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鉤吻體外抗真菌有效部位的篩選和研究

發(fā)布時間:2020-04-03 04:44
【摘要】:目的本研究目的在于探討鉤吻提取物的體外抗真菌作用,同時探究鉤吻提取物體外抗真菌的明確部位。方法將鉤吻粉末用超純水和95%乙醇提取得鉤吻水提取和乙醇提取粉末;乙醇提取物分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到相應部位的粉末;用HPLC法以鉤吻素甲、胡蔓藤堿丙、鉤吻素子、鉤吻素己、鉤吻綠堿、常綠鉤吻堿和胡蔓藤堿乙七個標品,檢測鉤吻醇提物及各萃取組分生物堿含量;采用微量液基稀釋法檢測鉤吻提取物及各萃取組分對臨床收集到的43個人類淺部感染真菌和中國科學院皮膚病研究所購買的紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、犬小孢子菌、絮狀表皮癬、白念珠菌等5種標準株的體外抗真菌活性;采用瓊脂稀釋法檢測鉤吻醇提物及其萃取組分對曲霉菌的體外抗真菌活性。結果1.鉤吻水提物凍干粉重量為10.532g,得率為10.5%;鉤吻醇提物的凍干粉重量為4.752g,得率為4.8%。鉤吻醇提物萃取后,石油醚部位0.566g,得率為11.8%;乙酸乙酯部位1.885g,得率為39.7%;正丁醇部位1.583g,得率為33.3%;水部位0.563g,得率為11.8%,乙酸乙酯部位得率最高。2.鉤吻醇提物的正丁醇部位中七種指標性生物堿:鉤吻素甲、胡蔓藤堿丙、鉤吻素子、鉤吻素己、鉤吻綠堿、常綠鉤吻堿和胡蔓藤堿乙的含量最高。3.43個實驗真菌的鑒定結果如下:紅色毛癬菌18個,酵母菌12個,須毛癬菌13個。4.鉤吻醇提物的體外抗真菌效果明顯強于鉤吻水提物。43個實驗真菌中,鉤吻水提物對21個真菌100%抑制,鉤吻水提物的MIC501.56 μ g/ml,MIC90=12.50 μ g/ml;鉤吻醇提物對37個真菌100%抑制,鉤吻醇提物的MIC501.56 μ g/ml,MIC90=6.25μg/ml。5.鉤吻醇提物的各萃取部位—石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位均有較好的體外抗真菌作用,其中石油醚部位和乙酸乙酯部位作用強于其他兩個部位。43個實驗真菌中,鉤吻醇提物的石油醚部位對28個真菌達到100%抑制,MIC500.156 μ g/ml,MIC90=20 μ g/ml;鉤吻醇提物的乙酸乙酯部位對27個真菌100%抑制,MIC500.156 μ g/ml,MIC90=40 μ g/ml;鉤吻醇提物的正丁醇部位對24個真菌100%抑制,MIC50=0.625 μg/ml,MIC90=10μg/ml;鉤吻醇提物的水部位對18個真菌100%抑制,MIC500.00156μg/ml,MIC90=40μg/ml。6.對于紅色毛癬菌,鉤吻醇提物及各萃取部位均有很強的體外抗真菌作用,鉤吻醇提物的乙酸乙酯部位的體外抗真菌作用最好;對于酵母菌,鉤吻醇提物及各萃取部位均有很強的體外抗真菌作用,鉤吻醇提物的石油醚和乙酸乙酯部位體外抗真菌作用最強;對于須癬毛癬菌,鉤吻醇提物及各萃取部位均有很強的體外抗真菌作用,其中石油醚部位和乙酸乙酯部位體外抗真菌作用最強;對于犬小孢子菌,鉤吻醇提物及各萃取部位對其有很強的體外抗真菌作用,其中鉤吻醇提物的石油醚部位體外抗真菌效果最好;對于絮狀表皮真菌,鉤吻醇提物及各萃取部位均有很強的體外抗真菌作用,其中鉤吻醇提物的石油醚部位體外抗真菌效果最好;對于白色念珠菌,鉤吻醇提物及各萃取部位均沒有100%體外抗真菌抑制作用。7.與萘替芬相比,鉤吻醇提物及其各萃取部位對于須癬毛癬菌和白色念珠菌表現(xiàn)出比陽性對照藥物萘替芬更好的體外抗真菌作用。與氟康唑相比,鉤吻醇提物及其各萃取部位對于紅色毛癬菌、酵母菌、須癬毛癬菌、念珠菌表現(xiàn)出比陽性對照藥物氟康唑更好的體外抗真菌作用。8.鉤吻醇提物的正丁醇部位對酵母菌14號、43號存在一個特別的濃度區(qū)間2.5-80 μ g/ml。9.鉤吻醇提物、鉤吻醇提物的乙酸乙酯部位、鉤吻醇提物的正丁醇部位和鉤吻醇提物的水部位對曲霉菌的體外抗真菌作用不明顯。鉤吻醇提物石油醚部位對曲霉菌存在明確的體外抗真菌作用,MIC50=4800μg/ml,MIC90=9600μg/ml。鉤吻醇提物的石油醚部位體外抗曲霉菌作用明顯弱于對照藥物伊曲康唑MIC90=4μg/ml。結論鉤吻醇提物及各萃取組分,都有很強的體外抗淺部真菌作用。而鉤吻醇提物及其萃取部位的體外抗曲霉菌的MIC50和MIC90值過大,療效明顯弱于現(xiàn)有的臨床使用的藥物,沒有臨床應用前景。同時鉤吻生物堿對于酵母菌有一個特殊的濃度區(qū)間無法抑制酵母菌的生長,這值得我們進一步研究。
【學位授予單位】:福建中醫(yī)藥大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R284

【參考文獻】

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1 王琳;孫琳;劉慧穎;孟繁浩;;鉤吻的化學成分研究[J];中草藥;2017年10期

2 肖灑;伍勇;黃亞軍;孫志良;劉兆穎;;不同溶劑提取的鉤吻粗提物中成分含量的測定[J];動物醫(yī)學進展;2016年06期

3 馮時茵;栗建明;侯惠嬋;黃海波;;鉤吻生物堿成分的薄層色譜研究[J];中藥新藥與臨床藥理;2013年01期

4 俞昌喜;許盈;蘇燕評;劉浩;邱宏強;楊漸;劉銘;沈潔;黃志毅;鄭宓;;鉤吻生物堿鉤吻素子的提純及其抗神經(jīng)病理性疼痛的作用[J];中國藥理學與毒理學雜志;2012年03期

5 張秋萍;張彬鋒;O垂鸚,

本文編號:2612952


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