【摘要】：鹽酸小檗堿(BH)是從天然植物中提取的、治療腸道感染的植物抗菌素,價廉易得,相對安全,近年研究發(fā)現(xiàn)了它作為老藥的新用途--降血糖。Ⅱ型糖尿病(T2D)是糖、蛋白質(zhì)、電解質(zhì)等一系列代謝紊亂綜合征。T2D及相關(guān)并發(fā)癥對健康造成危害,嚴重影響患者的生活質(zhì)量。BH降血糖作用安全有效,但仍存在引發(fā)高氯酸血癥、生物利用度低、刺激腸胃等副作用,限制了它在臨床上的應(yīng)用�；谝陨蠁栴},本課題篩選出具有保健功能、對人體無害的有機酸,對BH進行轉(zhuǎn)化,獲得了四種小檗堿有機酸鹽(Berberine organic acid salt,BOAs):枸櫞酸小檗堿(Berberine citrate,BC)、蘋果酸小檗堿(Berberine malate,BM)、琥珀酸小檗堿(Berberine succinate,BS)、富馬酸小檗堿(Berberine fumarate,BF)。并對其安全性,生物利用度進行了評價,同時運用生化、病理、免疫組化、分子生物等檢測手段對其降糖作用機制進行了研究,主要結(jié)果如下:1.BOAs的安全性評價以高脂高糖飼養(yǎng)和腹腔注射30mg/kg STZ建立T2D模型。500mg/kg·d灌胃6周,BH和BOAs組大鼠的體重、TC、TG、FBG、FINS、HOMA-IR均維持在正常水平(P0.01)。BH組Na~+、K~+、Cl~-、HCO_3~-、pH、PCO_2和BE水平與正常大鼠有顯著性差異(P0.05),而BOAs組則無差異。結(jié)果表明,BOAs與BH的降糖作用相當,但BOAs在安全性方面更勝一籌。2.BOAs的體內(nèi)藥代動力學(xué)及生物有效性評價口服生物利用度較低,大大限制了小檗堿作為降糖劑的臨床應(yīng)用。故我們對BOAs進行體內(nèi)藥代動力學(xué)研究,對其生物有效性進行評價,并運用活體成像系統(tǒng)觀察其組織分布情況,分析其在T2D大鼠體內(nèi)代謝行為。各組于500mg/kg灌胃0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、12、24h后,檢測血藥濃度。0.01 mol/LSDS作為增敏劑,進行活體成像,最后取臟器成像觀察。與BH組相比,BOAs組的C_(max)均升高(BF組顯著),AUC_(0-∞)均顯著增大(p0.05),Cl/F均顯著降低(p0.05);BF、BM、BS、BC的相對生物利用度分別是BH的1.278、1.243、1.3137、1.1931倍。BH或BF口服1h后主要分布在胃部,4h后經(jīng)小腸、盲腸、直腸排出體外;組織成像發(fā)現(xiàn)藥物在肝、腎、肺部均有積累,大量分布于腸道,而胃和心臟未觀察到熒光。結(jié)果表明與BH相比,BOAs的生物利用度有所提高。3.BOAs的降糖機制研究T2D與腸道微生物和全身慢性炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。因此,我們采用蛋白組學(xué),基因測序等技術(shù),展開了BOAs對T2D大鼠腸道菌群和TLR4/JNK/PI3K通路的作用研究。結(jié)果顯示,T2D組大鼠糖、脂代謝紊亂,腸道菌群失調(diào),產(chǎn)丁酸細菌和有益菌豐度下降,條件致病菌、還原硫酸鹽菌、組織炎癥增加。而BF能夠顯著改善代謝紊亂,促進腸道擬桿菌門、梭菌綱、普氏菌、擬普雷沃菌的增值,抑制擬桿菌目、毛螺菌科、理研菌科、脫硫弧菌的增值(p0.05)。通過對菌群的調(diào)節(jié)改善系統(tǒng)炎癥,抑制TLR4和p-JNK的表達(p0.05),促進PI3K和GLUT2的表達(p0.05),加快葡萄糖的代謝,從而發(fā)揮對T2D大鼠的降糖作用。
【圖文】：

檗堿是一種常見的異喹啉類生物堿，結(jié)構(gòu)式如圖 2.1 所示。作為治療抗菌素廣為人知。早在 1926 年，日本學(xué)者就曾報道關(guān)于黃連素的提取國內(nèi)或國外對小檗堿的有機酸鹽的研究非常少，多以鹽酸小檗堿為研，枸櫞酸小檗堿被用作注射劑用于臨床[46]，后因出現(xiàn)嚴重不良反應(yīng)禁用 B-黃連素對Ⅱ型糖尿病大鼠的腎臟具有保護作用[47]。有研究顯示，的脂肪族有機酸鹽，口服吸收良好，可用于制備藥用組合物。小檗堿著提高該類生物堿的生物利用度，對細菌感染、心律失常、血小板聚病、高血壓、心力衰竭、腫瘤及 HIV 等疾病的治療能夠起到更好的2 所示，核磁共振碳譜圖顯示了鹽酸小檗堿和 4 種有機酸小檗堿中碳R（100MHz） ：177.64，171.73，71.44，43.32（枸櫞酸結(jié)構(gòu)上的碳）； 69.93，29.47（蘋果酸結(jié)構(gòu)上的碳）； ：177.68，29.46（琥珀酸結(jié)構(gòu)97，134.79（富馬酸結(jié)構(gòu)上的碳），如圖 2.1 所示。

圖 3.1 鹽酸小檗堿（BH）有機酸小檗堿（BOAs）對Ⅱ型糖尿病大鼠體重的影ig. 3.1 Effects of berberine hydrochloride (BH) and berberine organic acid salts (BOAs) ht of type 2 diabetes (T2D) rats. The data were expressed as mean ±SD (n = 6), ap < 0.00.01 vs NC group, at the same time of administration2 鹽酸小檗堿和有機酸小檗堿對血清 TG、TC、FBG、FINS 和 HO的影響予 6 周處理后，與 NC 組相比，T2D 大鼠血清中 TG、TC、FBG 和 HO顯著升高（p＜0.05），而 BH 和 BOAs 組的大鼠血清中的這些指標顯著5）；T2D 大鼠血清中 FINS 水平顯著降低（p＜0.05），BH 組和 BOAs 組的 FINS 水平顯著升高（p＜0.05）。另外，，BH 組與 BOAs 組大鼠的這些顯差異（p＞0.05）（圖 3.2）。這些結(jié)果說明，經(jīng)過 6 周的給藥處理，鹽機酸小檗堿均能良好地控制Ⅱ型糖尿病大鼠的病情。
【學(xué)位授予單位】：浙江農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285

【參考文獻】

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本文編號：2598984