【摘要】：目的:研究不同產(chǎn)地三葉崖爬藤(Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg)的遺傳變異、所含主要的化學(xué)成分的含量、體外抗氧化活性,以及抗炎鎮(zhèn)痛、抗肝損傷作用,優(yōu)選出種質(zhì)優(yōu)良的三葉崖爬藤產(chǎn)地,從而進(jìn)行林下種植,緩解對(duì)三葉崖爬藤的需求。方法:1.使用改良的CTAB法進(jìn)行三葉崖爬藤葉中基因組DNA提取,采用ISSR分子標(biāo)記技術(shù),建立ISSR-PCR反應(yīng)體系,對(duì)16個(gè)不同產(chǎn)地三葉崖爬藤進(jìn)行遺傳多樣性分析。2.通過(guò)測(cè)定三葉崖爬藤新鮮根、莖、葉和干燥后質(zhì)量恒重時(shí)的質(zhì)量,測(cè)定失水率;采用紫外分光光度法、高效液相色譜法分別測(cè)定三葉崖爬藤中總黃酮、總皂苷、總酚、多糖以及山奈酚、槲皮素、異槲皮苷7個(gè)指標(biāo)行成分的含量。3.采用響應(yīng)曲面分析法對(duì)三葉崖爬藤抗氧化提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,在最佳提取工藝條件下進(jìn)行提取,采用ABTS法、DPPH法測(cè)定不同產(chǎn)地三葉崖爬藤的抗氧化能力。4.采用二甲苯致小鼠耳腫脹、醋酸扭體和CCl4致小鼠肝損傷藥理模型,分別進(jìn)行三葉崖爬藤抗炎、鎮(zhèn)痛和抗肝損傷作用。結(jié)果:1.16個(gè)不同產(chǎn)地三葉崖爬藤具有較大的遺傳差異,可分為A、B、C三類,A類包括S1福建順昌、S2福建邵武、S4福建松溪、S5福建三元、S6福建漳平、S7福建連城、S8福建大田、S12福建沙縣、S14浙江樂(lè)清、S15浙江臨安;B類包括S3福建建陽(yáng)、S9福建永安、S10福建泰寧、S11福建尤溪、S13福建永春;C類包括S16浙江開(kāi)化。2.失水率方面,S2福建邵武根的失水率最低為62.01%,S8福建大田產(chǎn)三葉崖爬藤莖的失水率最低為66.84%,S7號(hào)福建連城葉的失水率最低為80.70%。總黃酮、總皂苷、總酚、多糖以及山奈酚、槲皮素、異槲皮苷含量方面。分部位考慮,S12福建沙縣產(chǎn)三葉崖爬藤莖中總黃酮、山奈酚含量均最高,分別為113.07 mg·g-1、7830.61 μg·g-1;S8福建大田產(chǎn)三葉崖爬藤莖中總皂苷、總酚含量均最高,分別為114.17 mg·g-1 22.36 mg·g-1;S5福建三元產(chǎn)三葉崖爬藤根中多糖含量最高為96.35 mg·g-1;S11福建尤溪產(chǎn)三葉崖爬藤葉中槲皮素、異槲皮苷含量均最高,分別為803.60 μg·g-1、9188.72 μg·g-1。從全株考慮,S12福建沙縣產(chǎn)三葉崖爬藤中總黃酮、總皂苷、總酚含量均最高,分別為66.97 mg·g-1、49.28mg·g-1、15.16 mg·g-1;S5福建三元產(chǎn)三葉崖爬藤中多糖含量最高為52.48 mg·g-1;S13福建永春產(chǎn)三葉崖爬藤中山奈酚含量最高為5197.23 μg·g-1;S11福建尤溪產(chǎn)三葉崖爬藤中槲皮素、異槲皮苷含量均最高,分別為317.52 μg·g-1、3105.86μg·g-1。3.響應(yīng)曲面法優(yōu)化得到最佳提取工藝為:提取時(shí)間40 min,液料比26:1,乙醇濃度50%,提取溫度50℃。在此工藝條件下進(jìn)行16不同產(chǎn)地三葉崖爬藤不同部位提取,發(fā)現(xiàn)S5福建三元、S8福建大田、S9福建永安、S12福建沙縣產(chǎn)三葉崖爬藤清除DPPH和ABTS自由基能力強(qiáng)于12個(gè)產(chǎn)地的三葉崖爬藤。4.不同產(chǎn)地三葉崖爬藤均具有抗炎鎮(zhèn)痛作用,但存在明顯差異,其中福建三元產(chǎn)三葉崖爬藤抗炎鎮(zhèn)痛作用優(yōu)于福建尤溪、福建順昌產(chǎn)三葉崖爬藤。福建三元產(chǎn)三葉崖爬藤多糖具有抗肝損傷作用。結(jié)論:16個(gè)不同產(chǎn)地三葉崖爬藤具有遺傳差異性,通過(guò)化學(xué)成分含量測(cè)定、抗氧化及抗炎鎮(zhèn)痛作用研究,優(yōu)選出S5福建三元、S12福建沙縣產(chǎn)三葉崖爬藤為最佳。
【圖文】：

