發(fā)布時(shí)間：2017-07-06 10:20

  本文關(guān)鍵詞：重復(fù)正加速度暴露對(duì)高脂血癥大鼠血管內(nèi)皮功能的影響及藥物干預(yù)研究

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【摘要】：近年來(lái),因動(dòng)脈粥樣硬化(Artherosclerosis,AS)引起的冠心病、高血壓等心血管疾病已成為威脅軍事飛行人員健康和導(dǎo)致停飛的重要原因,研究飛行人員動(dòng)脈硬化的早期防治,對(duì)維護(hù)飛行人員身體健康,延長(zhǎng)飛行年限,提高空軍戰(zhàn)斗力有重要意義。高脂血癥是動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,我們?cè)诙鄠�(gè)航空兵部隊(duì)調(diào)查發(fā)現(xiàn),飛行人員高脂血癥發(fā)病率呈增高趨勢(shì)和年輕化趨勢(shì)。循證醫(yī)學(xué)證據(jù)表明,高脂血癥引起的內(nèi)皮功能障礙是動(dòng)脈粥樣硬化的始動(dòng)因素。研究表明,重復(fù)正加速度暴露會(huì)引起機(jī)體的心肌能量代謝紊亂,血中兒茶酚胺水平升高,刺激體內(nèi)的非特異性炎癥反應(yīng),促使血小板活化,氧自由基生成增多,可能導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷,加速隨年齡增長(zhǎng)的動(dòng)脈硬化進(jìn)程。重復(fù)正加速度作用是否通過(guò)加重高脂血癥引起的血管內(nèi)皮功能障礙,加速動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程,提高軍事飛行人員動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病的患病率,尚不明確。本課題采用高脂血癥動(dòng)物模型研究重復(fù)高正加速度作用是否會(huì)加重高脂血癥大鼠血管內(nèi)皮功能損傷,促進(jìn)炎癥反應(yīng),加速動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程,為進(jìn)一步研究高載荷飛行作業(yè)對(duì)飛行員心血管系統(tǒng)的影響提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。由于飛行職業(yè)的特殊性,飛行人員用藥不僅要考慮藥物治療的有效性,更要考慮藥物治療的安全性,包括藥物治療對(duì)飛行安全的影響。目前有大量研究證明中藥多部位、多靶點(diǎn)綜合治療高脂血癥的有效性和安全性。銀杏葉提取物是中藥銀杏葉中提取的天然有效成分,研究發(fā)現(xiàn),銀杏葉提取物能通過(guò)抗氧化應(yīng)激,調(diào)節(jié)血管舒縮,降低白細(xì)胞對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的粘附,拮抗血小板活化等多種途徑保護(hù)血管內(nèi)皮,且副作用小,不影響認(rèn)知等飛行作業(yè)能力。但銀杏葉提取物對(duì)重復(fù)高正加速度應(yīng)激引起的機(jī)體心血管系統(tǒng)損傷是否有保護(hù)作用,尚無(wú)文獻(xiàn)報(bào)道。本課題采用正加速度暴露和高脂血癥復(fù)合作用動(dòng)物模型研究銀杏葉提取物對(duì)復(fù)合作用動(dòng)物模型血管內(nèi)皮的保護(hù)作用及機(jī)制,為進(jìn)一步探索高脂血癥飛行員早期血管保護(hù)措施提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。第一部分重復(fù)正加速度暴露對(duì)高脂血癥大鼠血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)和功能的影響及機(jī)理研究目的:1研究重復(fù)正加速度暴露對(duì)高脂血癥大鼠血管內(nèi)皮依賴(lài)舒張功能的影響2研究重復(fù)正加速度暴露對(duì)高脂血癥大鼠血管炎癥反應(yīng)的影響方法:雄性sd大鼠32只,體重180~200g,隨機(jī)分為4組:正常對(duì)照組(con組),重復(fù)正加速度應(yīng)激組(+gz組),高脂組(hl組)和重復(fù)正加速度應(yīng)激高脂組(hl+gz組),每組8只。con組和+gz組大鼠每天喂飼普通飼料,hl組和hl+gz組大鼠每天喂飼高脂飼料。