【摘要】：組分中藥CXWS是中醫(yī)辨證理論指導下,結合現(xiàn)代藥理學研究方法,經過組方配伍篩選研究、提取工藝研究和制劑工藝研究而制成的組分中藥新藥。本方由柴胡、白芍、枳殼、香附、延胡索和甘草六味中藥有效部位提取物組成,用于治療氣滯型胃脘痛。本研究針對功能主治對該組分中藥開展了功能性消化不良的藥效學研究,基于指紋圖譜技術建立柴胡提取物、白芍提取物、延胡索提取物及甘草提取物企業(yè)內控標準,開展組分中藥制劑的指紋圖譜研究,并對指紋圖譜的共有峰進行了歸屬性研究。1.CXWS對功能性消化不良治療作用的研究。通過采用夾尾激怒法和慢性應激法(斷食,斷水)相結合的方式誘導功能性消化不良大鼠模型,進行胃排空和小腸推進實驗,統(tǒng)計胃排空率和小腸推進率。隨后腹主動脈取血離心分離血清,根據(jù)試劑盒說明書測定血清胃腸激素相關指標。結果顯示:與模型組相比,CXWS劑量組雌雄FD大鼠的胃排空率和小腸推進率均顯著升高,血清中大鼠胃促生長素(Ghrelin)、胃動素(motilin,MTL)水平顯著升高,血管活性腸肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)水平顯著降低,與空白組相比,CXWS劑量組雌雄FD大鼠的各項指標無顯著差異。綜上,CXWS可有效改善雌雄FD大鼠胃腸運動功能,調節(jié)胃腸激素分泌水平,CXWS治療功能性消化不良藥效明確。2.CXWS中中藥提取物指紋圖譜研究。采用高效液相色譜法,通過對洗脫程序、色譜柱、波長、柱溫、流速等的考察確立色譜條件,通過對提取溶劑種類、濃度、用量、提取方法、提取時間等的考察確立供試品溶液處理方法,進而建立CXWS涉及的中藥提取物指紋圖譜。結果表明:柴胡提取物指紋圖譜,標定12個共有峰,10批次柴胡提取物相似度在0.922~0.959之間;白芍提取物指紋圖譜,標定9個共有峰,10批次白芍提取物相似度在0.997~1.000之間;延胡索提取物指紋圖譜,標定10個共有峰,10批次延胡索提取物相似度在0.930~0.980之間;甘草提取物指紋圖譜,標定10個共有峰,10批次甘草提取物相似度在0.924~0.969之間。以上結果表明,研究中所建立的柴胡提取物、白芍提取物、延胡索提取物、甘草提取物指紋圖譜,相似度良好,方法可靠,可作為CXWS各中藥提取物的企業(yè)內控標準。3.CXWS指紋圖譜建立及共有峰歸屬分析。采用高效液相色譜法,建立CXWS指紋圖譜,并明確其共有峰歸屬。結果表明:CXWS指紋圖譜,共標定22個共有峰,10批次CXWS相似度在0.985~0.996之間,色譜行為良好,通過與對照品、提取物以及陰性樣品的對照分析,確認8、16、18、19、20、21號峰來源于柴胡提取物,5、6、12號峰來源于白芍提取物,11、12號峰來源于延胡索提取物,1、2、4、7、10、13、14、15、17號峰來源于甘草提取物,3號峰來源于柴胡和白芍提取物,9號峰來源于柴胡和甘草提取物。以上研究結果表明,本研究建立的指紋圖譜特征性強、相似度良好,CXWS化學成分,完善了CXWS質量控制體系。
【圖文】：

采用 Thermo C18(250 mm × 4.6 mm，5 μm，serial number：10572673) 色譜柱，流動相為 A 乙腈-B 0.05%磷酸水溶液，按表 2-1 進行梯度洗脫，檢測波長 210 nm，柱溫 20℃流速 0.8 mL/min，進樣量 10 μL。表 2-1 梯度洗脫程序表Tab.2-1 Gradient elution program時間（min） 流動相 A（%） 流動相 B（%）0 10 9015 15 8535 21 7958 26 74110 50 502.1.2.4 對照試驗吸取參照物柴胡皂苷 a 和柴胡皂苷 d 對照品溶液各 10 μL 依次注入高效液相色譜儀，，記錄色譜圖，見圖 2-1，2-2。

圖 2-2 柴胡皂苷 dFig.2-2 Saikosaponin D2.1.2.5 空白試驗以 70%甲醇溶液為空白溶劑，吸取 10 μL 注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，見圖 2-3空白溶劑色譜圖表明提取溶劑無干擾。
【學位授予單位】：吉林農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5

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