本文關(guān)鍵詞：模擬微重力對(duì)肺淋巴細(xì)胞功能的影響及作用機(jī)制

  更多相關(guān)文章： 模擬微重力 旋轉(zhuǎn)生物反應(yīng)器 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑 細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶 瘦素

【摘要】：目的:探討模擬微重力對(duì)肺T淋巴細(xì)胞功能的影響及作用機(jī)制。研究模擬微重力條件下,T淋巴細(xì)胞功能異常及與此功能密切相關(guān)的蛋白激酶C(PKC)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑、Ras/MEK/ERK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的變化機(jī)制;研究模擬微重力條件下,瘦素對(duì)T淋巴細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用及兩條轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑變化機(jī)制。 方法:1.分離肺T淋巴細(xì)胞,利用的旋轉(zhuǎn)式細(xì)胞組織培養(yǎng)系統(tǒng)(Rotary Cell Culture System, RCCS,即旋轉(zhuǎn)生物反應(yīng)器)模擬微重力條件,分別在普通細(xì)胞培養(yǎng)容器組和旋轉(zhuǎn)生物反應(yīng)器培養(yǎng)T淋巴細(xì)胞;2.普通細(xì)胞培養(yǎng)容器組設(shè)4組,① 對(duì)照組,② 刀豆素蛋白A(ConA)組,③ 瘦素組,④ ConA+瘦素組;旋轉(zhuǎn)生物反應(yīng)器設(shè)5組,① 對(duì)照組,② ConA組,③ 瘦素組,④ ConA+瘦素組,⑤ ConA+12-肉豆蔻酰-13-乙酸佛波酯(PMA)組;3.采用PepTag非放射性PKC檢測(cè)試劑盒測(cè)定T淋巴細(xì)胞PKC活性;采用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(雙抗體夾心ELISA法)測(cè)定T淋巴細(xì)胞的白介素-2(IL-2)生成;采用免疫組織化學(xué)染色觀察T淋巴細(xì)胞表達(dá)NF-κB、c-fos;采用流式細(xì)胞技術(shù),檢測(cè)T淋巴細(xì)胞表面抗原CD25、CD71的表達(dá);采四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)微量比色法測(cè)定T淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng);蛋白印跡(Western blot)法檢測(cè)T淋巴細(xì)胞磷酸化的ERK和總的ERK蛋白的表達(dá)。 結(jié)果:1.普通細(xì)胞培養(yǎng)容器組培養(yǎng)的T淋巴細(xì)胞,刀豆素蛋白A(ConA)組與對(duì)照組比較,T淋巴細(xì)胞PKC活性增強(qiáng),IL-2生成增加,表面表達(dá)CD25、CD71分子的細(xì)胞增多,NF-κB、c-fos的免疫組化染色陽性細(xì)胞的百分比增加,磷酸化的ERK蛋白量增加,而總的ERK蛋白量的不變,T淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)增加(P0.01);2.模擬微重力條件下,即旋轉(zhuǎn)生物反應(yīng)器培養(yǎng)的T淋巴細(xì)胞,與普通細(xì)胞培養(yǎng)容器培養(yǎng)的T淋巴細(xì)胞相比較,ConA刺激后,PKC活性減低,IL-2生成下降,表面表達(dá)CD25、CD71分子的細(xì)胞減少,NF-κB、c-fos免疫組化染色陽性細(xì)
【關(guān)鍵詞】：模擬微重力 旋轉(zhuǎn)生物反應(yīng)器 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑 細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶 瘦素
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R85
【目錄】：

• 英文縮寫表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-12
• 材料和方法12-22
• 結(jié)果22-46
• 討論46-51
• 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-58
• 文獻(xiàn)綜述一 微重力對(duì)免疫細(xì)胞影響的研究進(jìn)展58-68
• 文獻(xiàn)綜述二 瘦素—調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)代謝和免疫功能的橋梁68-75
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況75-76
• 致謝76-77

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 王長(zhǎng)安,余春P，

本文編號(hào)：689527