發(fā)布時間：2020-03-27 13:47

【摘要】：目的:探討天然中藥小分子化合物姜黃素(Curcumin)對神經(jīng)膠質(zhì)瘤的增殖、遷移、侵襲和凋亡的影響,并進一步探討其調(diào)節(jié)機制。方法:體外培養(yǎng)試驗中,以人膠質(zhì)母細胞瘤U251細胞株為研究對象,觀察不同濃度姜黃素處理對U251細胞增殖、遷移、侵襲和凋亡的影響。采用MTT法檢測不同濃度姜黃素在24 h、48 h和72 h對U251細胞增殖的作用;通過劃痕實驗檢測不同濃度下姜黃素對神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細胞遷移能力的影響;Transwell方法檢測姜黃素對U251細胞侵襲能力的調(diào)節(jié);Annexin V-FITC染色法檢測不同濃度姜黃素對U251細胞凋亡的作用;以Western blotting檢測姜黃素刺激后對增殖相關(guān)蛋白Akt/PTEN表達的影響;檢測姜黃素刺激后對凋亡相關(guān)蛋白NF-κB、p53和Caspase-3表達影響;檢測姜黃素刺激后對侵襲相關(guān)蛋白CD133和Drp1表達影響。在體內(nèi)實驗中,構(gòu)建裸鼠皮下成瘤模型,檢測姜黃素對皮下移植瘤生長的影響;瘤體組織采用HE染色并進行病理學(xué)特征分析。結(jié)果:與對照組相比,姜黃素濃度達到10μM以上時,對U251細胞增殖具有抑制作用;并能顯著性抑制U251的遷移與侵襲能力和顯著性促進U251細胞凋亡;與對照組相比,姜黃素抑制p-Akt、NF-κB、CD133和p-Drp1蛋白表達、促進PTEN、p53和Caspase-3蛋白表達;與對照組相比,姜黃素對裸鼠移植瘤生長有顯著性抑制作用;與對照組相比,姜黃素組移植瘤壞死明顯。結(jié)論:姜黃素抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤的增殖作用與下調(diào)p-Akt蛋白、上調(diào)PTEN蛋白表達有關(guān)。神經(jīng)膠質(zhì)瘤的遷移、侵襲能力降低與姜黃素下調(diào)黏附分子CD133和p-Drp1蛋白表達有關(guān);而促進膠質(zhì)瘤凋亡與姜黃素上調(diào)p53、caspase-3蛋白和下調(diào)NF-κB表達有關(guān)。
【圖文】：

1 姜黃素抑制 U251 細胞增殖腫瘤細胞增殖是影響腫瘤生長的條件之一。我們檢測姜黃素對U251細胞增殖的抑制影響。如圖1A所示，在姜黃素刺激24 h的條件下，對照組細胞生長狀態(tài)良好，細胞未發(fā)現(xiàn)皺縮；當姜黃素濃度達到10 μM時，視野下細胞數(shù)目明顯少于對照組，較少細胞出現(xiàn)皺縮；當姜黃素濃度達到20 μM時，細胞間隙增加，部分細胞出現(xiàn)皺縮；當姜黃素濃度達到40 μM時，大量細胞皺縮，并與周圍的細胞脫離；前期藥理實驗顯示

姜黃素對 U251 細胞增殖能力影響的顯微圖（100X）；B 姜黃素處理對膠質(zhì)瘤細胞增殖能力影響的數(shù)據(jù)統(tǒng)計圖，與對照組比較，*p＜0.05，**p＜0.01，n=3。2 姜黃素抑制 U251 細胞遷移腫瘤細胞遷移是腫瘤侵襲性的重要表現(xiàn)之一。在不同濃度的姜黃素刺激后，，U251 細胞遷移能力進行比較，遷移結(jié)果如圖 2A 所示。與對照組相比，姜黃素組 U251 細胞遷移能力呈下降趨勢。在 10 μM 姜黃素刺激下，細胞遷移能力顯著性降低至 76.5%；在 20 μM 姜黃素刺激下，細胞遷移能力顯著性降至 37.6%，結(jié)果如圖 2B。說明姜黃素能有效抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤的細胞遷移能力。
【學(xué)位授予單位】：湖北科技學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285

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本文編號：2603044