本文關(guān)鍵詞：模擬失重條件下硫氧還蛋白1對神經(jīng)母細胞瘤細胞的微絲骨架保護作用研究

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【摘要】：目的研究回轉(zhuǎn)模擬失重條件下硫氧還蛋白1(thioredoxin1,Trx1)對神經(jīng)母細胞瘤細胞SH-SY5Y微絲骨架的保護效應(yīng)及其分子機制。方法轉(zhuǎn)染Trx1入SH-SY5Y細胞,采用回轉(zhuǎn)方法模擬失重,采用免疫熒光化學(xué)方法分析細胞微絲骨架的形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化,采用DCF-DA熒光探針檢測細胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;利用AMS修飾結(jié)合聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測微絲骨架蛋白半胱氨酸殘基的氧化還原狀態(tài);使用超速離心法分離細胞內(nèi)球狀肌動蛋白(global actin,G-actin)單體和纖絲狀肌動蛋白(filamentous actin,F-actin)聚合體,Western blot方法鑒定F-actin及G-actin的水平。結(jié)果回轉(zhuǎn)模擬失重引起SH-SY5Y細胞微絲骨架排列紊亂,呈彌散不規(guī)則分布,Trx1可以保護模擬失重環(huán)境導(dǎo)致的微絲骨架的紊亂;回轉(zhuǎn)引起細胞內(nèi)ROS升高達到對照組2.8倍,而過表達Trx1的細胞回轉(zhuǎn)后ROS的產(chǎn)生僅為對照組的1.7倍;回轉(zhuǎn)模擬失重導(dǎo)致細胞微絲骨架半胱氨酸殘基被氧化,而Trx1可以部分阻止半胱氨酸殘基氧化;回轉(zhuǎn)模擬失重后SH-SY5Y細胞F-actin發(fā)生解聚,G-actin增加,Trx1能夠部分對抗F-actin的解聚,維持F-actin/G-actin比率。結(jié)論 Trx1可能通過降低細胞內(nèi)ROS水平,抑制微絲骨架蛋白半胱氨酸殘基的氧化,對模擬失重狀態(tài)下肌動蛋白的解聚與聚合起到重要的調(diào)控作用。
【作者單位】： 中國航天員科研訓(xùn)練中心 航天醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)與應(yīng)用國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 模擬失重 Trx 微絲骨架 氧化應(yīng)激 氧化還原調(diào)節(jié)
【基金】：留學(xué)回國啟動基金項目
【分類號】：R852.22
【正文快照】： 太空飛行或地面模擬失重均引起機體氧化程度增加,導(dǎo)致氧化應(yīng)激(oxidative stress,OS),嚴重影響航天員健康和安全高效工作。硫氧還蛋白1(thioredoxin1,Trx1)是一種廣泛分布的重要的氧化還原酶,能還原蛋白質(zhì)半胱氨酸殘基,使得巰基和二硫化物之間相互轉(zhuǎn)換[1-2],參與調(diào)控增殖、抗

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本文編號：885335