+gz組和hl+gz組大鼠隔天采用動(dòng)物離心機(jī)進(jìn)行+gz應(yīng)激處理,con組和hl組大鼠只在離心機(jī)上固定5min,不做離心暴露。+gz暴露峰值設(shè)定為+10gz,增長(zhǎng)率為1g/s,峰值持續(xù)30s,每天暴露3次(間隔1min),每周暴露3天,實(shí)驗(yàn)周期為8周。監(jiān)測(cè)大鼠體重和血脂的變化,實(shí)驗(yàn)結(jié)束次日(禁食16h),大鼠麻醉后腹主動(dòng)脈采血,分離血清和血漿,留取肝臟和胸主動(dòng)脈,分別觀察檢測(cè)下列指標(biāo):(1)血脂代謝指標(biāo):tc、ldl-c、hdl-c、tg和ox-ldl;(2)組織形態(tài)學(xué)指標(biāo):肝臟組織he染色光鏡觀察肝臟組織結(jié)構(gòu),動(dòng)脈組織透射電鏡觀察內(nèi)皮超微結(jié)構(gòu);(3)血管內(nèi)皮依賴(lài)舒張功能:離體血管環(huán)實(shí)驗(yàn)測(cè)定血管內(nèi)皮依賴(lài)性舒張反應(yīng);(4)氧化應(yīng)激指標(biāo):sod、gsh-px、t-aoc、gsh、mda和no;(5)炎癥反應(yīng)指標(biāo):il-1β、il-6、tnf-α、sicam-1和et-1;(6)血小板活化指標(biāo):txb2和6-keto-pgf1α;(7)westernblot法測(cè)定nox4、enos、lox-1、nf-κbp-p65、nf-κbp65和vap-1蛋白表達(dá);(8)qrt-pcr法測(cè)定nox4、enos、lox-1和nf-κbp65mrna表達(dá);(9)免疫組化法觀察enos和nf-κbp65的表達(dá)。結(jié)果:1血脂代謝:與con組相比,+gz組大鼠血脂水平無(wú)顯著差異,hl組和hl+gz組大鼠血清tc、ldl-c和ox-ldl水平顯著升高(p0.05。與hl組相比,hl+gz組大鼠血清ldl-c水平顯著升高(p0.05)。2組織形態(tài)學(xué)變化2.1肝臟組織he染色光鏡觀察,con組大鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)完整,肝細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)清晰,細(xì)胞索以中心靜脈為中心排列整齊;+gz組肝細(xì)胞未見(jiàn)明顯病理變化;hl組肝組織結(jié)構(gòu)變形、破壞,肝索排列紊亂,肝細(xì)胞腫脹明顯,細(xì)胞漿里可見(jiàn)圓形脂肪空泡;hl+gz組肝組織結(jié)構(gòu)破壞,出現(xiàn)片狀壞死,肝索排列紊亂,肝細(xì)胞腫脹明顯,細(xì)胞漿里可見(jiàn)大量圓形脂肪空泡。2.2胸主動(dòng)脈內(nèi)皮透射電鏡觀察,con組內(nèi)皮細(xì)胞排列連續(xù)、規(guī)則,基底膜完整,內(nèi)皮細(xì)胞無(wú)隆起與剝脫,線粒體結(jié)構(gòu)清晰;+gz組內(nèi)皮細(xì)胞排列紊亂,少量?jī)?nèi)皮細(xì)胞脫落,線粒體腫脹;hl組內(nèi)皮細(xì)胞隆起,核皺縮變形,線粒體水腫,有少量空泡變性,脂質(zhì)沉積;hl+gz組內(nèi)皮細(xì)胞脫落增多,有基底膜斷裂,線粒體明顯腫脹、嵴溶解,腔內(nèi)可見(jiàn)脫落細(xì)胞碎片。3血管內(nèi)皮依賴(lài)性舒張功能:ach對(duì)各組血管均有濃度依賴(lài)性舒張作用,與con相比,+gz組、hl組和hl+gz組血管最大舒張效應(yīng)均顯著降低(p0.05);與hl組相比,hl+gz組血管最大舒張效應(yīng)進(jìn)一步降低(p0.05)。snp對(duì)各組血管均有濃度依賴(lài)性舒張作用,各組血管對(duì)snp的舒張反應(yīng)無(wú)顯著差異。4氧化應(yīng)激指標(biāo)4.1大鼠血清氧化應(yīng)激指標(biāo):與con組相比,+gz組和hl+gz組大鼠血清sod、gsh-px和gsh水平顯著降低(p0.05),mda水平顯著升高(p0.05),hl組大鼠血清gsh-px和gsh水平顯著降低(p0.05)。與hl組相比,hl+gz組大鼠血清sod和gsh-px水平進(jìn)一步降低(p0.05),mda水平進(jìn)一步升高(p0.05)。4.2大鼠血管組織氧化應(yīng)激指標(biāo):與con組相比,+gz組、hl組和hl+gz組大鼠主動(dòng)脈勻漿t-aoc水平顯著降低(p0.05),mda水平顯著升高(p0.05)。