邐福建中醫(yī)藥大學(xué)碩士學(xué)位論文邐逡逑邐表１－３邋１３條ＩＳＳＲ引物擴(kuò)增條帶數(shù)和多態(tài)性比率邐逡逑擴(kuò)增條邐多態(tài)性邐多態(tài)性邐擴(kuò)增條邐多態(tài)性邐多態(tài)性逡逑引物名稱邐引物名稱逡逑帶數(shù)邐條帶數(shù)比率％邐帶數(shù)邐條帶數(shù)邐比率％逡逑ＵＢＣ８０８邐６邐６邐１００邐ＵＢＣ８３６邐１４邐１３邐９２．８６逡逑ＵＢＣ８０９邐１２邐１１邐９１．６７邐ＵＢＣ８４７邐８邐７邐８７．５逡逑ＵＢＣ８１０邐１２邐１２邐１００邐ＵＢＣ８６４邐８邐８邐１００逡逑ＵＢＣ８１１邐１０邐１０邐１００邐ＵＢＣ８８８邐７邐７邐１００逡逑ＵＢＣ８１６邐１１邐１０邐９０．９１邐ＵＢＣ８８９邐１０邐９邐９０逡逑ＵＢＣ８１９邐８邐８邐１００邐ＵＢＣ８９１邐９邐８邐８８．８９逡逑ＵＢＣ８２６邐９邐８邐８８．８９逡逑

邐福建中醫(yī)藥大學(xué)碩士學(xué)位論文邐逡逑邐表１－３邋１３條ＩＳＳＲ引物擴(kuò)增條帶數(shù)和多態(tài)性比率邐逡逑擴(kuò)增條邐多態(tài)性邐多態(tài)性邐擴(kuò)增條邐多態(tài)性邐多態(tài)性逡逑引物名稱邐引物名稱逡逑帶數(shù)邐條帶數(shù)比率％邐帶數(shù)邐條帶數(shù)邐比率％逡逑ＵＢＣ８０８邐６邐６邐１００邐ＵＢＣ８３６邐１４邐１３邐９２．８６逡逑ＵＢＣ８０９邐１２邐１１邐９１．６７邐ＵＢＣ８４７邐８邐７邐８７．５逡逑ＵＢＣ８１０邐１２邐１２邐１００邐ＵＢＣ８６４邐８邐８邐１００逡逑ＵＢＣ８１１邐１０邐１０邐１００邐ＵＢＣ８８８邐７邐７邐１００逡逑ＵＢＣ８１６邐１１邐１０邐９０．９１邐ＵＢＣ８８９邐１０邐９邐９０逡逑ＵＢＣ８１９邐８邐８邐１００邐ＵＢＣ８９１邐９邐８邐８８．８９逡逑ＵＢＣ８２６邐９邐８邐８８．８９逡逑
【學(xué)位授予單位】：福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R284;R285.5

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本文編號(hào)：2608550