發(fā)布時(shí)間：2020-03-23 05:40

【摘要】：[目的]觀察養(yǎng)精膠囊提取液(Yangjing capsule extract,YCE)對(duì)小鼠支持細(xì)胞(Sertoli cells)生殖,以及YCE對(duì)其中的Occludin、VEGF和其受體、NO及其合酶的影響。[方法]將小鼠Sertoli細(xì)胞系TM4作為實(shí)驗(yàn)的目標(biāo),培養(yǎng)細(xì)胞至70%豐度時(shí),加入相應(yīng)濃度的YCE繼續(xù)孵育12小時(shí)后,使用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性。在TM4細(xì)胞生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期消化收集細(xì)胞,調(diào)整濃度,加入6孔板每孔約8萬細(xì)胞,加入不同濃度的YCE,繼續(xù)孵育24小時(shí)后,直接去上清液測(cè)定其中NO的含量,收集細(xì)胞,提取其中的mRNA或蛋白,分別使用qPCR以及Western-Blot來分析其中 Occludin、VEGFA、FLT 和 FLK、eNOS(NOS3)中的表達(dá)情況。[結(jié)果]YCE作用于TM4細(xì)胞12 h后,發(fā)現(xiàn)TM4細(xì)胞的增殖能力與對(duì)照組相比顯著提高,可以增強(qiáng)其活性。YCE作用TM4細(xì)胞24小時(shí)后,發(fā)現(xiàn)VEGFA的mRNA和蛋白與對(duì)照組之間對(duì)比沒有明顯差異(P0.05);而YCE對(duì)Occludin、VEGFA、FLK等因子在各劑量組與對(duì)照組相比在mRNA和蛋白的表達(dá)都有顯著提高(P0.05);YCE對(duì)FLT和eNOS作用時(shí)與對(duì)照組相比,低劑量組沒有顯著差異,中、高劑量組差異顯著(P0.05)。[結(jié)論]YCE能夠提高TM4細(xì)胞增殖能力,YCE可以增加TM4細(xì)胞中的和NO含量、Occludin、VEGF受體、NO合酶中的mRNA和蛋白表達(dá)量,而且之間存在著劑量依賴性。說明養(yǎng)精膠囊可以通過改善TM4細(xì)胞增殖能力,增強(qiáng)生精環(huán)境的穩(wěn)定,增加VEGF和NO含量增加睪丸局部微循環(huán),增強(qiáng)局部代謝能力,改善睪丸生精環(huán)境。
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2596281