【摘要】：目的:以枸杞血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)化學(xué)合成多肽為受試物,對自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)進行灌胃實驗,探討枸杞ACE化學(xué)合成多肽對SHR的降壓效果,觀察枸杞ACE化學(xué)合成多肽對腎素血管緊張素系統(tǒng)(RAS)的影響及其可能的降壓機制,為防治高血壓病提供理論依據(jù)。方法:選用SPF級SHR大鼠30只,分成5個實驗組:模型對照組、陽性對照組(10 mg/kg卡托普利)、枸杞ACE化學(xué)合成多肽低劑量組(5 mg/kg)、中劑量組(10 mg/kg)、高劑量組(20 mg/kg);另以Wistar-Kyoto(WKY)大鼠6只為正常對照組。正常對照組和模型對照組給予相應(yīng)劑量的生理鹽水。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后開始一次性給藥及連續(xù)灌胃8 w長期給藥,實驗期間大鼠自由飲食飲水,每周定時在灌胃后2 h測量大鼠收縮壓(SBP)和舒張壓(DBP),實驗結(jié)束后腹腔動脈采血并采集心臟和腎臟、下丘腦、垂體組織。采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血漿和腎臟組織中血管緊張素1-7(Ang-(1-7))、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)、ACE、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2(ACE2)水平。采用實時熒光定量PCR(RT-qPCR)方法測量心臟、腎臟、下丘腦、垂體組織中ACE、ACE2、血管緊張素Ⅱ1型受體(AT1-R)和Mas受體(Mas-R)mRNA表達水平。采用蛋白印跡法(western-blot)檢測心臟和腎臟組織中ACE、ACE2、AT1-R和Mas-R蛋白表達水平。結(jié)果:1.大鼠體重和血壓值:與WKY組相比,SHR大鼠的體重均顯著降低(p0.05);與模型對照組相比,枸杞ACE化學(xué)合成多肽干預(yù)中、高劑量組SHR體重增量顯著降低(p0.05)。與WKY組相比,SHR大鼠的SBP與DBP均顯著升高(p0.05);與模型對照組相比較,第6、8w陽性對照組、低、中、高劑量組SHR大鼠DBP明顯降低(p0.05);實驗期間隨著灌胃時間的延長SBP有降低趨勢。2.大鼠血漿和腎臟組織RAS系統(tǒng)相關(guān)酶含量的變化:與WKY組相比,SHR大鼠血漿和腎臟組織中血漿AngII和ACE濃度均顯著升高,Ang-(1-7)濃度均顯著降低(p0.05);與模型對照組相比,枸杞ACE化學(xué)合成多肽干預(yù)組可以顯著降低血漿和腎臟中的ACE濃度(p0.05),升高ACE2濃度。3.大鼠心臟和腎臟RAS系統(tǒng)相關(guān)因子表達的變化:與WKY大鼠比較,SHR大鼠心臟和腎臟組織中ACE與AT1-R mRNA表達水平均顯著上調(diào)(p0.05),ACE2與Mas-R mRNA表達水平均顯著下調(diào)(p0.05);而與模型對照組相比,枸杞ACE化學(xué)合成多肽干預(yù)組SHR腎臟組織中ACE mRNA表達水平顯著下調(diào)(p0.05),心臟和腎臟組織中AT1-R mRNA表達水平顯著下調(diào)(p0.05)。ACE2 mRNA在心臟和腎臟組織中表達水平均顯著上調(diào)(p0.05),Mas-R mRNA表達有不同程度的升高(p0.05)。相關(guān)蛋白的表達具有一致性,與WKY大鼠相比,SHR大鼠心臟和腎臟組織中ACE與AT1-R蛋白表達水平均顯著增高(p0.05),ACE2蛋白表達水平顯著降低(p0.05);而與模型對照組相比,枸杞ACE化學(xué)合成多肽干預(yù)組SHR大鼠心臟和腎臟組織中ACE與AT1-R蛋白表達水平均顯著降低(p0.05),中、高劑量組ACE2蛋白表達水平均顯著增高(p0.05),Mas-R蛋白表達水平差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。4.大鼠下丘腦和垂體RAS系統(tǒng)相關(guān)因子表達的變化:與WKY大鼠相比,模型對照組SHR大鼠下丘腦和垂體組織中ACE與AT1-R mRNA表達水平均顯著上調(diào)(p0.05),ACE2與Mas-R mRNA表達水平均顯著下調(diào)(p0.05);而與模型對照組相比,枸杞ACE化學(xué)合成多肽干預(yù)組SHR大鼠下丘腦組織中ACE與AT1-R mRNA表達水平均顯著下調(diào)(p0.05)。中劑量組ACE2 mRNA在下丘腦和垂體組織中表達水平均顯著上調(diào)(p0.05),Mas-R mRNA有不同程度上調(diào)趨勢(p0.05)。結(jié)論:枸杞ACE化學(xué)合成多肽可以有效降低SHR大鼠的血壓,其可能通過ACE-AngII-AT1-R和ACE2-Ang-(1-7)-Mas-R通路的平衡發(fā)揮降壓作用。
【圖文】：

