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補(bǔ)肝健腰方對大鼠腰椎間盤退變組織TGF-β1、bFGF表達(dá)的影響的實驗研究

發(fā)布時間:2020-03-30 09:55
【摘要】:目的:基于TGF-β1、bFGF的表達(dá)探討補(bǔ)肝健腰方對大鼠腰椎間盤退變的防治機(jī)制。方法:從80只3-4月齡清潔級健康SD雄性大鼠中隨機(jī)抽取54只采用腰椎纖維環(huán)全層穿刺法,制備腰椎間盤退變模型,造模成功后按照體質(zhì)量順序隨機(jī)分為:補(bǔ)肝健腰低劑量組、補(bǔ)肝健腰中劑量組、補(bǔ)肝健腰高劑量組、模型組,每組12只,分別給予補(bǔ)肝健腰低劑量(含生藥1.04g)、補(bǔ)肝健腰方中劑量(含生藥2.08g),補(bǔ)肝健腰高劑量(含生藥4.16g)、生理鹽水喂養(yǎng)。余下24只,正常對照組、假手術(shù)組各12只,正常對照組不予處理,假手術(shù)組僅暴露椎間盤,不行腰椎間盤穿刺,均予生理鹽水喂養(yǎng)。各組分別于給藥后2周、4周、6周時間點各處死4只大鼠。取L4/5、L5/6椎間盤退變節(jié)段組織,用HE染色后,使用200倍光學(xué)顯微鏡對椎間盤組織進(jìn)形組織形態(tài)學(xué)觀察,免疫組織化學(xué)(IHC)法檢測L4/5椎間盤組織中的TGF-β1的含量。采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測L5/6椎間盤組織中的bFGF mRNA含量的表達(dá)。結(jié)果:1.造模后的大鼠腰椎間盤組織鏡下觀察在藥物干預(yù)前呈現(xiàn)增生、退變形態(tài)學(xué)改變,藥物干預(yù)后造模大鼠腰椎間盤組織得到修復(fù)改善;2.造模后大鼠腰椎間盤組織中的TGF-β1、bFGF的含量表達(dá)上升,使用藥物干預(yù)后大鼠腰椎間盤組織中的TGF-β1、bFGF的含量表達(dá)顯著下降,說明中藥補(bǔ)肝健腰方能下調(diào)腰椎間盤退變組織中bFGF mRNA及TGF-β1的表達(dá),能促進(jìn)退變椎間盤的修復(fù),其中高中劑量中藥湯劑在此作用上無明顯差異,但顯然都要強(qiáng)于低劑量組的中藥湯劑。結(jié)論:1.通過針刺大鼠腰椎間盤可成功制作成腰椎間退變模型。2.腰椎間盤退變與TGF-β1、bFGF存在相關(guān)性。3.補(bǔ)肝健腰方有促使bFGF及TGF-β1表達(dá)下調(diào)的作用,能促進(jìn)退變椎間盤的修復(fù),高、中劑量補(bǔ)肝健腰方組對退變腰椎間盤組織TGF-β1、bFGF表達(dá)下調(diào)的作用較低劑量組明顯,有顯著性差異。
【圖文】:

低劑量,纖維環(huán),髓核,排列規(guī)則


胞、軟骨細(xì)胞排列連續(xù)規(guī)整,未見明顯炎性細(xì)胞浸潤。模型組、中藥組均存在髓核細(xì)胞的減少、纖維環(huán)破裂、紊亂、扭曲,伴隨明顯炎性細(xì)胞浸潤,纖維環(huán)-髓核交錯混雜,界限模糊不清。詳見圖1圖 1 各組大鼠實驗干預(yù)前 HE 染色圖( a:正常對照組;b 假手術(shù)組;c:模型對照組;d:高劑量組;e:中劑量組;f:低劑量組,,HEx200)(2)干預(yù) 2 周后鏡下觀察正常對照組,假手術(shù)組中髓核細(xì)胞多且排列規(guī)則,無明顯炎性細(xì)胞浸潤及

低劑量,結(jié)構(gòu)完整,軟骨,無明


圖 2 各組大鼠實驗干預(yù) 2 周后 HE 染色圖( ( a:正常對照組;b 假手術(shù)組;c:模型照組;d:高劑量組;e:中劑量組;f:低劑量組,HEx200)(3)干預(yù) 4 周后鏡下觀察正常對照組及假手術(shù)組中軟骨及髓核細(xì)胞排仍列有序,結(jié)構(gòu)完整,無明
【學(xué)位授予單位】:湖南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:R285.5

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本文編號:2607390

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