本文關(guān)鍵詞：Ghrelin對(duì)放燒復(fù)合傷動(dòng)物的救治作用及其相關(guān)機(jī)制研究

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【摘要】：放射復(fù)合傷常見(jiàn)于核戰(zhàn)爭(zhēng)、核事故等事件中，對(duì)人員的生命構(gòu)成極大的威脅，尤其是放燒復(fù)合傷(combined radiation-burn injury, CRBI)。放燒復(fù)合傷是指同時(shí)或相繼受到以放射損傷為主，復(fù)合燒傷的一類(lèi)復(fù)合傷，放燒復(fù)合傷傷情比單一傷更加復(fù)雜而難以控制。當(dāng)生物體遭受該類(lèi)損傷后，其病理進(jìn)程主要經(jīng)歷以下幾個(gè)階段：休克和急性應(yīng)激，造血功能障礙，免疫抑制為主的免疫功能紊亂，感染，急性炎性反應(yīng)，燒傷創(chuàng)面的延遲愈合或不愈合。其中，造血功能障礙、免疫抑制和全身急性炎性反應(yīng)是導(dǎo)致死亡的重要原因。目前關(guān)于放燒復(fù)合傷的治療還主要停留在對(duì)癥治療而非對(duì)因治療階段，如輸血、骨髓移植、抗生素抗感染、血液凈化治療、植皮等。但這些治療都面臨著不同的問(wèn)題，如代價(jià)高昂、副作用大、風(fēng)險(xiǎn)高等。 本所前期研究顯示頸交感神經(jīng)阻滯(cervical sympathetic block, CSB)可顯著提高放燒復(fù)合傷動(dòng)物的存活率，機(jī)制可能與降低了造血抑制程度，下調(diào)急性炎性反應(yīng)及促進(jìn)創(chuàng)面的愈合等有關(guān)。CSB技術(shù)在臨床上已廣為使用，主要用于治療慢性疼痛，但由于某些原因使其受阻于臨床創(chuàng)傷或燒傷的治療。Ghrelin是一種內(nèi)源性腦腸肽，在哺乳動(dòng)物中含28個(gè)氨基酸殘基，主要由胃底部X/A樣細(xì)胞分泌。Ghrelin還有多種生理作用，主要促進(jìn)生長(zhǎng)激素(growth hormone, GH)分泌而調(diào)節(jié)機(jī)體能量代謝，還可調(diào)節(jié)免疫功能等。有研究顯示Ghrelin還可主要通過(guò)影響植物神經(jīng)系統(tǒng)的興奮性而對(duì)放射合并內(nèi)毒素?fù)p傷動(dòng)物具有一定的救治作用。首先其作用機(jī)制與CSB有類(lèi)似之處(主要抑制交感神經(jīng)活性)，其次Ghrelin在臨床相關(guān)疾病的治療中已體現(xiàn)出一定的治療效應(yīng)，相較于CSB具有給藥更方便及毒副作用更小等優(yōu)點(diǎn)，因此為了探究Ghrelin是否對(duì)放燒復(fù)合傷動(dòng)物也有一定救治作用并發(fā)展新型放燒復(fù)合傷治療藥物，著手了本研究。 本研究首先建立了放燒復(fù)合傷(重度)的致傷模型，該方法可概括為：動(dòng)物接受5Gy劑量的γ射線照射，隨后在2小時(shí)內(nèi)利用溴鎢燈于動(dòng)物背部進(jìn)行15%全身體表面積(totalbody surface area, TBSA)的三度熱力燒傷。隨后在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了如下幾個(gè)層次的研究：①與CSB比較對(duì)放燒復(fù)合傷的救治效果。實(shí)驗(yàn)分組為“正常對(duì)照組，復(fù)合傷組，，CSB治療組，Ghrelin治療組，CSB和Ghrelin的聯(lián)合治療組”，主要涉及到“外周血象、體重變化、創(chuàng)面愈合情況和存活率”4個(gè)方面的評(píng)價(jià)；②Ghrelin發(fā)揮救治作用的可能機(jī)制研究。實(shí)驗(yàn)分組為“正常對(duì)照組，正常并Ghrelin處理組，復(fù)合傷組和Ghrelin治療組”，主要涉及到“造血、炎性反應(yīng)控制、神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)和器官保護(hù)”等方面的評(píng)價(jià)；③體外實(shí)驗(yàn)研究，主要研究對(duì)巨噬細(xì)胞、造血干細(xì)胞(hematopoietic stem cell, HSC)部分生物學(xué)功能的影響。