與hl組相比,hl+gz組大鼠主動(dòng)脈勻漿t-aoc水平進(jìn)一步降低(p0.05),mda水平進(jìn)一步升高(p0.05),no水平有下降趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。5炎癥反應(yīng)指標(biāo)5.1大鼠血清炎癥反應(yīng)指標(biāo):與con組相比,+gz組、hl組和hl+gz組大鼠血清促炎癥因子il-1β、il-6和tnf-α水平顯著升高(p0.05),hl組和hl+gz組大鼠血清粘附蛋白sicam-1水平顯著升高(p0.05)。與hl組相比,hl+gz組大鼠血清促炎癥因子il-1β、il-6和tnf-α水平進(jìn)一步升高(p0.05)。5.2大鼠血管組織炎癥反應(yīng)指標(biāo):與con組相比,+gz組、hl組和hl+gz組大鼠動(dòng)脈組織il-6和et-1水平顯著升高(p0.05)。與hl組相比,hl+gz組大鼠動(dòng)脈組織il-6和et-1水平進(jìn)一步升高(p0.05)。6血小板活化指標(biāo):與con組相比,+gz組、hl組和hl+gz組大鼠血漿txb2水平顯著上升(p0.05),6-keto-pgf1α水平顯著降低(p0.05),txb2和6-keto-pgf1α比例失衡。與hl組相比,hl+gz組大鼠血漿txb2水平進(jìn)一步上升(p0.05),6-keto-pgf1α水平無(wú)顯著差異,txb2和6-keto-pgf1α比例進(jìn)一步失衡。7westernblot檢測(cè)結(jié)果顯示,與con組相比,+gz組、hl組和hl+gz組大鼠主動(dòng)脈enos表達(dá)顯著降低(p0.05);+gz組、hl組和hl+gz組大鼠主動(dòng)脈nox4和vap-1表達(dá)顯著增高(p0.05);hl組和hl+gz組大鼠主動(dòng)脈lox-1表達(dá)顯著增高(p0.05)。hl+gz組大鼠主動(dòng)脈p-p65/p65水平顯著升高(p0.05)。與hl組相比,hl+gz組大鼠主動(dòng)脈enos表達(dá)顯著降低;nox4、lox-1、vap-1和p-p65/p65水平均顯著提高(p0.05)。8qrt-pcr檢測(cè)結(jié)果顯示,與con組相比,hl+gz組大鼠主動(dòng)脈enosmrna表達(dá)顯著下調(diào)(p0.05);+gz組、hl組和hl+gz組大鼠主動(dòng)脈nox4、lox-1和nf-κbp65mrna表達(dá)顯著上調(diào)(p0.05)。與hl組相比,hl+gz組大鼠主動(dòng)脈enosmrna表達(dá)顯著降低(p0.05);nox4、lox-1和nf-κbp65mrna水平顯著增加。9免疫組化觀察結(jié)果顯示,enos在con組動(dòng)脈內(nèi)皮呈強(qiáng)陽(yáng)性染色,+gz組和hl組動(dòng)脈內(nèi)皮呈弱陽(yáng)性染色,hl+gz組動(dòng)脈內(nèi)皮呈微弱陽(yáng)性染色。nf-κbp65在con組主動(dòng)脈壁呈弱陽(yáng)性染色,+gz組和hl組主動(dòng)脈壁細(xì)胞核內(nèi)陽(yáng)性表達(dá)明顯增加,hl+gz組主動(dòng)脈壁呈強(qiáng)陽(yáng)性染色,細(xì)胞核內(nèi)陽(yáng)性表達(dá)明顯增加。結(jié)論:1重復(fù)高正加速度暴露能加重高脂血癥大鼠的脂代謝紊亂和氧化應(yīng)激損傷,加重血管的內(nèi)皮依賴(lài)性舒張功能障礙,其機(jī)制可能與正加速度應(yīng)激進(jìn)一步上調(diào)nox4表達(dá),提高內(nèi)皮氧化應(yīng)激水平,降低enos表達(dá)相關(guān)。2重復(fù)高正加速度暴露能促進(jìn)高脂血癥大鼠的炎癥反應(yīng),加重血管內(nèi)皮的炎癥損傷,其機(jī)制可能與正加速度應(yīng)激促進(jìn)活化血小板,進(jìn)一步上調(diào)lox-1表達(dá),激活nf-κb,增加促炎癥因子的產(chǎn)生相關(guān)。第二部分銀杏葉提取物對(duì)重復(fù)正加速度暴露高脂血癥大鼠血管內(nèi)皮損傷的保護(hù)作用研究目的:1研究銀杏葉提取物對(duì)重復(fù)正加速度暴露高脂血脂癥大鼠血管內(nèi)皮依賴(lài)舒張功能的保護(hù)作用2研究銀杏葉提取物對(duì)重復(fù)正加速度暴露高脂血脂癥大鼠血管炎癥損傷的保護(hù)作用方法:雄性sd大鼠50只,體重180~200g,隨機(jī)分為5組:正常對(duì)照組(con組),正加速度應(yīng)激高脂組(hl+gz組),銀杏葉提取物低劑量干預(yù)組(gbe-l組),銀杏葉提取物中劑量干預(yù)組(gbe-m組)和銀杏葉提取物高劑量干預(yù)組(gbe-h組),每組10只。