【摘要】：隨著畜牧業(yè)的迅速發(fā)展,氧化應激隨之成為規(guī)模化養(yǎng)殖中普遍存在的問題之一。氧化應激給動物機體及畜牧業(yè)帶來的危害越來越不容小覷。這使多種抗氧化劑的開發(fā)和研究應運而生。樺木酸(betulinic acid,BA)是一種從白樺樹上萃取出來的五環(huán)三萜類化合物,具有多種生物活性,如抗腫瘤、抗癌、抗氧化應激、免疫調(diào)節(jié)、抗病毒以及抗炎等,而BA在腸道氧化應激方面鮮見報道。本研究通過動物體內(nèi)實驗,環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide,Cy)誘導小鼠腸道黏膜損傷模型,探討B(tài)A對小鼠腸道黏膜損傷的保護作用及其機制,為建立緩解腸道黏膜損傷的新方法提供理論依據(jù)和探索新的途徑,為畜禽免疫增強劑,抗氧化劑,畜禽健康養(yǎng)殖等提供理論依據(jù)。目的:1)闡明BA對腸黏膜的保護作用與抗氧化應激的相關性;2)闡釋BA對腸黏膜損傷中的作用及其調(diào)控機理,為BA的深入研究和科學應用提供理論依據(jù)。方法:將50只健康雄性KM小鼠隨機分為5組,即空白對照組、Cy組、BA低、中、高劑量(0.05、0.5、5.0 mg/kg)+Cy組。對照組和Cy組灌服1%的可溶性淀粉,三個劑量組分別灌服混懸于1%可溶性淀粉中不同劑量的BA,1/d,連續(xù)14d。第15、16 d,對照組除外,其余4組均腹腔注射Cy(50 mg/kg bw)誘導腸黏膜損傷模型,對照組腹腔注射等積體生理鹽水,1/d。16 h后,收集血清,處死小鼠,淋巴器官、肝臟和腸。檢測回腸黏膜中免疫球蛋白SIgA和血清中23種細胞因子水平;組織切片觀察腸絨毛變化;檢測肝臟和小腸的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力以及谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;實時熒光定量RT-PCR檢測腸黏膜緊密連接相關蛋白封閉蛋白(Occludin)、緊密連接蛋白(zonula occludens-1,ZO-1)和密封蛋白(Claudin-1)基因表達以及腸道中整合素(ανβ6)基因的表達量。結果:1)BA預處理后,緩解了Cy引起小鼠腸黏膜SIgA分泌下降;降低了腸黏膜GSH水平,以及腸道、血清和肝臟中MDA含量及SOD活力,保護了Cy對腸絨毛形態(tài)的損壞。2)BA降低了血清中AST、ALT和UREA活性,和IL-5、IL-12(p70)、IL-17、TNF-α、IL-10等細胞因子的分泌。3)BA能提高小鼠腸黏膜細胞緊密連接相關蛋白Occludin、ZO-1和Claudin基因表達以及小鼠腸中整合素(ανβ6)基因的表達量,保護腸黏膜屏障。結論:BA對Cy誘導腸黏膜損傷具有保護作用。這種保護作用與增強腸道抗氧化能力,提高腸黏膜免疫力,增強腸黏膜上皮細胞間緊密連接蛋白的表達有關。
【圖文】：

（9） 讀板：在450 nm波長讀取各孔的OD值。2.1.6 數(shù)據(jù)分析與處理采用 SPSS17.0 統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進行分析與處理，確定P<0.05時差異具有統(tǒng)計學意義，比較組間均數(shù)，采用單因素方差分析，采用t檢驗兩兩比較，結果以x±s表示。2.2 結果與分析2.2.1 BA 對 Cy 致小鼠臟器指數(shù)、抗氧化和免疫球蛋白 SIgA 的影響2.2.1.1 BA 對 Cy 致小鼠器官指數(shù)的影響B(tài)A連續(xù)灌胃14 d，小鼠表現(xiàn)未見異常反應，也無死亡現(xiàn)象，表明BA對小鼠并無顯著毒性。由圖2-1、2-2可知，與正常對照組相比，Cy組小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、肝臟指數(shù)極顯著降低（P<0.01）。與Cy組相比，BA低中劑量組脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)有所增加，但差異不顯著（P>0.05），，肝臟指數(shù)以BA中劑量組顯著性升高（P<0.05）。A B

圖2-2 BA對Cy致小鼠肝臟指數(shù)的影響( ± s，n =5)Effect of BA on the liver index induced by Cy in mice ( 鼠血清和腸道氧化還原系統(tǒng)和抗氧化酶的影響、2-5可知，與正常對照組相比，Cy組血清中MDASH水平變化無明顯影響；小腸組織中MDA含量升變化，但GSH含量顯著上升（P<0.05）。與Cy組比含量呈下降趨勢，而SOD和GSH水平無明顯變化（BBA對Cy致血清（A）和小腸（B）中MDA的影響 ( ± sxxx
【學位授予單位】：湖南農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

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本文編號：2612729