【摘要】：目的:探討姜黃素對(duì)哮喘大鼠氣道上皮杯狀細(xì)胞化生及黏蛋白MUC5AC表達(dá)的干預(yù)效果。方法:24只雌性清潔級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、哮喘模型組、地塞米松組和姜黃素組,每組6只。采用卵蛋白和氫氧化鋁混懸液致敏激發(fā)大鼠建立哮喘模型,陰性對(duì)照組以生理鹽水代替卵蛋白,通過(guò)蘇木精-伊紅(HE)染色、高碘酸-無(wú)色品紅法(PAS)染色觀察大鼠肺組織的病理學(xué)改變及氣道上皮杯狀細(xì)胞的數(shù)量,采用ELISA法測(cè)定大鼠肺泡灌洗液中MUC5AC和IL-13的含量,免疫組織化學(xué)法檢測(cè)大鼠氣道上皮中MUC5AC黏蛋白的表達(dá)情況,采用Western blot方法檢測(cè)大鼠肺組織中EGFR和FoxA2蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:與陰性對(duì)照組相比,哮喘模型組大鼠氣道粘膜明顯增厚,周?chē)g質(zhì)可見(jiàn)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),氣道上皮杯狀細(xì)胞數(shù)量明顯增多,部分管腔內(nèi)可見(jiàn)黏液栓。與哮喘模型組相比,姜黃素組和地塞米松組大鼠氣道炎癥改變明顯減輕,杯狀細(xì)胞數(shù)量明顯降低。哮喘模型組大鼠肺泡灌洗液中嗜酸性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞比例明顯高于陰性對(duì)照組、姜黃素組和地塞米松組(P0.05),ELISA結(jié)果顯示,哮喘模型組大鼠肺泡灌洗液中的MUC5AC和IL-13含量明顯高于陰性對(duì)照組、姜黃素組和地塞米松組(P0.05)。免疫組織化學(xué)法顯示,與陰性對(duì)照組相比,哮喘模型組大鼠肺組織MUC5AC的表達(dá)顯著增加(P0.05),姜黃素組和地塞米松組大鼠肺組織MUC5AC的表達(dá)較哮喘模型組均明顯減少(P0.05)。Western blot結(jié)果顯示,與陰性對(duì)照組相比,哮喘模型組大鼠肺組織EGFR表達(dá)明顯增加,Fox A2表達(dá)明顯減少(P0.05),與哮喘組相比,姜黃素組大鼠肺組織EGFR表達(dá)顯著降低,Fox A2表達(dá)增加(P0.05),地塞米松組大鼠肺組織EGFR表達(dá)明顯降低(P0.05),但FoxA2的表達(dá)與哮喘模型組相比,無(wú)顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:姜黃素可以明顯抑制哮喘大鼠氣道上皮杯狀細(xì)胞的化生,降低氣道黏蛋白MUC5AC的表達(dá),其抑制哮喘大鼠氣道黏液高分泌的作用機(jī)制可能是通過(guò)下調(diào)氣道上皮IL-13和EGFR的表達(dá),同時(shí)上調(diào)FoxA2的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
【圖文】：

躲避霧化，毛發(fā)豎起等表現(xiàn)；姜黃素組和地塞米松組大鼠同樣出現(xiàn)避霧化、毛發(fā)豎起情況，但呼吸頻率、噴嚏次數(shù)均較哮喘模型組大鼠少；以生鹽水霧化的陰性對(duì)照組大鼠表現(xiàn)活波，毛發(fā)光澤，未出現(xiàn)噴嚏、呼吸急促、躲霧化等現(xiàn)象。3.2 氣道組織病理學(xué)改變（1）蘇木精－伊紅（HE）染色選取各組大鼠肺組織切片中直徑相近的支氣管腔作為觀察對(duì)象，高倍鏡（4×）觀察 HE 染色切片可見(jiàn)：陰性對(duì)照組大鼠氣道黏膜上皮整齊，管腔規(guī)則，黏膜下及血管壁周?chē)鸁o(wú)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；哮喘模型組大鼠氣道黏膜及血管壁周?chē)写罅垦仔约?xì)胞浸潤(rùn)，以嗜酸性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞為主，氣道壁及平滑肌增厚，膜上皮皺褶增多，管腔狹窄，部分管腔可見(jiàn)黏液栓堵塞；姜黃素組和地塞米松大鼠氣道病理學(xué)改變均明顯輕于哮喘模型組。（圖 1）A B

管腔規(guī)則，黏膜下及血管壁周?chē)鸁o(wú)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；哮喘模型組（B）大鼠氣道黏膜及管壁周?chē)允人嵝粤＜?xì)胞和淋巴細(xì)胞為主的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，氣道平滑肌增厚，黏膜皺褶增多管腔狹窄；地塞米松組（C）和姜黃素組（D）大鼠氣道病理學(xué)改變均明顯輕于哮喘模型組（2）高碘酸-無(wú)色品紅法（PAS）染色選取各組大鼠肺組織切片中直徑相近的支氣管腔作為觀察對(duì)象，高倍鏡（400×）觀察 PAS 染色切片可見(jiàn)：陰性對(duì)照組氣道黏膜纖毛柱狀上皮細(xì)胞間極少見(jiàn)杯狀細(xì)胞；哮喘模型組氣道杯狀細(xì)胞數(shù)量顯著增多，纖毛脫落，正常的纖上皮細(xì)胞減少，部分管壁上皮細(xì)胞幾乎全為杯狀細(xì)胞；姜黃素組和地塞米松組壁可見(jiàn)少量的杯狀細(xì)胞，氣道上皮較完整，，杯狀細(xì)胞數(shù)量較哮喘模型組明顯減少（圖 2）A B
【學(xué)位授予單位】：湖北醫(yī)藥學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R285.5

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本文編號(hào)：2603132