con組大鼠每天喂飼普通飼料,hl+gz組、gbe-l組、gbe-m組和gbe-h組大鼠每天均喂飼大鼠高脂飼料,并且隔天采用動(dòng)物離心機(jī)進(jìn)行+gz應(yīng)激處理,con組大鼠只在離心機(jī)上固定5min,不做離心暴露。+gz暴露峰值設(shè)定為+10gz,增長(zhǎng)率為1g/s,峰值持續(xù)30s,每天暴露3次(間隔1min),每周暴露3天,實(shí)驗(yàn)周期為8周。藥物干預(yù)采用預(yù)防性給藥,gbe-l組、gbe-m組和gbe-h組大鼠每天上午8時(shí)左右(離心機(jī)暴露前)灌胃給藥1次,連續(xù)給藥8周,給藥體積為10ml/kg,灌胃前稱(chēng)取體重以確定灌藥量,gbe低、中、高劑量組大鼠每天分別按50mg/kg、100mg/kg和200mg/kg給予gbe混懸液,con組和hl+gz組給予等量溶劑。實(shí)驗(yàn)結(jié)束次日(禁食16h),大鼠麻醉后腹主動(dòng)脈采血,分離血清和血漿,留取肝臟和胸主動(dòng)脈,觀察檢測(cè)指標(biāo)同第一部分。結(jié)果:1血脂代謝:與hl+gz組相比,gbe-l組、gbe-m組和gbe-h組大鼠血清tc和ldl-c水平顯著降低(p0.05),gbe-m組和gbe-h組大鼠血清ox-ldl水平顯著降低(p0.05)。與gbe-l組相比,gbe-m組和gbe-h組大鼠血清tc、ldl-c和ox-ldl水平進(jìn)一步降低(p0.05)。2組織形態(tài)學(xué)變化2.1肝臟組織he染色光鏡觀察,con組大鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)完整,肝細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)清晰,細(xì)胞索排列整齊;hl+gz組肝組織結(jié)構(gòu)破壞,出現(xiàn)少量片狀壞死,肝索排列紊亂,肝細(xì)胞腫脹明顯,細(xì)胞漿里可見(jiàn)大量圓形脂肪空泡;與hl+gz組相比,gbe-l組、gbe-m組和gbe-h組肝組織結(jié)構(gòu)破壞減輕,肝細(xì)胞腫脹減小,細(xì)胞漿里脂肪空泡減少。2.2胸主動(dòng)脈內(nèi)皮透射電鏡觀察,con組內(nèi)皮細(xì)胞排列連續(xù)、規(guī)則,基底膜完整,內(nèi)皮細(xì)胞無(wú)隆起與剝脫,線粒體結(jié)構(gòu)清晰;hl+gz組內(nèi)皮細(xì)胞脫落增多,有基底膜斷裂,線粒體明顯腫脹、嵴溶解,腔內(nèi)可見(jiàn)脫落細(xì)胞碎片;gbe-l組內(nèi)皮細(xì)胞排列紊亂,有內(nèi)皮細(xì)胞脫落,部分線粒體嵴溶解;gbe-m組和gbe-h組有內(nèi)皮細(xì)胞隆起,少量?jī)?nèi)皮細(xì)胞脫落,少量線粒體腫脹、嵴溶解。3血管內(nèi)皮依賴(lài)性舒張功能:ach對(duì)各組血管均有濃度依賴(lài)性舒張作用,與hl+gz組相比,gbe-m組和gbe-h組血管最大舒張效應(yīng)顯著升高(p0.05),gbe-l組無(wú)顯著差異。snp對(duì)各組血管均有濃度依賴(lài)性舒張作用,各組血管對(duì)snp的舒張反應(yīng)無(wú)顯著差異。4氧化應(yīng)激指標(biāo)4.1大鼠血清氧化應(yīng)激指標(biāo):與hl+gz組相比,gbe-l組大鼠血清gsh-px和gsh水平顯著升高(p0.05);gbe-m組和gbe-h組大鼠血清sod、gsh-px和gsh水平顯著升高(p0.05),mda水平顯著降低(p0.05)。與gbe-l組相比,gbe-m組和gbe-h組大鼠血清sod、gsh-px和gsh水平顯著升高(p0.05),mda水平顯著降低(p0.05)。4.2大鼠血管組織氧化應(yīng)激指標(biāo):與hl+gz組相比,gbe-m組和gbe-h組大鼠主動(dòng)脈t-aoc水平顯著升高(p0.05),mda水平顯著降低(p0.05);no水平均無(wú)顯著差異。與gbe-l組相比,gbe-h組大鼠主動(dòng)脈漿t-aoc水平顯著升高(p0.05),mda和no水平無(wú)顯著差異。