圖 1 枸杞 ACE 化學(xué)合成多肽一次給藥對大鼠尾動脈收縮壓的影響杞 ACE 化學(xué)合成多肽長期給藥對 SHR 和 WKY 大鼠血壓的影響枸杞 ACE 化學(xué)合成多肽長期給藥對 SHR 和 WKY 大鼠尾動脈收縮壓的影響經(jīng)重復(fù)測量方差分析表明：因素“時間”F＝3.28，，P＝0.014<0.05，說明 0 w、6 w、8 w 時的大鼠 SBP 差異有統(tǒng)計學(xué)意義；因素“分組”F＝60.09，P＝0.000<不同組間大鼠 SBP 差異有統(tǒng)計學(xué)意義；時間與分組兩因素有交互作用（F＝1033<0.05）；與 WKY 組相比，SHR 陽性對照組、模型對照組、低、中、高劑 SBP 均顯著升高（p<0.05）；與模型對照組相比，陽性對照組大鼠 SBP 顯著0.05），低、中、高劑量組相比于模型對照組有降低趨勢，差異不具有統(tǒng)計學(xué)意分析結(jié)果顯示，陽性對照組和低劑量組的 SBP 具有較平穩(wěn)的下降趨勢。0 w、6 w、8 w 時各組之間進行單因素方差分析結(jié)果表明：在第 0 周至第 8 周，S照組、模型對照組、低、中、高劑量組大鼠 SBP 均高于 WKY 組（p<0.05）；

表 2 枸杞 ACE 化學(xué)合成多肽長期給藥對大鼠尾動脈收縮壓的影響（ ± ，mmHg）組別時間（周）Total (m0 w 2 w 4 w 6 w 8 w常對照組 137.17±5.79 145.67±4.63 134.50±12.00 131.72±12.22 129.84±9.39 135.78±性對照組 177.55±6.31* 174.83±8.04* 166.11±14.31*#176.05±7.93* 163.28±8.37*#171.57±2型對照組 173.83±10.55* 181.00±2.72* 181.83±3.10* 179.08±1.93* 180.83±4.66* 179.32±劑量組 177.56±8.81* 171.67±6.42*#173.22±6.90* 173.78±8.03* 171.33±5.41* 173.51±劑量組 180.17±9.10* 177.75±5.16* 174.72±11.47* 175.22±5.18* 172.11±7.61* 176.00±劑量組 178.78±8.60* 174.67±9.27* 180.00±9.47* 180.06±4.81* 175.50±6.58* 177.80±*P<0.05 vs 正常對照組；#P<0.05 vs 模型對照組。
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5

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本文編號：2601984