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模擬微重力對大鼠負重骨骨代謝及骨折愈合影響的實驗研究

發(fā)布時間:2017-06-24 00:05

  本文關鍵詞:模擬微重力對大鼠負重骨骨代謝及骨折愈合影響的實驗研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】: [目的] 1、建立理想的大鼠尾吊實驗模型,為研究模擬失重和長期臥床等微重力環(huán)境骨代謝生長提供有效途徑; 2、探討模擬微重力環(huán)境對大鼠骨代謝的影響及其程度; 3、探討模擬微重力環(huán)境大鼠負重骨生物力學性能的變化; 4、探討模擬微重力環(huán)境對大鼠負重骨骨折愈合的影響。 本研究最終目的在于了解微重力環(huán)境對負重骨生長代謝的作用及其機制,從而為長期失重飛行航天員和長期臥床患者中骨質疏松的防治研究提供一條思路。 [方法] 1、模型制備:2月齡雄性SD大鼠16只隨機分為尾吊實驗組和對照組:尾吊組大鼠用透氣膠帶粘貼于尾部近2/3部兩側,膠帶遠端懸掛于可自由滑動的塑料環(huán),使大鼠呈頭低位,身體與地面呈30°,后肢自由懸空不負重;對照不予處理,于相同籠具等量飲食飼養(yǎng)4周; 2、對模型大鼠反應的觀測:觀察尾吊期間大鼠活動、飲食、體重變化、皮毛尾部色澤;第4周取血清放免法測皮質酮,稱量并計算腎上腺、胸腺相對重量; 3、骨代謝生化指標測量:全自動生化分析儀測血清鈣、磷、堿性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶,,放免法測骨鈣素; 4、負重骨物理性狀測量:取右脛骨稱骨干、濕重,浮力法測體積,灰化法測骨礦鹽量,原子吸收分光光度法測鈣量;計算骨礦鹽和鈣含量; 5、負重骨生物力學性能測試:取右股骨進行三點彎曲試驗,測結構力學指標最大橈度、彈性橈度、最大負荷、彈性負荷,計算材料力學指標彈性模量、剛性系數(shù)、韌性系數(shù); 6、骨組織微血管觀察:明膠墨汁腹主動脈灌注,左脛骨近端縱形50μm厚切片,體視學方法測微血管密度; 7、骨組織結構觀察及免疫組化染色:光、電鏡觀察骨組織結構、超微結構;觀察骨組織細胞TGF-β_1表達變化情況; 8、大鼠負重骨骨折模型:2月齡雄性SD大鼠40只,左腔骨中段開 放骨折,0.smm克氏針髓腔內固定后,隨機分至尾吊實驗組和對照組, 觀察4周; 9、骨折愈合情況觀察:骨折后每周,各組取3只對骨折部進行X線 攝片,光鏡、電鏡觀察骨儷組織結構及細胞形態(tài);第4周對兩組大鼠骨 折X線片進行評分、分析; 10、骨儷局部細胞因子表達:骨癡組織切片進行 VEGF和 TGF-P;免 疫組化染色; 11、骨折愈合力學性能:骨折4周,取余下大鼠左胚骨進行扭轉力 學試驗,測最大扭距、最大扭角、扭轉剛度、能量吸收等指標。 【結果I 1、大鼠尾吊情況:尾吊期間大鼠活動、進食無受限,無反轉咬尾。 尾部缺血壞死現(xiàn)象,動物成活,整個尾吊期間尾吊鼠體重雖比其相應對 照輕,但差異無顯著性(P>0.05);尾吊4周時,尾吊鼠血清皮質酮及 腎上腺、胸腺相對重量與對照無差別叩>0.05\ 2、骨代謝生化指標測量:與對照比,尾吊鼠血清堿性磷酸酶(P< 0.01)、骨鈣素u<O.05)明顯下降,血清鈣、抗酒石酸酸性磷酸酶升 高不明顯(P>0.05),而血清磷稍有下降p>0.05): 3、負重骨物理性狀測量:與對照比,尾吊鼠胚骨長度未受影響o >0.05),但骨體積、濕重減少非常顯著(P<0.01),骨干重、骨礦鹽含 量減少也比較明顯叩<0.05),而骨鈣含量無明顯減少u>0.05); 4、負重骨生物力學性能測試:尾吊4周股骨除彈性撓度外,各結構 力學指標最大撓度、彈性負荷(P<0.05)、最大負荷(P<0.01)明顯下降, 材料力學指標彈性模量(P<0.05)、韌性系數(shù)與剛性系數(shù)(P<0.01)亦均 有顯著性變化; 5、骨組織微血管觀察:尾吊鼠腔骨干髓端微血管走行紊亂,不連續(xù), 管徑粗細變化較大,血管面積密度減少差異顯著叩<0.05); 6、骨組織鏡下結構及免疫組化染色:光鏡下,尾吊鼠干髓端骨小梁 稀少,骨內膜成骨細胞數(shù)少;骨組織及其細胞兀卜日;表達下降:電鏡下, 骨組織細胞胞漿及細胞器減少; 7、骨折愈合情況:光鏡下,尾吊鼠骨癡以軟骨骨儷為主,骨化受阻; -3- 與對照比,骨癡 VEGF和 TGF-p;陽性表達下降;X線示骨癡量少,骨折 4 周骨癡量不如對照u<0.05); 8、抗扭轉力學試驗:骨折愈合4周,尾吊鼠腔骨抗扭轉力學性能包 括:最大扭距、最大扭角(P<0.05),扭轉剛度、自量吸收叩 <.01) 均不如對照。 【結論I l、本實驗所建立尾吊模擬微重力環(huán)境大鼠模型,成功模擬了體液頭 向轉移和負重骨脫負荷兩個失重對機體作用的主要生理效應,大鼠應激 反應小,為地面模擬微重力環(huán)境的研究提供了較好的動物模型; 2、模擬微重力環(huán)境4周,大鼠血清骨代謝指標表現(xiàn)為骨形成受抑制; 3、模擬微重力環(huán)境負唾骨生長受抑制、力學性能下降、骨礦鹽明顯 丟失、骨組織細胞功能活性下降: 4、模擬微重力環(huán)境骨代謝變化與局部細胞因于和血供變化對骨組織 細胞的影響有關; 5、模擬微重力環(huán)境負重骨骨折愈合能力受到影響。
【關鍵詞】:生物力學 骨代謝 失重 模擬失重 微重力 動物模型 骨折愈合
【學位授予單位】:第一軍醫(yī)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2002
【分類號】:R852.22
【目錄】:
  • 縮略詞表5-6
  • 中文摘要6-9
  • 英文摘要9-12
  • 前言12-14
  • 第一部分 大鼠模擬微重力環(huán)境實驗模型的制備14-15
  • 材料與方法15-17
  • 結果17-19
  • 討論19-24
  • 結論24-25
  • 第二部分 模擬微重力環(huán)境對大鼠負重骨代謝的影響25-26
  • 材料與方法26-31
  • 結果31-36
  • 討論36-43
  • 結論43-44
  • 第三部分 模擬微重力環(huán)境大鼠負重骨骨折愈合的研究44-45
  • 材料與方法45-48
  • 結果48-51
  • 討論51-56
  • 結論56-57
  • 全文小結57-59
  • 參考文獻59-67
  • 綜述: 微重力環(huán)境骨代謝研究進展67-92
  • 附圖92-105
  • 附已發(fā)表文章105-106
  • 致謝106-107

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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  本文關鍵詞:模擬微重力對大鼠負重骨骨代謝及骨折愈合影響的實驗研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:476619

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