【摘要】：目的:探討天麻多糖(GEP)對(duì)D-半乳糖(D-gal)誘導(dǎo)的小鼠骨骼肌衰老的延緩作用及其可能的機(jī)制。方法:50只3月齡昆明小鼠隨機(jī)分為5組:對(duì)照組(control),模型組(model),天麻多糖低劑量組(0.4mg/(g·d~(-1))(L))、中劑量組(2mg/(g·d~(-1))(M))、高劑量組(10mg/(g·d~(-1))(H)),每組10只(雌雄各半)。天麻多糖三個(gè)劑量組和模型組小鼠每日頸背部皮下注射5%D-半乳糖(125 mg/kg)溶液建立實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?對(duì)照組以相同的方式及部位注射等體積的生理鹽水,連續(xù)給藥8周。建模第8天開始,天麻多糖低、中、高劑量組分別以天麻多糖0.4mg/(g·d~(-1))、2mg/(g·d~(-1))、10mg/(g·d~(-1))灌胃,連續(xù)給藥7周。對(duì)照組和模型組用等體積的生理鹽水灌胃,實(shí)驗(yàn)過程共8周,期間以普通飼料喂養(yǎng),保持實(shí)驗(yàn)溫度在20~24℃。實(shí)驗(yàn)過程中觀測(cè)如下指標(biāo):(1)觀察各組小鼠生長狀況并檢測(cè)其體重變化,(2)水平繩實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠四肢肌肉力量,(3)檢測(cè)肌組織、肝、腎臟器系數(shù),(4)組織病理學(xué)觀測(cè)骨骼肌纖維橫截面積變化,(5)ELISA法檢測(cè)骨骼肌組織衰老相關(guān)超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)的活性,丙二醛(MDA)及8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)的含量,(6)qRT-PCR和Western blot法分別檢測(cè)Caspase-3、MAFbx和MuRF-1的mRNA表達(dá)和蛋白水平變化。結(jié)果:(1)與對(duì)照組比較,模型組出現(xiàn)明顯的脫毛現(xiàn)象、活動(dòng)度下降及體重減輕;與模型組比較,GEP呈時(shí)間和劑量依賴性改善D-半乳糖誘導(dǎo)的小鼠骨骼肌衰老,增加體重,維持臟器系數(shù)穩(wěn)定,增強(qiáng)小鼠的肌肉力量。(2)與對(duì)照組比較,模型組骨骼肌肌纖維橫截面積顯著減小(P0.05);與模型組比較,給予三個(gè)劑量GEP干預(yù)后,肌纖維橫截面積逐漸恢復(fù),并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(3)ELISA結(jié)果顯示,與對(duì)照組比較,模型組SOD、GSH-Px、CAT水平降低,MDA、8-OHdG含量增加(P0.05);然而,與模型組比較,GEP給藥組小鼠骨骼肌組織SOD、CAT、GSH-Px水平升高,MDA、8-OHdG水平明顯降低(P0.05),并且GEP劑量越大,上述指標(biāo)改變?cè)矫黠@。(4)qRT-PCR與Western blot分析結(jié)果表明,與對(duì)照組比較,模型組Caspase-3、MAFbx、MuRF-1的mRNA表達(dá)和蛋白水平明顯增高(P0.05),GEP給藥組能明顯下調(diào)Caspase-3、MAFbx、MuRF-1的mRNA表達(dá)和蛋白水平(P0.05),并且GEP劑量越大,其表達(dá)量越低。結(jié)論:GEP可延緩D-半乳糖誘導(dǎo)的小鼠骨骼肌衰老,其機(jī)制可能與下調(diào)氧化應(yīng)激水平及Caspase-3、MAFbx、MuRF-1的水平有關(guān)。
【圖文】：

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作流程

GEP對(duì)D-gal誘導(dǎo)的衰老小鼠體重的影響
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5

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本文編號(hào)：2614902