發(fā)布時間：2017-07-18 00:04

  本文關(guān)鍵詞：模擬失重對大鼠肺循環(huán)影響及作用機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： 大鼠 模擬失重 肺循環(huán) 作用機(jī)制

【摘要】： 目的: 失重時肺循環(huán)及其調(diào)節(jié)功能可發(fā)生改變。本實(shí)驗(yàn)采用大鼠尾吊法模擬失重,研究模擬失重對大鼠肺循環(huán)的影響并探討其作用機(jī)制。 方法: 1.健康雄性Wistar大鼠168只,分為三組對照組(CON)、尾吊7d組(TS7d)和尾吊14d組(TS14d),每組8～16只。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時,用3%戊巴比妥鈉(1.5ml/kg)腹腔麻醉,分別進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn): ●取大鼠左心室和頸動脈血1ml,檢測血?dú)飧黜?xiàng)指標(biāo);取頸靜脈血1～1.5ml,測定白細(xì)胞(WBC)、中性粒細(xì)胞(N)和血紅蛋白(Hb)。 ●取肺組織,肉眼大體觀察其變化后,進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn):HE染色并用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行肺組織及血管形態(tài)學(xué)學(xué)觀察;用透射電鏡法、免疫組織化學(xué)法檢測Ⅷ因子;用微血管灌注法觀察肺超微結(jié)構(gòu)。 ●接動物呼吸機(jī),進(jìn)行肺動、靜脈插管,檢測肺動、靜脈壓和肺血流量,計(jì)算右心肥厚指數(shù)。 ●進(jìn)行離體大鼠肺循環(huán)壓力、流量和阻力的檢測。 ●取外周血和肺組織,分別采用放射免疫法、免疫組織化學(xué)法以及半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法等,從不同層面檢測肺體液相關(guān)因子的變化。 2.健康雄性wistar大鼠60只,分為三組對照組(CON)、尾吊7d組(TS7d)和尾吊+川芎嗪7d組(Treated),每組20只。實(shí)驗(yàn)期間,尾吊+川芎嗪7d組每日胃灌注川芎嗪1.5mg/kg。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時取三組肺組織,用免疫組織化學(xué)法、原位雜交法和免疫蛋白印跡法觀察原癌基因C-fos、C-jun、Calcinurein-β和Captain-2表達(dá)水平的變化。 結(jié)果: 1.血液學(xué)和血?dú)庵笜?biāo)變化 與對照組相比,尾吊7d組血白細(xì)胞(WBC)明顯升高(P＜0.05),PaO_2、SaO_2明顯降低(P＜0.05),中性粒細(xì)胞(N)、血紅蛋白(Hb)和其他血?dú)庵笜?biāo)無明顯改變(P＞0.05);尾吊14d組PaO_2、SaO_2明顯降低(P＜0.05),其他血常規(guī)指標(biāo)和血?dú)庵笜?biāo)與對照組相比雖有一定變化,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 2.組織血管形態(tài)學(xué)觀察 大體觀察對照組大鼠色澤潤澤光滑、肺組織無淤血及出血點(diǎn);而尾吊7d、14d組大鼠肺臟色澤不均勻,肺組織均可見不同程度的片狀和點(diǎn)狀出血點(diǎn),出血部位尤以右肺前葉為甚,且背側(cè)多見。 HE染色對照組肺泡壁形態(tài)大小均勻、肺泡壁內(nèi)無淤血;尾吊7d組、14d組肺泡壁變薄,并不同程度的增寬,肺間質(zhì)內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤,少數(shù)大鼠肺泡內(nèi)淤血,水腫及炎性細(xì)胞浸潤等病理性改變,直徑100μm左右的小動脈中層平滑肌增生,管壁變厚,管腔變窄,部分有血管內(nèi)增殖、重塑。 透射電鏡下觀察對照組內(nèi)皮細(xì)胞扁平,內(nèi)彈力層完整、規(guī)則;尾吊7d、14d組內(nèi)膜增厚,內(nèi)皮細(xì)胞體積增大,呈高柱狀突入管腔。 Ⅷ因子7d懸吊組Ⅷ因子的蛋白陽性表達(dá)較強(qiáng),血管密度增強(qiáng),明顯高于對照組(P＜0.01),而14d懸吊組陽性細(xì)胞表達(dá)較7d懸吊組減弱,血管密度減少,但仍高于對照組,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 微血管觀察墨汁灌注法示對照組大鼠肺組織微血管粗細(xì)正常、分布均勻、走形順暢;血管形態(tài)一致、內(nèi)皮細(xì)胞排列規(guī)則,內(nèi)彈力層厚薄一致。尾吊7d、14d組大鼠肺組織肺腺泡內(nèi)動脈壁變薄,不同程度的增寬,內(nèi)彈力層粗細(xì)不均,血管內(nèi)皮細(xì)胞增生、變性、脫落;平滑肌細(xì)胞肥大,部分血管環(huán)破裂。 3.肺血管壓力、肺血流量和右心室重量 與對照組的平臥位相比,尾吊7d組平臥位時的肺動脈壓(mPAP)和肺血管阻力(PVR)明顯增高(P＜0.05),肺血流量(PF)明顯下降(P＜0.05),肺靜脈壓(mPVP)雖升高,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);尾吊14d組平臥位上述各指標(biāo)與對照組平臥位相比都無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別性(P＞0.05)。 