5炎癥反應(yīng)指標(biāo)5.1大鼠血清炎癥反應(yīng)指標(biāo):與hl+gz組相比,gbe-l組、gbe-m組和gbe-h組大鼠血清il-6、tnf-α和sicam-1水平顯著下降(p0.05),gbe-m組和gbe-h組大鼠血清il-1β水平顯著下降(p0.05)。與gbe-l組相比,gbe-m組和gbe-h組大鼠血清il-1β、tnf-α和sicam-1水平進(jìn)一步下降(p0.05),gbe-h組大鼠血清il-6水平進(jìn)一步下降(p0.05)。與gbe-m組相比,gbe-h組大鼠血清tnf-α水平進(jìn)一步下降(p0.05)。5.2大鼠血管組織炎癥反應(yīng)指標(biāo):與hl+gz組相比,gbe-l組、gbe-m組和gbe-h組大鼠動(dòng)脈組織il-6水平顯著下降(p0.05),gbe-m組和gbe-h組大鼠血清e(cuò)t-1水平顯著下降(p0.05)。與gbe-l組相比,gbe-m組和gbe-h組大鼠動(dòng)脈組織il-6和et-1水平顯著降低(p0.05)。6血小板活化指標(biāo):與hl+gz組相比,gbe-l組、gbe-m組和gbe-h組大鼠血漿txb2水平顯著上升(p0.05),6-keto-pgf1α水平顯著下降(p0.05)。與gbe-l組相比,gbe-h組大鼠血漿6-keto-pgf1α水平顯著上升(p0.05)。gbe藥物干預(yù)能減輕txb2和6-keto-pgf1α比例失衡。7westernblot檢測(cè)結(jié)果顯示,與hl+gz組相比,gbe-l組、gbe-m組和gbe-h組大鼠主動(dòng)脈enos表達(dá)顯著升高(p0.05),lox-1表達(dá)顯著降低(p0.05);gbe-m組和gbe-h組大鼠主動(dòng)脈nox4、vap-1和nf-κbp-p65/p65水平顯著降低(p0.05)。與gbe-l組相比,gbe-m組和gbe-h組大鼠主動(dòng)脈nox4、vap-1和nf-κbp-p65/p65水平顯著降低(p0.05)。8qrt-pcr檢測(cè)結(jié)果顯示,與hl+gz組相比,gbe-m組和gbe-h組大鼠主動(dòng)脈nox4mrna表達(dá)顯著下調(diào)(p0.05),enosmrna表達(dá)顯著上調(diào)(p0.05),gbe-l組、gbe-m組和gbe-h組大鼠主動(dòng)脈lox-1、nf-κbp65mrna表達(dá)顯著下調(diào)(p0.05)。與gbe-l組相比,gbe-m組和gbe-h組大鼠主動(dòng)脈nox4、lox-1和nf-κbp65mrna表達(dá)顯著下調(diào)(p0.05),enosmrna表達(dá)顯著上調(diào)(p0.05)。9免疫組化觀察結(jié)果顯示,enos在con組動(dòng)脈內(nèi)皮呈強(qiáng)陽(yáng)性染色,hl+gz組動(dòng)脈內(nèi)皮呈微弱陽(yáng)性染色,gbe干預(yù)組動(dòng)脈內(nèi)皮呈弱陽(yáng)性染色。nf-κbp65在con組主動(dòng)脈壁陽(yáng)性表達(dá)較少,hl+gz組主動(dòng)脈壁陽(yáng)性表達(dá)明顯增加,且細(xì)胞核內(nèi)陽(yáng)性表達(dá)明顯增加,gbe干預(yù)組主動(dòng)脈壁陽(yáng)性表達(dá)有減少趨勢(shì)。結(jié)論1gbe干預(yù)能劑量依賴(lài)性減輕重復(fù)正加速暴露高脂血癥大鼠的脂代謝紊亂和氧化應(yīng)激損傷,減輕血管的內(nèi)皮依賴(lài)性舒張功能障礙,其機(jī)制可能與下調(diào)nox4表達(dá),降低氧化應(yīng)激水平,提高enos的表達(dá)相關(guān)。2gbe干預(yù)能劑量依賴(lài)性降低重復(fù)正加速暴露高脂血癥大鼠的炎癥反應(yīng),減輕血管內(nèi)皮的炎癥損傷,其機(jī)制可能與降低ox-ldl水平和拮抗血小板活化,下調(diào)lox-1表達(dá),抑制nf-κb活化,減少促炎癥因子的產(chǎn)生相關(guān)。第三部分基于代謝組學(xué)的銀杏葉提取物對(duì)急性正加速度暴露大鼠應(yīng)激損傷的保護(hù)作用機(jī)制研究目的:1研究正加速度暴露對(duì)大鼠血清代謝譜的影響;2研究銀杏葉提取物對(duì)正加速度暴露大鼠血清代謝譜的保護(hù)作用;方法:雄性sd大鼠60只,體重180~220g,大鼠隨機(jī)分為5組:對(duì)照組(cg),正加速度應(yīng)激模型組(mg),銀杏葉提取物低劑量干預(yù)組(ldg),銀杏葉提取物中劑量干預(yù)組(mdg)和銀杏葉提取物高劑量干預(yù)組(hdg),每組12只。