法對全部內(nèi)生真菌菌株進行抑菌活性的初步篩選,對具有抑菌活性的菌株進行微量發(fā)酵,通過薄層層析分析其代謝產(chǎn)物,從中選取兩株代謝產(chǎn)物最為豐富的菌株CYC17和CYC38作為目標菌株。本文第四章對采用液體培養(yǎng)基發(fā)酵的內(nèi)生真菌菌株CYC17的乙酸乙酯提取物進行系統(tǒng)的分離,通過硅膠柱色譜、凝膠Sephadex LH20和重結(jié)晶等分離技術(shù)共獲得7個已知化合物,利用NMR和MS等波譜學方法,鑒定為5-羥甲基-2-呋喃醛(CYC17-1),啤酒甾醇(CYC17-2),1-(4-羥基苯基)-2-氨基乙醇(CYC17-3),4-甲基苯甲醛(CYC17-4),二十五碳酸單甘油酯(CYC17-5),4-氨基苯甲醛(CYC17-6),N-乙基苯胺(CYC17-7)。其中化合物CYC17-3為首次從植物內(nèi)生真菌中分離到,化合物CYC17-4,CYC17-6和CYC17-7為新的天然產(chǎn)物。本文第五章對采用大米培養(yǎng)基發(fā)酵的內(nèi)生真菌菌株CYC38的乙酸乙酯提取物進行化學成分的分析,利用硅膠柱層析、凝膠Sephadex LH20等技術(shù)共分離到4個化合物,通過現(xiàn)代波譜學技術(shù)對其結(jié)構(gòu)進行表征,分別為啤酒甾醇(CYC38-1),環(huán)-(甘-苯丙)-二肽(CYC38-2),4-(2-羥乙基)-苯酚(CYC38-3),環(huán)-(脯-N-甲基苯丙-纈-異亮-丙)-五肽(CYC38-4),其中化合物CYC38-4為新化合物。本文第六章采用微量二倍稀釋法對部分化合物進行抑菌活性測定,以敏感型金黃色葡萄球菌、耐藥型金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、痢疾桿菌、沙門桿菌、大腸埃希菌和傷寒桿菌七種病原菌作為指示菌,結(jié)果表明化合物PFL-3、PFL-4、CYC17-2、CYC17-3、CYC38-2、CYC38-3和CYC38-4對痢疾桿菌均表現(xiàn)出一定的抑制活性;化合物PFL-6對大腸埃希菌和傷寒桿菌顯示抑制作用;新化合物CYC38-4對傷寒桿菌表現(xiàn)出明顯的抑制效果;化合物PFL-4、PFL-5、PFL-6和新化合物CYC38-4不僅對敏感型金黃色葡萄球菌有抑制作用,而且對耐藥型金黃色葡萄球菌也表現(xiàn)出抑制作用。
【圖文】：

圖 3-1 部分華南毛蕨內(nèi)生真菌的菌落形態(tài)及顯微圖Fig. 3-1 The colony and microstructures of some endophytic fungi from Cyclosorus parasiticus3.2 抑菌活性菌株的篩選結(jié)果實驗結(jié)果顯示，，在這 40 株華南毛蕨內(nèi)生真菌中，僅有 19 個菌株對一種或多種細有抑制活性，占全部菌株總數(shù)的 47.5%（見表 3-4）。其中對大腸埃希菌表現(xiàn)出抑制用的菌株有 18 個，對敏感型金黃色葡萄球菌有抑制效果的菌株有 13 個，對耐藥型黃色葡萄球菌有抑制作用的菌株有 11 個，而對銅綠假單胞菌顯示抑制活性的菌株有 10 株。在活性菌株中，95%的菌株均對大腸埃希菌有抑制活性，且抑制能力較；其中有 53%的菌株對銅綠假單胞菌有抑制作用，但抑制作用普遍較弱。

對具有抑菌活性的 19 株華南毛蕨內(nèi)生真菌的微量發(fā)酵產(chǎn)物進行化學成分分析，通過 TLC 檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)有 9 株內(nèi)生真菌的次級代謝產(chǎn)物種類比較豐富，篩選出兩株內(nèi)生真菌CYC17和CYC38的次級代謝產(chǎn)物最為豐富，其薄層色譜顯色結(jié)果見圖3-2。365nm 254nm 香草醛-濃硫酸圖 3-2 部分華南毛蕨內(nèi)生真菌次級代謝產(chǎn)物的薄層層析結(jié)果Fig 3-2 The results of TLC of some endophytic fungi from Cyclosorus parasiticusCYC38CYC17
【學位授予單位】：廣東藥科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R284

【參考文獻】

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1 王召平;朱Y

本文編號：2628302