【摘要】：目的本研究目的在于探討鉤吻提取物的體外抗真菌作用,同時(shí)探究鉤吻提取物體外抗真菌的明確部位。方法將鉤吻粉末用超純水和95%乙醇提取得鉤吻水提取和乙醇提取粉末;乙醇提取物分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到相應(yīng)部位的粉末;用HPLC法以鉤吻素甲、胡蔓藤堿丙、鉤吻素子、鉤吻素己、鉤吻綠堿、常綠鉤吻堿和胡蔓藤堿乙七個(gè)標(biāo)品,檢測(cè)鉤吻醇提物及各萃取組分生物堿含量;采用微量液基稀釋法檢測(cè)鉤吻提取物及各萃取組分對(duì)臨床收集到的43個(gè)人類淺部感染真菌和中國(guó)科學(xué)院皮膚病研究所購(gòu)買的紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、犬小孢子菌、絮狀表皮癬、白念珠菌等5種標(biāo)準(zhǔn)株的體外抗真菌活性;采用瓊脂稀釋法檢測(cè)鉤吻醇提物及其萃取組分對(duì)曲霉菌的體外抗真菌活性。結(jié)果1.鉤吻水提物凍干粉重量為10.532g,得率為10.5%;鉤吻醇提物的凍干粉重量為4.752g,得率為4.8%。鉤吻醇提物萃取后,石油醚部位0.566g,得率為11.8%;乙酸乙酯部位1.885g,得率為39.7%;正丁醇部位1.583g,得率為33.3%;水部位0.563g,得率為11.8%,乙酸乙酯部位得率最高。2.鉤吻醇提物的正丁醇部位中七種指標(biāo)性生物堿:鉤吻素甲、胡蔓藤堿丙、鉤吻素子、鉤吻素己、鉤吻綠堿、常綠鉤吻堿和胡蔓藤堿乙的含量最高。3.43個(gè)實(shí)驗(yàn)真菌的鑒定結(jié)果如下:紅色毛癬菌18個(gè),酵母菌12個(gè),須毛癬菌13個(gè)。4.鉤吻醇提物的體外抗真菌效果明顯強(qiáng)于鉤吻水提物。43個(gè)實(shí)驗(yàn)真菌中,鉤吻水提物對(duì)21個(gè)真菌100%抑制,鉤吻水提物的MIC501.56 μ g/ml,MIC90=12.50 μ g/ml;鉤吻醇提物對(duì)37個(gè)真菌100%抑制,鉤吻醇提物的MIC501.56 μ g/ml,MIC90=6.25μg/ml。5.鉤吻醇提物的各萃取部位—石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位均有較好的體外抗真菌作用,其中石油醚部位和乙酸乙酯部位作用強(qiáng)于其他兩個(gè)部位。43個(gè)實(shí)驗(yàn)真菌中,鉤吻醇提物的石油醚部位對(duì)28個(gè)真菌達(dá)到100%抑制,MIC500.156 μ g/ml,MIC90=20 μ g/ml;鉤吻醇提物的乙酸乙酯部位對(duì)27個(gè)真菌100%抑制,MIC500.156 μ g/ml,MIC90=40 μ g/ml;鉤吻醇提物的正丁醇部位對(duì)24個(gè)真菌100%抑制,MIC50=0.625 μg/ml,MIC90=10μg/ml;鉤吻醇提物的水部位對(duì)18個(gè)真菌100%抑制,MIC500.00156μg/ml,MIC90=40μg/ml。6.對(duì)于紅色毛癬菌,鉤吻醇提物及各萃取部位均有很強(qiáng)的體外抗真菌作用,鉤吻醇提物的乙酸乙酯部位的體外抗真菌作用最好;對(duì)于酵母菌,鉤吻醇提物及各萃取部位均有很強(qiáng)的體外抗真菌作用,鉤吻醇提物的石油醚和乙酸乙酯部位體外抗真菌作用最強(qiáng);對(duì)于須癬毛癬菌,鉤吻醇提物及各萃取部位均有很強(qiáng)的體外抗真菌作用,其中石油醚部位和乙酸乙酯部位體外抗真菌作用最強(qiáng);對(duì)于犬小孢子菌,鉤吻醇提物及各萃取部位對(duì)其有很強(qiáng)的體外抗真菌作用,其中鉤吻醇提物的石油醚部位體外抗真菌效果最好;對(duì)于絮狀表皮真菌,鉤吻醇提物及各萃取部位均有很強(qiáng)的體外抗真菌作用,其中鉤吻醇提物的石油醚部位體外抗真菌效果最好;對(duì)于白色念珠菌,鉤吻醇提物及各萃取部位均沒(méi)有100%體外抗真菌抑制作用。7.與萘替芬相比,鉤吻醇提物及其各萃取部位對(duì)于須癬毛癬菌和白色念珠菌表現(xiàn)出比陽(yáng)性對(duì)照藥物萘替芬更好的體外抗真菌作用。與氟康唑相比,鉤吻醇提物及其各萃取部位對(duì)于紅色毛癬菌、酵母菌、須癬毛癬菌、念珠菌表現(xiàn)出比陽(yáng)性對(duì)照藥物氟康唑更好的體外抗真菌作用。8.鉤吻醇提物的正丁醇部位對(duì)酵母菌14號(hào)、43號(hào)存在一個(gè)特別的濃度區(qū)間2.5-80 μ g/ml。9.鉤吻醇提物、鉤吻醇提物的乙酸乙酯部位、鉤吻醇提物的正丁醇部位和鉤吻醇提物的水部位對(duì)曲霉菌的體外抗真菌作用不明顯。鉤吻醇提物石油醚部位對(duì)曲霉菌存在明確的體外抗真菌作用,MIC50=4800μg/ml,MIC90=9600μg/ml。鉤吻醇提物的石油醚部位體外抗曲霉菌作用明顯弱于對(duì)照藥物伊曲康唑MIC90=4μg/ml。結(jié)論鉤吻醇提物及各萃取組分,都有很強(qiáng)的體外抗淺部真菌作用。而鉤吻醇提物及其萃取部位的體外抗曲霉菌的MIC50和MIC90值過(guò)大,療效明顯弱于現(xiàn)有的臨床使用的藥物,沒(méi)有臨床應(yīng)用前景。同時(shí)鉤吻生物堿對(duì)于酵母菌有一個(gè)特殊的濃度區(qū)間無(wú)法抑制酵母菌的生長(zhǎng),這值得我們進(jìn)一步研究。
【學(xué)位授予單位】：福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R284

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2612952