對(duì)照組和模型組從第1天到第14天口服給予0.5%羧甲基纖維素鈉溶液,給藥體積10ml/kg。低、中、高劑量干預(yù)組從第1天到第14天灌胃給予gbe,給藥劑量分別為50mg/kg,100mg/kg和200mg/kg,所有藥物均混懸于0.5%羧甲基纖維素鈉溶液。在第14天給藥后,模型組和低、中、高劑量組大鼠采用動(dòng)物離心機(jī)進(jìn)行+gz應(yīng)激處理,對(duì)照組大鼠在有機(jī)玻璃盒中固定,不做離心機(jī)暴露。+gz暴露峰值設(shè)定為+10gz,增長(zhǎng)率為1g/s,峰值持續(xù)5min,暴露1次。正加速度暴露實(shí)驗(yàn)后,眼眶靜脈叢取血用于代謝組學(xué)分析;大鼠麻醉后腹主動(dòng)脈采血,用于測(cè)定血液生化指標(biāo)。采用基于超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜(uhplc-q-tofms)的代謝組學(xué)方法分析正加速度暴露對(duì)大鼠血清代謝輪廓的擾動(dòng)和gbe的保護(hù)作用。采用主成分分析(pca)和偏最小二乘判別分析(pls-da)等多元統(tǒng)計(jì)分析方法篩選正加速度暴露相關(guān)潛在的生物標(biāo)志物。通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行保留時(shí)間和一級(jí)質(zhì)譜、二級(jí)質(zhì)譜的對(duì)比,鑒別代謝標(biāo)志物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果:1血清生化指標(biāo):與對(duì)照組相比,模型組t-aoc、t-sod、gr和gpx活性顯著降低(p0.05),mda水平顯著升高(p0.05)。與模型組相比,在中、高劑量藥物干預(yù)組T-AOC、T-SOD、GR和GPx活性顯著升高(P0.05),MDA水平顯著降低(P0.05),低劑量藥物干預(yù)組無(wú)顯著差異。2血清代謝輪廓分析:模型組的代謝譜偏離正常組,中、劑量銀杏葉提取物干預(yù)組偏離模型組,接近對(duì)照組,說(shuō)明中、高劑量的銀杏葉提取物對(duì)+Gz誘導(dǎo)的代謝紊亂有改善作用,高劑量效果更優(yōu)。3正加速度暴露相關(guān)潛在生物標(biāo)志物:多元統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)18個(gè)差異代謝物。與對(duì)照組相比,脂肪酸β氧化通路相關(guān)棕櫚酸、油酸水平升高,Linoleyl肉堿和Vaccenyl肉堿水平降低;甘油磷脂代謝通路相關(guān)溶血磷脂酰乙醇胺和溶血磷脂酰膽堿,包括(LysoPE(0:0/18:2))、LysoPC(14:0)、LysoPC(15:0)、LysoPC(18:1)、LysoPC(17:0)、LysoPC(20:2)和LysoPC(20:1)水平降低;鞘類(lèi)磷脂代謝相關(guān)鞘氨醇-1-磷酸和二氫鞘氨醇-1-磷酸的水平升高;膽汁酸代謝相關(guān)�；悄懰岷团；切苋パ跛崴缴�;嘌呤代謝相關(guān)尿囊素和尿酸的水平升高;賴(lài)氨酸代謝通路相關(guān)賴(lài)氨酸的水平降低。4 GBE對(duì)正加速暴露相關(guān)生物標(biāo)志物的影響:高劑量GBE干預(yù)能顯著調(diào)節(jié)11個(gè)生物標(biāo)志物的代謝水平,包括脂肪酸β氧化通路中的Linoleyl肉堿、Vaccenyl肉堿、棕櫚酸和油酸,參與嘌呤代謝代謝的尿酸和尿囊素,參與賴(lài)氨酸代謝的賴(lài)氨酸,參與甘油磷脂代謝的Lyso PC(14:0)、LysoPC(15:0)、LysoPC(18:1)和LysoPC(17:0)。結(jié)論:1正加速度暴露可導(dǎo)致大鼠血清代謝譜偏離正常代謝譜,顯著影響脂肪酸β氧化通路、甘油磷脂代謝、鞘類(lèi)磷脂代謝,膽汁酸代謝,嘌呤代謝和賴(lài)氨酸代謝;2銀杏葉提取物可使正加速度誘導(dǎo)偏離的代謝譜向正常代謝譜靠近,改善高正加速度暴露引起的脂肪酸β氧化通路、甘油磷脂代謝、嘌呤代謝和賴(lài)氨酸代謝紊亂,減輕高正加速度暴露導(dǎo)致的應(yīng)激損傷。
【關(guān)鍵詞】：正加速度 高脂血癥 內(nèi)皮功能障礙 氧化應(yīng)激 炎癥反應(yīng) 銀杏葉提取物 代謝組學(xué)
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R856
【目錄】：