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中：血象檢測(cè)主要觀察白細(xì)胞(WBC)和血小板(PLT)在傷后某些時(shí)相點(diǎn)的改變情況；創(chuàng)面愈合情況及死亡率觀察持續(xù)時(shí)間為30天；促炎介質(zhì)TNF-α或IL-6(存在于血清或細(xì)胞培養(yǎng)上清中的)主要通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzymelinked immunosorbent assay, ELISA)進(jìn)行檢測(cè)；神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)方面主要觀察血清中的各種神經(jīng)遞質(zhì)或激素的變化水平，如乙酰膽堿(acetyl choline，Ach)、兒茶酚胺和皮質(zhì)醇(cortisol, Cor)等；在器官保護(hù)作用研究方面主要采取蘇木素-伊紅染色(haematoxylin andeosin stain, H.E)、免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry, IHC)的方法進(jìn)行評(píng)價(jià)；細(xì)胞水平上，嘗試建立了細(xì)胞的“放燒復(fù)合傷模型”，并檢測(cè)了Ghrelin對(duì)巨噬細(xì)胞在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激下的存活率及其相關(guān)分泌功能的影響；同時(shí)又通過(guò)免疫磁珠分選的方法提取小鼠骨髓造血干細(xì)胞，探討了Ghrelin對(duì)其增殖活性的影響。最終獲得的主要結(jié)果和結(jié)論整理歸納如下： 1. Ghrelin和CSB均能顯著提高放燒復(fù)合傷動(dòng)物的存活率約30%(與復(fù)合傷組比較P0.05)。但是兩者聯(lián)合治療的存活率與復(fù)合傷組比較并無(wú)顯著差異(P0.05)；血象方面，兩者對(duì)放燒復(fù)合傷動(dòng)物的外周血象如WBC和PLT有相似的提升效果(在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)與復(fù)合傷組比較，P0.05)，主要是在傷后的第7天和第14天。但是兩者的聯(lián)合治療并未觀察到顯著的造血保護(hù)效果(與復(fù)合傷組比較P0.05)；最后在創(chuàng)面愈合和體重改變方面各組之間的差異也并不明顯。 2.在對(duì)植物神經(jīng)系統(tǒng)的影響研究中，考慮到下丘腦是Ghrelin的受體GHS-R1a分布的主要部位之一，這兩者的結(jié)合可影響植物神經(jīng)系統(tǒng)的興奮性，因此檢測(cè)了下丘腦弓狀核內(nèi)GHS-R1a的表達(dá)情況，結(jié)果顯示：與復(fù)合傷組比較，Ghrelin可顯著提高GHS-R1a在此區(qū)域的表達(dá)水平；另外通過(guò)測(cè)定應(yīng)激相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)或激素的血清含量，發(fā)現(xiàn)Ghrelin可顯著降低復(fù)合傷動(dòng)物血清中腎上腺素、5-羥色胺、乙酰膽堿和皮質(zhì)醇的分泌水平(與復(fù)合傷組比較，P0.05)。說(shuō)明Ghrelin可調(diào)節(jié)植物神經(jīng)系統(tǒng)的興奮性(主要抑制交感神經(jīng))和抑制HPA軸的過(guò)度激活。 3. Ghrelin可降低復(fù)合傷動(dòng)物血清中炎性介質(zhì)如TNF-α和IL-6的分泌(與復(fù)合傷組比較，P0.05)；另體外研究也發(fā)現(xiàn)，Ghrelin雖對(duì)LPS處理下巨噬細(xì)胞的存活率和NO、NOS(NO合成酶)的分泌無(wú)顯著影響(與LPS處理組比較, P0.05)，但可明顯抑制巨噬細(xì)胞炎性介質(zhì)TNF-α的分泌(與LPS處理組比較P0.05)。說(shuō)明Ghrelin對(duì)放燒復(fù)合傷所致的急性炎性反應(yīng)也有一定的調(diào)控作用。 4. Ghrelin可顯著提高放燒復(fù)合傷動(dòng)物傷后第10天骨髓中的有核細(xì)胞計(jì)數(shù)(與復(fù)合傷組比較，P0.05)；再通過(guò)相關(guān)組織病理學(xué)研究也發(fā)現(xiàn)Ghrelin防止了復(fù)合傷動(dòng)物骨髓中造血細(xì)胞的急劇減少；但體外研究證實(shí)Ghrelin對(duì)HSC的增殖功能并無(wú)顯著影響，因此其造血保護(hù)作用有可能是通過(guò)其他途徑實(shí)現(xiàn)的。 綜上，通過(guò)建立放燒復(fù)合傷模型，比較Ghrelin與CSB對(duì)放燒復(fù)合傷的救治效果及后續(xù)的機(jī)制研究，發(fā)現(xiàn)Ghrelin對(duì)放燒復(fù)合傷動(dòng)物存在一定的救治作用，其機(jī)制可能是：調(diào)節(jié)植物神經(jīng)系統(tǒng)興奮性，減弱早期急性應(yīng)激反應(yīng)，控制炎性反應(yīng)和減輕造血抑制程度。
【關(guān)鍵詞】：放燒復(fù)合傷 CSB Ghrelin 救治作用 機(jī)制研究
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R826.5
【目錄】：

