【摘要】：目的:非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是世界范圍內(nèi)的主要肝臟疾病,通常與胰島素抵抗(insulin resistance,IR)和高脂血癥有關(guān),它已成為許多疾病死亡的預(yù)測(cè)因素。本研究旨在研究甘草粗多糖(crude Glycyrrhiza uralensis polysaccharide,CGP)對(duì)高脂飲食(high-fat diet,HFD)誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝大鼠的保護(hù)作用。方法:通過(guò)苯酚-硫酸法、紫外分光光度法(ultraviolet spectrophotometry,UV)、傅里葉變換紅外光譜法(fourier transform infrared spectra,FT-IR)和高效液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC)分析CGP。本研究采用HFD誘導(dǎo)的NAFLD大鼠模型用于研究CGP的肝保護(hù)作用。將52只SD大鼠根據(jù)體重隨機(jī)分成正常組和模型組,分別飼喂正常飼料與高脂飼料,連續(xù)喂養(yǎng)10周后我們依據(jù)肝臟病理形態(tài)結(jié)果判斷造模是否成功。然后將模型組大鼠根據(jù)體重隨機(jī)分為CGP干預(yù)組(400、500、600mg/kg/day),二甲雙胍治療組(150 mg/kg)和模型組。干預(yù)6周后,使用相應(yīng)試劑盒測(cè)定大鼠血清中總膽固醇(total cholesterol,TC),甘油三酯(triglycerides,TG),低密度脂蛋白膽固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C),高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C),谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT),谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase,AST),白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6),腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、空腹血糖(fasting blood glucose,FPG)和胰島素水平;檢測(cè)大鼠肝臟組織中的丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、過(guò)氧化氫酶(catalase,CAT)及還原型谷胱甘肽酶(reduced glutathionease,GSH)。同時(shí),對(duì)肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。RT-PCR和Western blot法檢測(cè)肝臟組織中細(xì)胞色素P4502E1(CYP2E1)蛋白與基因表達(dá)量。結(jié)果:通過(guò)分析發(fā)現(xiàn),CGP主要由摩爾比為3.11:5.45:13.6:0.53:0.22的甘露糖:鼠李糖:葡萄糖:半乳糖:巖藻糖組成的雜多糖,其具有多糖應(yīng)有的紅外和紫外的吸收特征,多糖總含量為42.81%。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與模型組比較,口服不同濃度的CGP均可可降低NAFLD大鼠血清中的ALT,AST,TG,TC,LDL-C、FPG、INS(P0.05),升高肝臟組織中SOD、CAT、GSH(P0.05)水平。同時(shí),CGP還抑制血清中TNF-α、IL-6(P0.05)的升高,改善NAFLD大鼠促炎癥因子環(huán)境。RT-PCR和western blot的結(jié)果顯示,CGP抑制了NAFLD大鼠肝組織中CYP2E1的表達(dá)。此外,肝臟的組織病理學(xué)檢查顯示CGP可防止非酒精性脂肪肝大鼠肝臟脂肪的浸潤(rùn)和并逆轉(zhuǎn)組織的病理學(xué)改變。結(jié)論:CGP具有降低NAFLD血脂、ALT和AST水平,增加胰島素敏感性及SOD、CAT、GSH酶的活性,改善炎癥因子狀況的作用,并可能通過(guò)抑制CYP2E1基因的表達(dá)來(lái)發(fā)揮對(duì)NAFLD的保護(hù)作用。本研究為寧夏甘草的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。
【圖文】：

醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 結(jié)果GP 的表征 苯酚-硫酸法測(cè)定多糖含量使用苯酚-硫酸法測(cè)定 CGP 的多糖含量，以無(wú)水葡萄糖作為標(biāo)準(zhǔn)品，基于標(biāo)準(zhǔn)得到 CGP 的多糖含量為 42.81%（y=285.84x+0.9258,R2=0.9987）。

圖 2. CGP 水溶液的紫外吸收光譜圖igure 2. UV- Visible spectra of CGP aqueous solution. CGP: Crude Glycyrrhiza uralenpolysaccharide. 傅里葉變換紅外光譜掃描 CGP根據(jù) CGP 的紅外光譜圖顯示，3392.79 cm-1附近的強(qiáng)烈寬帶和約 2931.80cm-1弱吸收帶分別是由于 O-H 和 C-H 伸縮振動(dòng)。 此外，，1383 與 1437 cm-1之間的吸收峰是源于糖類(lèi) C-H 的變角振動(dòng)，它與 3392.79 cm-1附近的吸收峰是多糖吸收峰。1475 與1300cm-1之間的雙吸收峰被認(rèn)定為C-H彎曲振動(dòng)。在2400-210的峰值與三鍵對(duì)稱(chēng)伸縮有關(guān)。在 1616.35cm-1區(qū)域的吸收峰是由于雙鍵的伸縮振，900-1200cm-1區(qū)域的特征吸收峰歸因于 C-O-H 彎曲振動(dòng)。
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R285.5

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本文編號(hào)：2617226