• 縮略語(yǔ)表5-7
• 中文摘要7-16
• Abstract16-29
• 前言29-31
• 文獻(xiàn)回顧31-46
• 第一部分 重復(fù)正加速度暴露對(duì)高脂血癥大鼠血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)和功能的影響及機(jī)理研究46-86
• 實(shí)驗(yàn)一 重復(fù)正加速度暴露對(duì)高脂血癥大鼠血管內(nèi)皮依賴(lài)舒張功能的影響46-67
• 1 材料46-48
• 2 方法48-54
• 3 結(jié)果54-61
• 4 討論61-67
• 實(shí)驗(yàn)二 重復(fù)正加速度暴露對(duì)高脂血癥大鼠血管炎癥反應(yīng)的影響67-86
• 1 材料67-69
• 2 方法69-74
• 3 結(jié)果74-80
• 4 討論80-86
• 第二部分 銀杏葉提取物對(duì)重復(fù)正加速度暴露高脂血癥大鼠血管內(nèi)皮損傷的保護(hù)作用研究86-115
• 實(shí)驗(yàn)三 銀杏葉提取物對(duì)重復(fù)正加速度暴露高脂血癥大鼠血管內(nèi)皮依賴(lài)舒張功能的干預(yù)作用86-100
• 1 材料87
• 2 方法87-89
• 3 結(jié)果89-96
• 4 討論96-100
• 實(shí)驗(yàn)四 銀杏葉提取物對(duì)重復(fù)正加速度暴露高脂血脂癥大鼠血管炎癥反應(yīng)的干預(yù)作用100-115
• 1 材料100
• 2 方法100-102
• 3 結(jié)果102-110
• 4 討論110-115
• 第三部分 基于代謝組學(xué)的銀杏葉提取物對(duì)急性正加速度暴露大鼠應(yīng)激損傷的保護(hù)作用機(jī)制研究115-129
• 實(shí)驗(yàn)五 基于代謝組學(xué)的銀杏葉提取物對(duì)急性正加速度暴露大鼠應(yīng)激損傷的保護(hù)作用機(jī)制研究115-129
• 1 材料115-116
• 2 方法116-118
• 3 結(jié)果118-119
• 4 討論119-123
• 附圖表123-129
• 小結(jié)129-130
• 參考文獻(xiàn)130-150
• 附錄150-151
• 研究成果151-152
• 致謝152