與平臥位比,對照組和尾吊7d組頭低位-30°時的變化趨勢相同,都出現(xiàn)mPAP、PF和mPVP的明顯增高(P＜0.05),PVR雖增高,但未達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);尾吊14d組除mPAP的增高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外(P＜0.05),其他三個指標(biāo)同尾吊7天組(表6圖33-36)。 尾吊7d和14d對右心室重量(RV)、左心室和室間隔重量(LV+SP)和右心室肥厚指數(shù)RV/(LV+SP)無影響(P＞0.05)。 4.尾吊7d、14d后大鼠離體肺循環(huán)動脈灌注壓較對照組降低(P＜0.05,P＜0.01),予以PE、Ach和SNP藥物干預(yù)后,TS7d和TS14d離體大鼠肺動脈血管對PE收縮減弱(P＜0.05),對Ach和SNP舒張反應(yīng)性增強(qiáng)(P＜0.01,P＜0.05),差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;尾吊模擬失重7d、14d后大鼠肺血管阻力在藥物干預(yù)前后均相應(yīng)減弱,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05,P＜0.01)。 5.肺內(nèi)體液因子的變化 與對照組比,尾吊7d組TBX_2和ET-1明顯升高(P＜0.05和P＜0.01),尾吊14d組TBX_2、ET-1、ANP明顯升高(P＜0.01,P＜0.05);尾吊7d組肺組織的ADM、bFGF蛋白的放射性強(qiáng)度明顯增高,尾吊14d組與對照組無明顯差別,且ADM明顯低于尾吊7d組(P＜0.05)。 6.川芎嗪干預(yù)作用 尾吊7d組肺組織、肺腺泡血管和微血管內(nèi)血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)原癌基因C-fos和C-jun及其mRNA蛋白明顯高于對照組(P＜0.01)),經(jīng)川芎嗪干預(yù)后,均明顯下降(P＜0.01,P＜0.05)。尾吊7d Calcinurein-β和Captain-2蛋白的平均光密度值和平均灰度值與對照組顯著性增強(qiáng)(P＜0.01,P＜0.05);應(yīng)用川芎嗪干預(yù)后,Treated組大鼠肺組織蛋白的平均光密度值和平均灰度值分別與模擬失重7d組比較蛋白的平均光密度值和平均光灰度值降低(P＜0.05)。 結(jié)論: 1.模擬失重對大鼠血常規(guī)和動脈血?dú)庥幸欢ㄓ绊?表現(xiàn)為尾吊7d大鼠白細(xì)胞明顯升高,尾吊7d,14d大鼠PaO_2、SaO_2明顯降低。 2.模擬失重對大鼠的肺組織和肺血管有損傷性影響,肺組織的損傷表現(xiàn)為模擬失重大鼠肺出現(xiàn)不同程度的片狀和點(diǎn)狀出血點(diǎn)、肺泡壁變薄,不同程度的增寬,肺間質(zhì)內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤,少數(shù)大鼠肺泡內(nèi)淤血,水腫及炎性細(xì)胞浸潤等病理性改變;肺血管的變化表現(xiàn)為出現(xiàn)血管重塑,Ⅷ因子的蛋白陽性表達(dá)較強(qiáng),微血管中出現(xiàn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增生、變性、脫落、平滑肌細(xì)胞肥大,部分血管環(huán)破裂。且尾吊7d組變化大于尾吊14d組。 3.模擬失重對大鼠肺血流動力學(xué)有影響,表現(xiàn)為模擬失重大鼠肺動脈壓、肺靜脈壓、肺血管阻力增高,肺血流量降低。 4.離體肺灌注實(shí)驗(yàn)表明模擬失重可引起尾吊大鼠肺血管舒縮功能的改變,表現(xiàn)為大鼠肺循環(huán)動脈灌注壓降低,肺血管阻力下降、肺動脈對PE收縮反應(yīng)減弱,對Ach和SNP舒張反應(yīng)性增強(qiáng)。 5.肺內(nèi)體液因子(TBX_2,6-Keto-PGF_1a,ET-1,ANP,ADM,FGFb)的釋放和表達(dá)水平、失衡在引起模擬失重后大鼠肺循環(huán)血流動力學(xué)、血管反應(yīng)性的變化的作用機(jī)制中,可能起一定作用。 6.川芎嗪具有干預(yù)模擬失重引起肺組織細(xì)胞因子變化的作用,表現(xiàn)為可抑制尾吊7d大鼠C-fos、C-jun、Calcinurein-β、Captain-2,抑制C-fos、C-jun原癌基因蛋白及其mRNA表達(dá),降低細(xì)胞內(nèi)CaM、CaN活性,下調(diào)細(xì)胞內(nèi)Captain-2表達(dá)水平,干預(yù)CaN依賴的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,降低細(xì)胞內(nèi)鈣超載。 總之:本研究從整體、器官、細(xì)胞、分子和基因水平上較深入、系統(tǒng)地揭示了模擬失重對肺循環(huán)的影響及探討了其發(fā)生的可能機(jī)制,并初步評價了中藥川芎嗪對模擬失重所致肺循環(huán)受損的防護(hù)作用和機(jī)制,為我國今后載人航天飛行中肺臟的防護(hù)提供科學(xué)的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：大鼠 模擬失重 肺循環(huán) 作用機(jī)制
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R855.22
【目錄】：

