【摘要】：目的研究低、中、高輻射劑量對(duì)小鼠骨髓樹突細(xì)胞(DC)的損傷,通過給予補(bǔ)腎解毒方觀察此方對(duì)DC的保護(hù)作用,并比較防治結(jié)合與預(yù)防給藥兩種給藥方式抗不同劑量輻射DC損傷的效應(yīng)。系統(tǒng)研究補(bǔ)腎解毒方對(duì)輻射后DC的防護(hù)作用和調(diào)控機(jī)制。方法將270只小鼠采用隨機(jī)數(shù)表法隨機(jī)分為3批,其中每批小鼠再隨機(jī)分為5組(18只/組),分別為:空白對(duì)照組、輻射模型組、氨磷汀組、補(bǔ)腎解毒方防治結(jié)合組、補(bǔ)腎解毒方預(yù)防組。每天上午9:00給予補(bǔ)腎解毒方預(yù)防各組和補(bǔ)腎解毒方防治結(jié)合各組灌胃中藥,給予空白對(duì)照組、輻射模型各組、氨磷汀各組等容積的生理鹽水,灌胃容積為0.25 mI。實(shí)驗(yàn)開始后第11d,3批小鼠分別接受2Gy、4Gy、6Gy不同劑量的Coγ-射線全身輻照,并于輻射后第1d、7d、14d采用隨機(jī)數(shù)表法每組抽取6只小鼠,取其股骨骨髓,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠骨髓樹突細(xì)胞MHC-II分子的陽(yáng)性細(xì)胞百分比,和DC表面4個(gè)主要共刺激分子CD80、CD83、CD86、CD284的陽(yáng)性細(xì)胞百分比,并通過細(xì)胞免疫熒光觀察DC成熟、活化情況。結(jié)果(1)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DC陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率情況:(1)2Gy低劑量輻射:輻射后第7d,防治組MHC-II+分子細(xì)胞百分比和CD80、CD83、CD86、CD284陽(yáng)性細(xì)胞百分比都增加,表現(xiàn)出了較強(qiáng)的防護(hù)效應(yīng),預(yù)防組次之。輻射后第14d,預(yù)防組陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率明顯下降,而防治組僅表現(xiàn)出微弱下降。(2)4Gy、6 Gy劑量輻射:預(yù)防組陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率較高,保護(hù)作用優(yōu)于防治組,同時(shí)預(yù)防組和防治組對(duì)樹突細(xì)胞的保護(hù)效應(yīng)弱于2Gy輻射條件下同組狀況;而氨磷汀組在輻射后第1d表現(xiàn)出不同程度的防護(hù)作用。(2)細(xì)胞免疫熒光觀察DC成熟、活化情況:不同的輻射劑量下,空白組骨髓細(xì)胞能較好的分化成成熟的DC細(xì)胞;而輻射抑制了骨髓細(xì)胞向DC分化、成熟的能力,隨著輻射劑量的增加,可以觀察到輻射組DC分化、成熟的能力逐步減弱;補(bǔ)腎解毒方防治組和預(yù)防組能夠較好的逆轉(zhuǎn)輻照引起的骨髓細(xì)胞向DC細(xì)胞分化、成熟的能力,氨磷汀組僅在輻射后第1d表現(xiàn)出了防護(hù)作用。結(jié)論補(bǔ)腎解毒方能促進(jìn)DC成熟、活化,增強(qiáng)機(jī)體對(duì)輻射的防護(hù)作用:(1)在不同的輻射劑量下,防治組和預(yù)防組MHC-II分子表達(dá)率均有不同程度的增加,表明補(bǔ)腎解毒方能促進(jìn)DC成熟。(2)DC表面4個(gè)主要共刺激分子CD80、CD83、CD86、CD284表達(dá)率增強(qiáng),表明補(bǔ)腎解毒方能促進(jìn)DC成熟、活化。(3)細(xì)胞免疫熒光觀察DC成熟、活化情況,輻射后第1d,防治組和預(yù)防組未表現(xiàn)出防護(hù)效應(yīng),輻射后第7d、14d防治組和預(yù)防組均能夠較好的逆轉(zhuǎn)輻照引起的骨髓細(xì)胞向DC細(xì)胞分化、成熟的能力。(4)2Gy低劑量輻射條件下,防治組防護(hù)效應(yīng)優(yōu)于預(yù)防組;4Gy、6Gy中、高劑量輻射條件下,預(yù)防組防護(hù)效應(yīng)優(yōu)于防治組。
【圖文】：

細(xì)胞表達(dá)率高于余 4 組（P<0.01，P<0.05），空白組低于余 4 組（P<0.01，P<0.05）；輻射后第 14d，空白組低于余 4 組（P<0.01）。見圖 1-1、1-2。圖1-1 骨髓DC中MHC-II+分子表達(dá)注：五組小鼠分別接受相應(yīng)處理后于輻射后第 1d，第 7d 以及第 14d，分離其骨髓細(xì)胞，進(jìn)行流式染色分析其 DC 表面 MHC-II 分子的表達(dá)

圖 1-2 輻射后第 1d、7d、14d 各組 MHC-II+分子表達(dá)比較注：五組間差異統(tǒng)計(jì)學(xué)分析使用單因素方差分析進(jìn)行，若有差異，在使用Beferoni校正α后，再使用Turkey法進(jìn)行分析。（以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。* P<0.05; ** P<0.01; ***P<0.001）2、不同處理組 MHC-II+DC 中 CD83 表達(dá)輻射后第 1d，氨磷汀組 CD83 陽(yáng)性細(xì)胞百分比高于空白組（P<0.01），同時(shí)空白組、輻射組、防治組和預(yù)防組 4 組間無(wú)差異；輻射后第 7d，防治組與預(yù)防組CD83 陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率高于空白組、輻射組、氨磷汀組（P<0.01，P<0.05），同時(shí)防治組和預(yù)防組間無(wú)差異；輻射后第 14d，氨磷汀組優(yōu)于預(yù)防組（P<0.05），同時(shí)空白組 CD83 陽(yáng)性細(xì)胞百分比低于余 4 組（P<0.01，P<0.05）。見圖 1-3、1-4。
【學(xué)位授予單位】：錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2621158