【摘要】：細(xì)菌耐藥性隨著養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展而發(fā)展,養(yǎng)蛇行業(yè)也不例外。近年來,我們臨床接診蛇病例分離獲得的耐藥細(xì)菌表現(xiàn)日益增多,增加了臨床防治的難度,蛇源性細(xì)菌的耐藥情況鮮見資料報(bào)道。本課題以探究蛇源性細(xì)菌耐藥情況,以及中藥提取物對蛇源性細(xì)菌耐藥基因影響為目的,開展了以下研究。從2016-2017年臨床接診的敗血癥蛇病例中,挑選分離獲得的23株細(xì)菌,采用檢測表型特征的常規(guī)方法結(jié)合現(xiàn)代分子生物學(xué)PCR方法,對23株細(xì)菌分別進(jìn)行了鑒定。鑒定結(jié)果顯示,23株細(xì)菌分別歸屬于7種細(xì)菌,其中肺炎克雷伯菌5株,腸道沙門氏菌2株,鮑曼不動桿菌3株,枸櫞酸桿菌1株,摩氏摩根菌1株,普羅威登斯菌3株,糞腸球菌8株。采用紙片法進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn),試驗(yàn)結(jié)果表明,5株肺炎克雷伯菌、8株糞腸球菌對慶大霉素和鏈霉素耐藥,2株腸道沙門氏菌對紅霉素和泰樂菌素耐藥,3株鮑曼不動桿菌、3株普羅威登斯菌、枸櫞酸桿菌以及摩氏摩根菌對青霉素和頭孢拉啶耐藥。根據(jù)細(xì)菌的耐藥情況,分別設(shè)計(jì)氨基糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶基因aac(3)-Ⅱ、質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因A型qnrA、二氫葉酸合成酶基因1型SUL1、甲基化酶基因B型erm(B)、廣譜β-內(nèi)酰胺酶基因三個(gè)亞型:CTX-M-type、CTX-M-1 以及 blaOXA-23-like、新德里金屬-β-內(nèi)酰胺酶-4基因NDM4等8種耐藥基因的引物,運(yùn)用PCR方法檢測相應(yīng)的耐藥基因。研究發(fā)現(xiàn),5株肺炎克雷伯菌中有3株檢測出aac(3)-Ⅱ耐氨基糖苷類藥物的目的基因,8株糞腸球菌中有2株檢測出erm(B)耐大環(huán)內(nèi)酯類藥物的目的基因,2株腸道沙門氏菌中有1株檢測出SUL1耐磺胺類藥物的目的基因,其余細(xì)菌均未能檢測到耐藥基因。將5種中藥提取物,硫酸黃連素、雙花連翹提取物、黃芩苷、天蠶素、苦參提取物分別與檢測到耐藥基因的細(xì)菌共培養(yǎng)4h和24h,檢測發(fā)現(xiàn),3株肺炎克雷伯菌aac(3)-Ⅱ耐氨基糖苷類藥物目的基因均未能檢出,2株糞腸球菌erm(B)耐大環(huán)內(nèi)酯類藥物的目的基因均未能檢出,而1株腸道沙門氏菌與中藥提取物共培養(yǎng)結(jié)果無變化,其SUL1耐磺胺類藥物的目的基因仍然可以檢測出來。綜合上述研究結(jié)果可以得出以下結(jié)論:(1)23株蛇源性細(xì)菌分屬于7種不同的細(xì)菌。(2)7種23株細(xì)菌的耐藥情況不同。有3株肺炎克雷伯菌檢測出aac(3)-Ⅱ目的基因,2株糞腸球菌檢測出erm(B)目的基因,1株腸道沙門氏菌檢測出SUL1目的基因,其余細(xì)菌未能檢測到耐藥基因。(3)硫酸黃連素、雙花連翹提取物、黃芩苷、天蠶素、苦參提取物對肺炎克雷伯菌aac(3)-Ⅱ耐藥基因以及糞腸球菌erm(B)耐藥基因在24h內(nèi)有抑制作用。
【圖文】：

＿一：ａｒ、、、、、、、組陰性對照、Ｇｌ、Ｇ２、Ｇ３、Ｆ組陰性對照、Ｆｌ、Ｆ２、Ｆ３、Ｆ４、Ｆ５、Ｆ６、Ｆ７、Ｆ８？，第二排從逡逑左到右依次為：Ｍａｒｋ、Ｂ組ｑｎｒＡ基因陰性對照、Ｂｌ、Ｂ２、Ｂ組ＳＵＬ１基因陰性對照、Ｂ１、逡逑Ｂ２、Ｃ組陰性對照、Ｃｌ、Ｃ２、Ｃ３、Ｄ組陰性對照、Ｄｌ、Ｅ組陰性對照、Ｅ１邋（該圖中的Ｍａｒｋｅｒ逡逑為邋ＤＭ２０００）邋0逡逑
【學(xué)位授予單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285

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1 李文舒;龔書s，

本文編號：2596956