• 英文縮略詞表7-9
• 中文摘要9-13
• 英文摘要13-17
• 前言17-23
• 第一部分 模擬失重對大鼠動脈血?dú)獾挠绊?/span>23-31
• 一、材料與方法23-25
• 二、結(jié)果25-26
• 三、討論26-29
• 參考文獻(xiàn)29-31
• 第二部分 模擬失重對大鼠肺血管形態(tài)學(xué)的影響31-47
• 一、材料與方法31-34
• 二、結(jié)果34-41
• 三、討論41-44
• 參考文獻(xiàn)44-47
• 第三部分 模擬失重對大鼠肺循環(huán)血流動力學(xué)的影響47-58
• 一、材料與方法47-49
• 二、結(jié)果49-52
• 三、討論52-55
• 參考文獻(xiàn)55-58
• 第四部分 模擬失重對離體大鼠肺動脈血管調(diào)節(jié)功能的影響58-67
• 一、材料與方法58-60
• 二、結(jié)果60-63
• 三、討論63-65
• 參考文獻(xiàn)65-67
• 第五部分 模擬失重對大鼠調(diào)節(jié)肺血管功能的體液因子的影響67-84
• 一、材料與方法67-73
• 二、結(jié)果73-77
• 三、討論77-80
• 參考文獻(xiàn)80-84
• 第六部分 模擬失重大鼠肺組織C-fos和C-jun的表達(dá)及川芎嗪對其影響84-100
• 一、材料與方法84-88
• 二、結(jié)果88-94
• 三、討論94-96
• 參考文獻(xiàn)96-100
• 第七部分 模擬失重大鼠肺組織Calcinnurin-β和Captian-2的表達(dá)及川芎嗪對其影響100-113
• 一、材料與方法100-103
• 二、結(jié)果103-108
• 三、討論108-111
• 參考文獻(xiàn)111-113
• 結(jié)論113-115
• 文獻(xiàn)綜述115-125
• 綜述參考文獻(xiàn)120-125
• 博士期間發(fā)表的文章125-126
• 致謝126

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張麗芬;陳春榮;張倩;段淑哲;孔云;王峻;王林杰;;15d-6°頭低位臥床女性志愿者護(hù)理初探[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2011年04期

2 史亮;牛忠英;王林杰;張麗芬;湯楚華;師天鵬;包博;于洋;馬傳傳;;15d-6°頭低位臥床對女性最大咬合力及咬合速度的影響[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2011年04期

3 李延軍;嚴(yán)洪;邢雷;曹中平;;60d-6°頭低位臥床指端光電容積波的形態(tài)變化分析[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2011年04期

4 談?wù)\;曹毅;張麗芬;袁敏;王惠娟;牛東濱;趙琦;李志利;陳文娟;楊鴻慧;王林杰;李瑩輝;白延強(qiáng);;15d-6°頭低位臥床對女性立位耐力的影響[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2011年04期

5 趙軍;胡蓮娜;梁會澤;閆洪欣;高付林;仇長宇;;模擬失重狀態(tài)對正常人遠(yuǎn)視力、近視力、近點(diǎn)、立體視覺及眼壓的影響[J];眼科新進(jìn)展;2011年07期

6 陳思佚;趙鑫;周仁來;王林杰;談?wù)\;;15d-6°頭低位臥床對女性個體情緒的影響[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2011年04期

7 王林杰;張麗芬;竇躍龍;周湘杰;陳文娟;袁敏;趙琦;劉書娟;唐國華;李瑩輝;白延強(qiáng);;15d-6°頭低位臥床女性腰椎X線影像變化及防護(hù)效果[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2011年04期

8 王林杰;張麗芬;李志利;楊鴻慧;王惠娟;陳文娟;唐國華;王峻;周湘杰;竇躍龍;李瑩輝;白延強(qiáng);;女性15d頭低位臥床實(shí)驗(yàn)的組織實(shí)施與醫(yī)學(xué)監(jiān)督[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2011年04期

9 朱德兵;龍sユ，

本文編號：555173