本文關(guān)鍵詞：尾懸吊模擬失重對大鼠胃黏膜超微結(jié)構(gòu)和氧化應(yīng)激影響的研究

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【摘要】：背景和目的：近年來我國航天事業(yè)迅猛發(fā)展，加強(qiáng)航天醫(yī)學(xué)研究，為航天事業(yè)服務(wù)有重大的現(xiàn)實(shí)意義。國內(nèi)外的相關(guān)研究表明，失重或模擬失重條件下，機(jī)體各系統(tǒng)處于一種特殊的應(yīng)激狀態(tài)，循環(huán)、呼吸、肌肉骨骼、神經(jīng)等系統(tǒng)均受到影響，導(dǎo)致一系列生理和病理性改變。消化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能龐大而復(fù)雜，這方面的研究比較困難，文獻(xiàn)資料相對較少。本課題研究尾懸吊模擬失重對大鼠胃黏膜組織超微結(jié)構(gòu)和氧化應(yīng)激的影響，探討胃黏膜組織對尾懸吊模擬失重的應(yīng)激反應(yīng)特點(diǎn)，為航天醫(yī)療保障提供理論依據(jù)。 研究方法：第一部分(1)成年Wistar大鼠64只，按模擬失重時相分8組（n=8），分別為6h、12h、1d、2d、3d、5d、7d及0h（對照組），采用尾懸吊法建立模擬失重大鼠模型；(2)各實(shí)驗(yàn)組結(jié)束時，腹腔注射10%水合氯醛（300mg/kg）將動物麻醉，無菌操作，經(jīng)腹正中線剖腹，顯露下腔靜脈抽取血樣本，切取腺胃區(qū)胃黏膜組織兩份，一份超低溫保存于液氮罐中，另一份浸于4%多聚甲醛（pH7.4）中固定，常規(guī)石蠟包埋；(3)應(yīng)用放射免疫分析法檢測大鼠血清GAS含量；(4)應(yīng)用IHC、RT-PCR技術(shù)檢測胃黏膜組織中Hsp70蛋白及Hsp70mRNA表達(dá)。第二部分(1)成年Wistar大鼠88只，按模擬失重時相分11組（n=8），分別為6h、12h、1d、2d、3d、5d、1wk、2wk、3wk、4wk及0h（對照組），采用尾懸吊法建立模擬失重大鼠模型；(2)實(shí)驗(yàn)取材同上，切取腺胃區(qū)胃黏膜組織三份，一份超低溫保存于液氮罐中，另外兩份分別浸于4%戊二醛固定和4%多聚甲醛（pH7.4）中固定；(3) JEM-1230透射電鏡觀察大鼠胃黏膜組織超微結(jié)構(gòu)；(4)應(yīng)用生化比色法測定胃黏膜組織SOD、MDA含量，硝酸還原酶法檢測胃黏膜組織NO含量；(5)應(yīng)用IHC法檢測胃黏膜組織NOS2、COX2表達(dá)。 結(jié)果：(1)失重Wistar大鼠血清GAS在模擬失重早期（6h-12h）明顯升高（P0.05），隨著尾懸吊時相的延長（12h-7d），血清GAS含量呈逐漸下降趨勢。(2) Hsp70免疫組化染色結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)各組大鼠胃黏膜組織中均有Hsp70陽性表達(dá)；懸吊6h-2d各組大鼠胃黏膜組織中著色明顯變深，尤其胞核在模擬失重早期即深染，期間胞漿染色亦增強(qiáng)；懸吊3d-7d組大鼠的胞核染色逐漸變淺，部分胞核中染色消失，但細(xì)胞漿內(nèi)仍有比較明顯的Hsp70染色。RT-PCR結(jié)果顯示，模擬失重6h大鼠胃黏膜組織中Hsp70mRNA表達(dá)水平即明顯上調(diào)（P0.05）。12h、1d、2d各組的Hsp70mRNA表達(dá)逐漸回落，3d組降至接近對照組水平，其后在懸吊5d組時又出現(xiàn)一短時相升高現(xiàn)象。(3)透射電鏡觀察到模擬失重組胃黏膜細(xì)胞染色質(zhì)濃縮邊聚，線粒體腫脹，部分空泡變性，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，上述改變在尾懸吊后期（2wk-4wk）比較明顯；(4)失重Wistar大鼠胃黏膜SOD、MDA、NO含量波動明顯，胃黏膜SOD含量在實(shí)驗(yàn)過程中波動明顯，隨尾懸吊時相的延長而不斷升高；MDA含量在失重應(yīng)激早期（12h）快速上升，隨后下降，3d為低谷，之后又再度升高；NO含量隨尾懸吊時相的延長而增加，且波動較明顯。(5) NOS2、COX2免疫組化染色結(jié)果顯示，懸吊早期（6h-2d）大鼠胃黏膜細(xì)胞的胞漿染色即明顯增強(qiáng)，隨后著色減弱，后期（2wk-4wk）再度深染。 結(jié)論：尾懸吊模擬失重可導(dǎo)致大鼠血清GAS含量波動、胃黏膜組織中Hsp70蛋白及其基因表達(dá)以及NOS2和COX2蛋白表達(dá)明顯改變，伴隨胃黏膜組織超微結(jié)構(gòu)的損傷性改變，提示尾懸吊模擬失重可導(dǎo)致胃黏膜急性應(yīng)激性病變，血清GAS和局部組織中Hsp70以及NOS2/COX2表達(dá)在胃黏膜應(yīng)激反應(yīng)及適應(yīng)恢復(fù)過程中可能發(fā)揮重要作用。
【關(guān)鍵詞】：模擬失重 胃黏膜 超微結(jié)構(gòu) 氧化應(yīng)激損傷
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R85
【目錄】：

• 中英文縮略詞表5-7
• 中文摘要7-9
• Abstract9-12
• 前言12-14
• 第一部分 尾懸吊模擬失重對大鼠血清 GAS 含量和胃黏膜 Hsp70 及其基因表達(dá)的影響14-28
• 引言14
• 材料與方法14-20
• 結(jié)果20-25
• 討論25-28
• 第二部分 尾懸吊模擬失重導(dǎo)致大鼠胃黏膜組織超微結(jié)構(gòu)改變并氧化應(yīng)激損傷28-43
• 引言28
• 材料與方法28-33
• 結(jié)果33-40
• 討論40-43
• 全文結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-47
• 附錄47-51
• 致謝51-52
• 綜述52-66
• 參考文獻(xiàn)61-66

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：645645