• 縮略語(yǔ)表5-7
• 英文摘要7-11
• 中文摘要11-14
• 第一章 前言14-18
• 1.1 選題緣由14
• 1.2 研究背景14-17
• 1.3 研究意義17
• 1.4 研究?jī)?nèi)容17
• 1.5 研究方法17-18
• 第二章 Ghrelin 和 CSB 對(duì)重度放燒復(fù)合傷大鼠的救治作用比較18-30
• 2.1 材料與方法18-22
• 2.2 結(jié)果22-25
• 2.3 討論25-28
• 2.4 小結(jié)28-30
• 第三章 Ghrelin 對(duì)放燒復(fù)合傷大鼠的救治機(jī)制研究30-52
• 3.1 材料與方法30-39
• 3.2 結(jié)果39-47
• 3.3 討論47-50
• 3.4 小結(jié)50-52
• 第四章 Ghrelin 對(duì)巨噬細(xì)胞和造血干細(xì)胞的部分生物學(xué)效應(yīng)52-64
• 4.1 材料與方法52-58
• 4.2 結(jié)果58-61
• 4.3 討論61-63
• 4.4 小結(jié)63-64
• 全文總結(jié)64-66
• 參考文獻(xiàn)66-69
• 文獻(xiàn)綜述 NF-κB 信號(hào)通路與燒傷炎癥控制69-93
• 參考文獻(xiàn)86-93
• 碩士在讀期間發(fā)表論文情況93-94
• 致謝94

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 鐘河江,楊天德,粟永萍;JAB1、LPS對(duì)糖皮質(zhì)激素受體轉(zhuǎn)錄激活活性的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2004年11期

2 鐘河江,楊天德,粟永萍;嚴(yán)重?zé)齻缙谛∈蟾骨痪奘杉?xì)胞糖皮質(zhì)激素受體變化及安定-氯胺酮對(duì)其影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2004年11期

3 鐘河江;楊天德;粟永萍;;安定-氯胺酮對(duì)嚴(yán)重?zé)齻∈蟾骨痪奘杉?xì)胞JAB1蛋白表達(dá)的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2009年15期

4 陸建華,粟永萍,程天民,杜智勇;頸交感神經(jīng)阻滯對(duì)放燒復(fù)合傷小鼠的治療作用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2005年12期

5 陸建華;陶軍;葉建寧;粟永萍;李洪濤;程天民;;頸交感神經(jīng)阻滯對(duì)放燒復(fù)合傷小鼠HPA軸的調(diào)節(jié)及相關(guān)機(jī)制研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年21期

6 陸建華;粟永萍;陶軍;葉建寧;;頸交感神經(jīng)阻滯調(diào)節(jié)放燒復(fù)合傷小鼠巨噬細(xì)胞GR的表達(dá)及細(xì)胞因子分泌的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2007年04期

7 李新;李敏;涂柳;艾國(guó)平;王軍平;王峰超;粟永萍;;頸交感神經(jīng)阻滯對(duì)重度燒傷大鼠肝臟的保護(hù)機(jī)制初探[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2010年17期

本文編號(hào)：959105