【摘要】：胚胎體外培養(yǎng)是體外受精-胚胎移植(IVF-ET)技術(shù)的關(guān)鍵部分。然而高質(zhì)量胚胎的缺乏會(huì)造成移植效率低下,也是IVF-ET失敗的關(guān)鍵因素。有研究已經(jīng)證實(shí),在胚胎發(fā)育過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的各種有害因素中,由過(guò)量ROS引起的影響被認(rèn)為是最顯著的。因此,為了清除過(guò)量的ROS,抗氧化劑已被廣泛的應(yīng)用在胚胎培養(yǎng)中。本試驗(yàn)選取天然型抗氧化劑黃芪總黃酮(TFA),在細(xì)胞及分子水平上來(lái)研究TFA對(duì)昆明小鼠胚胎體外發(fā)育的影響,以及TFA對(duì)體外培養(yǎng)小鼠囊胚的ROS水平和相關(guān)抗氧化酶基因的影響。在TFA對(duì)小鼠胚胎體外發(fā)育的影響試驗(yàn)中,將TFA濃度分為5組進(jìn)行篩選,分別為0mg/L,25mg/L,50mg/L,75mg/L和100mg/L,其中0mg/L為對(duì)照組;后續(xù)試驗(yàn)分組為對(duì)照組,H2O2處理組和最佳濃度TFA+H2O2處理組,通過(guò)DCFH-DA熒光染色測(cè)定各組小鼠囊胚ROS水平,利用 RT-PCR 測(cè)定CAT SOD1、SOD2、SOD3、GPx1、GPx2 和 GPx4 基因的表達(dá)量。結(jié)果顯示:1、在TFA對(duì)小鼠胚胎體外發(fā)育的影響中,各濃度組之間在2細(xì)胞率方面差異不顯著;在4細(xì)胞率方面,75 mg/L組顯著高于其他各組(P0.05);在囊胚率方面,50 mg/L組顯著高于Omg/L組和100 mg/L組(P0.05),75 mg/L組顯著高于 25 mg/L 組和 50 mg/L(P0.05)。2、在TFA對(duì)小鼠囊胚ROS水平的影響中,H2O2組極顯著高于對(duì)照組(P0.01);TFA+H2O2 組顯著低于 H2O2 組(P0.05)。3、在TFA對(duì)小鼠囊胚相關(guān)抗氧化酶基因的影響中,TFA+H2O2組的SOD1和SOD2的表達(dá)量都顯著高于H202組(P0.05),CAT、GPx1和GPx4的表達(dá)量都極顯著高于H2O2組(P0.01)。綜上,我們可得出結(jié)論:1.在本研究中,TFA體外胚胎培養(yǎng)的最適濃度為75 mg/L。2.TFA處理可降低氧損傷小鼠囊胚ROS水平,提高CAT,SOD1、SOD2,GPx1和GPx4的表達(dá)水平。
【圖文】：

ＧＰｘＪ七種抗氧化酶基因表達(dá)影響的測(cè)定。逡逑３．邋３．邋１邋ＴＦＡ對(duì)氧損傷小鼠囊胚以「基因表達(dá)的影響逡逑小鼠囊胚Ｃ４ｒ基因表達(dá)量ＲＴ－ＰＣＲ檢測(cè)結(jié)果如圖３－２。逡逑２２逡逑

組（Ｐ＜０．０１）。逡逑３．邋３．邋２邋ＴＦＡ對(duì)氧損傷小鼠囊胚ＳＯＺ？基因表達(dá)的影響逡逑小鼠囊胚ＳＯＤ基因表達(dá)量ＲＴ－ＰＣＲ檢測(cè)結(jié)果如圖３－３。逡逑１．２邋－逡逑３邐３邐３逡逑１邐＿邐邐邋邐邋ｊ邐邐逡逑ｇ邋０．８邋－邐ｂ邐■邐ｂ逡逑１－邋ｍ邋ｎ｜邋ｎｉ邋ｆ逡逑°：１１邋Ｉｎｌ邋１邋１１１．邋１邋ＩＩＩ，，逡逑ＳＯＤｌ邐Ｓ０Ｄ２．邐Ｓ０Ｄ３逡逑圖３－４．ＴＦＡ對(duì)氧損傷小鼠囊胚ＳＯＤ基因表達(dá)的影響逡逑其中Ｃ：對(duì)照組；Ｈ：邋Ｈ２0２組；ＴＨ：邋ＴＦＡ＋Ｈ２Ｏ２組逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋３－４．Ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ＴＦＡ邋ｏｎ邋ＳＯＤ邋ｇｅｎｅ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｏｆ邋Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ邋Ｄａｍａｇｅ邋Ｍｏｕｓｅ逡逑２３逡逑
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

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本文編號(hào)：2626665