【相似文獻(xiàn)】

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1 邵波;吳迪;鄭軍;徐欣;張龍方;姚克純;;超聲檢查飛行員反復(fù)正加速度暴露后心臟功能的變化[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2008年06期

2 羅惠蘭;;重復(fù)、長(zhǎng)時(shí)間正加速度作用下動(dòng)脈粥樣硬化家兔模型血管內(nèi)分泌變化特征研究[J];空軍總醫(yī)院學(xué)報(bào);2009年03期

3 戴雨,紀(jì)桂英,王怠,張素梅,金泉,王克儉;正加速度對(duì)大鼠腎功能和組織結(jié)構(gòu)的影響[J];中華航空航天醫(yī)學(xué)雜志;1997年01期

4 戴雨,紀(jì)桂英,戴大江,王學(xué)娟,肖魯;正加速度對(duì)飛行員血漿降鈣基因相關(guān)肽、內(nèi)皮素水平和腎功能的影響(英文)[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;1998年01期

5 史斌;張洪義;;高正加速度對(duì)消化系統(tǒng)功能影響的研究進(jìn)展[J];解放軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2014年02期

6 詹皓;陳良恩;楊明浩;;正加速度應(yīng)激致心腦損傷的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究綜述[J];中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志;2014年07期

7 孫喜慶,韋應(yīng)波;正加速度對(duì)認(rèn)知功能的影響[J];第四軍醫(yī)大學(xué)吉林軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2002年03期

8 王曉麗,劉麗,郭麗,范洪學(xué);高、低正加速度耐力大鼠腦組織差異表達(dá)基因的分離[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2002年05期

9 劉長(zhǎng)明;我國(guó)飛機(jī)抗荷裝置的研制與生產(chǎn)[J];航空史研究;1997年01期

10 薛霞;薛紅;李衛(wèi)東;王旭芳;;高正加速度應(yīng)激對(duì)人體唾液睪酮及皮質(zhì)醇的影響[J];解放軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2013年11期

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 記者 張目 朱國(guó)亮;中國(guó)民歌正加速度消亡[N];新華每日電訊;2004年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 楊志暉;重復(fù)正加速度暴露對(duì)高脂血癥大鼠血管內(nèi)皮功能的影響及藥物干預(yù)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2016年

2 李金聲;+Gz誘導(dǎo)熱休克蛋白表達(dá)及其對(duì)+Gz致腦損傷保護(hù)作用的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2001年

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1 胡深;不同+Gz重復(fù)持續(xù)暴露對(duì)大鼠肝臟組織超微結(jié)構(gòu)損傷及GRP78的表達(dá)影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

2 林凱;正加速度（+Gz）重復(fù)暴露致大鼠腦損傷差異表達(dá)基因的篩選[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2002年

3 李文兵;重復(fù)持續(xù)性+Gz暴露對(duì)大鼠肝組織應(yīng)激損傷的分子機(jī)制與防護(hù)的初步研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2014年

4 王蘭;正加速度誘發(fā)缺血心肌心律失常的細(xì)胞電生理機(jī)制研究[D];河北北方學(xué)院;2014年

5 張載清;自行設(shè)計(jì)的可控軸向加壓裝置模擬正加速度負(fù)荷對(duì)兔腰椎間盤(pán)的影響[D];大連醫(yī)科大學(xué);2013年

6 韓磊;+Gz暴露與腦HSP70基因表達(dá)相關(guān)性的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2001年

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本文編號(hào)：525802