模擬微重力效應(yīng)對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞中心體及BUB1的影響
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更多相關(guān)文章: 模擬微重力效應(yīng) 人骨肉瘤細(xì)胞 中心體 BUB1
【摘要】: 空間環(huán)境對(duì)人體的主要影響因素是電離輻射和持續(xù)的微重力。已有研究表明空間微重力環(huán)境可導(dǎo)致宇航員的機(jī)體出現(xiàn)多種生理性和病理性改變。為了從細(xì)胞水平考察微重力效應(yīng)對(duì)機(jī)體的損傷,本研究以人骨肉瘤細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料,通過(guò)回轉(zhuǎn)器模擬微重力效應(yīng),研究模擬微重力效應(yīng)條件下人骨肉瘤細(xì)胞微管細(xì)胞骨架、中心體及紡錘體檢驗(yàn)點(diǎn)蛋白BUB1的變化情況。研究結(jié)果表明:經(jīng)過(guò)模擬微重力處理72小時(shí)后人骨肉瘤細(xì)胞U-2 OS細(xì)胞貼壁鋪展程度降低,微管骨架有序性下降,排列紊亂。模擬微重力效應(yīng)能夠?qū)е氯斯侨饬黾?xì)胞U-2 OS紡錘體多極率增加,且隨著模擬微重力時(shí)間的加長(zhǎng)呈加大的趨勢(shì)。雖然人骨肉瘤細(xì)胞系U-2 OS、MG-63和Saos-2中心體組份Centrin-2的免疫熒光結(jié)果表明人骨肉瘤細(xì)胞中在雙極和多極紡錘體極區(qū)皆可檢測(cè)到中心體的存在,但是Western Blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示模擬微重力效應(yīng)后中心體蛋白γ-tubulin表達(dá)量無(wú)明顯上調(diào),提示模擬微重力效應(yīng)處理后出現(xiàn)的額外的中心體并不是由于發(fā)生中心體額外復(fù)制才出現(xiàn)的。實(shí)時(shí)定量PCR和Western Blot結(jié)果表明模擬微重力效應(yīng)會(huì)導(dǎo)致U-2 OS和MG-63細(xì)胞紡錘體組裝檢驗(yàn)點(diǎn)蛋白BUB1 mRNA水平及蛋白水平表達(dá)量上調(diào)。關(guān)于上述模擬微重力效應(yīng)影響中心體及檢驗(yàn)點(diǎn)蛋白BUB1的結(jié)果在空間生物學(xué)的研究中還未見(jiàn)報(bào)道,因此對(duì)于空間生物學(xué)在相關(guān)方面的研究可能具有參考價(jià)值。
【關(guān)鍵詞】:模擬微重力效應(yīng) 人骨肉瘤細(xì)胞 中心體 BUB1
【學(xué)位授予單位】:哈爾濱工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號(hào)】:R85
【目錄】:
- 摘要4-5
- Abstract5-8
- 第1章 緒論8-19
- 1.1 空間生物學(xué)與航天醫(yī)學(xué)研究進(jìn)展8-10
- 1.2 微重力對(duì)細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)10-13
- 1.2.1 微重力對(duì)細(xì)胞骨架的影響10-11
- 1.2.2 微重力對(duì)細(xì)胞周期的影響11-12
- 1.2.3 微重力對(duì)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的影響12-13
- 1.3 中心體概述13-15
- 1.4 紡錘體組裝檢驗(yàn)點(diǎn)及紡錘體組裝檢驗(yàn)點(diǎn)蛋白BU81 概述15-18
- 1.4.1 紡錘體組裝檢驗(yàn)點(diǎn)概述15-17
- 1.4.2 紡錘體檢驗(yàn)點(diǎn)蛋白BU81 概述17-18
- 1.5 課題研究的目的和意義18
- 1.6 課題的研究?jī)?nèi)容18-19
- 第2章 實(shí)驗(yàn)材料和方法19-26
- 2.1 實(shí)驗(yàn)材料19-22
- 2.1.1 細(xì)胞系19
- 2.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)用品19-20
- 2.1.3 常用試劑20-21
- 2.1.4 主要儀器設(shè)備21-22
- 2.1.5 主要軟件22
- 2.2 實(shí)驗(yàn)方法22-25
- 2.2.1 模擬微重力效應(yīng)22-23
- 2.2.2 細(xì)胞計(jì)數(shù)23
- 2.2.3 流式細(xì)胞術(shù)對(duì)細(xì)胞周期的檢測(cè)23-24
- 2.2.4 免疫熒光對(duì)細(xì)胞骨架、紡錘體及中心體變化的檢測(cè)24
- 2.2.5 實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)對(duì)于基因RNA水平表達(dá)量變化的檢測(cè)24-25
- 2.2.6 Western Blot對(duì)蛋白表達(dá)量變化的檢測(cè)25
- 2.3 本章小結(jié)25-26
- 第3章 模擬微重力效應(yīng)下U-2 OS細(xì)胞微管及紡錘體的變化26-30
- 3.1 模擬微重力效應(yīng)對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞微管細(xì)胞骨架的影響26-27
- 3.2 模擬微重力效應(yīng)對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞紡錘體的影響27-29
- 3.2.1 模擬微重力效應(yīng)下人骨肉瘤細(xì)胞的紡錘體形態(tài)變化27
- 3.2.2 模擬微重力效應(yīng)下人骨肉瘤細(xì)胞的紡錘體多極率27-29
- 3.3 討論29
- 3.4 本章小結(jié)29-30
- 第4章 模擬微重力效應(yīng)對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞中心體的影響30-34
- 4.1 人骨肉瘤細(xì)胞的中心體形態(tài)30
- 4.2 模擬微重力效應(yīng)對(duì)中心體蛋白γ-tubulin表達(dá)量的影響30-33
- 4.3 討論33
- 4.4 本章小結(jié)33-34
- 第5章 模擬微重力效應(yīng)對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞中BU81 的影響34-38
- 5.1 模擬微重力效應(yīng)對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞紡錘體檢驗(yàn)點(diǎn)蛋白 BUB1 mRNA 水平的影響34-35
- 5.2 模擬微重力效應(yīng)對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞紡錘體檢驗(yàn)點(diǎn)蛋白 BUB1 蛋 白水平的影響35-37
- 5.3 討論37
- 5.4 本章小結(jié)37-38
- 結(jié)論38
- 展望38-39
- 參考文獻(xiàn)39-44
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文44-46
- 致謝46
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,本文編號(hào):519377
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