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模擬失重狀態(tài)下大鼠抗肺炎鏈球菌感染能力的變化

發(fā)布時(shí)間:2017-06-22 01:06

  本文關(guān)鍵詞:模擬失重狀態(tài)下大鼠抗肺炎鏈球菌感染能力的變化,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的: 失重會(huì)對(duì)機(jī)體呼吸系統(tǒng)產(chǎn)生影響,并可導(dǎo)致一定程度肺組織損傷。本實(shí)驗(yàn)采用大鼠尾懸吊模擬失重狀態(tài)的方法,觀察模擬航天失重狀態(tài)下,呼吸道感染肺炎鏈球菌后抗感染能力的變化,深入了解感染肺炎鏈球菌后大鼠肺組織的病理改變,血液系統(tǒng)中炎癥指標(biāo)的改變,細(xì)胞免疫CD4+/CD8+的改變等,為失重所致肺損傷的藥物防護(hù)提供理論依據(jù),為航天醫(yī)療保障提供依據(jù)。 方法: 1模擬失重狀態(tài)下大鼠肺部感染模型的建立健康清潔級(jí)雄性Wistar大鼠32只,體重290±20g,按照隨機(jī)數(shù)字表法分為4組,A組:懸吊且感染肺炎鏈球菌組(尾懸吊3天后經(jīng)氣管注入肺炎鏈球菌),B組:懸吊不感染肺炎鏈球菌組,C組:不懸吊感染肺炎鏈球菌組(和尾懸吊組同一時(shí)間感染肺炎鏈球菌)和D組:不懸吊不感染肺炎鏈球菌組,每組8只,采用尾懸吊法模擬失重狀態(tài),具體為每只鼠籠內(nèi)懸吊1只大鼠,尾部懸于籠頂,使鼠前肢踏于籠底,后肢懸空,身體縱軸與水平面約30°。實(shí)驗(yàn)環(huán)境為室溫(22℃),晝夜周期12h:12h,大鼠可以自由進(jìn)食、飲水。肺炎鏈球菌感染組于懸吊第4天開始采用氣管插管法經(jīng)氣管注入0.4ml9×108CFU/ml的美國菌種保藏中心保存的標(biāo)準(zhǔn)菌株(ATCC6303),大鼠共懸吊7天,第8天取材,實(shí)驗(yàn)結(jié)束,未注菌組與注菌組同一時(shí)間經(jīng)氣管插管注入同等量(0.4ml)的無菌生理鹽水做為對(duì)照,均注入1次。 2肺炎鏈球菌的復(fù)蘇及菌懸液的配制ATCC6303,購自上海市米寶萊科技有限公司。按照說明書將細(xì)菌復(fù)蘇后再轉(zhuǎn)血培養(yǎng)瓶中增菌保存。增菌培養(yǎng)后的細(xì)菌用無菌注射器吸取1ml放入離心管中,12000r/min,高速離心5min后,棄去上清液,將白色細(xì)菌沉淀用無菌生理鹽水配成混懸液,用簡易細(xì)菌濃度測定儀配制所需濃度待用。 3血常規(guī)、C反應(yīng)蛋白(CRP)及全血標(biāo)本處理大鼠用2%戊巴比妥鈉按60mg/kg腹腔注射麻醉,麻醉成功后經(jīng)頸動(dòng)脈插管或腹主動(dòng)脈取血,7小時(shí)內(nèi)進(jìn)行血常規(guī)和CRP的測定,用CD3/CD4/CD8抗體標(biāo)記制備流式細(xì)胞儀檢測液。全血標(biāo)本的處理方法為:取抗凝全血50μl放入5個(gè)專用的試管內(nèi):空白對(duì)照管、CD3抗體(CD3-Alexa Fluor647)、CD4抗體(CD4-FITC)、CD8抗體(CD8-PE)標(biāo)記管及3種抗體混合標(biāo)記管。除空白對(duì)照管外,各試管內(nèi)加抗體1μl混勻,,37℃水浴30min后加2ml溶血素,混勻后再次水浴10min,1200r/min,離心5min后棄去上清液,加PBS2ml,如前操作再洗1次,棄去上清,加PBS500μl上機(jī)檢測。 4肺組織病理學(xué)檢查取右肺上葉組織,4%多聚甲醛固定,切片做HE染色,用光學(xué)顯微鏡觀察。 結(jié)果: 1.大鼠肺臟改變: A組可見較嚴(yán)重的肺淤血和小靜脈、毛細(xì)血管充盈擴(kuò)張,肺泡融合,肺泡間隔增厚及肺泡腔受壓變形,肺泡腔內(nèi)紅細(xì)胞滲出。B、C組也可見部分上述改變,但炎癥反應(yīng)程度較輕; 2.注菌組大鼠(A、C組)均從肺組織和肺泡灌洗液中培養(yǎng)出肺炎鏈球菌,在血瓊脂平板上的生長結(jié)果如下圖(11、12)所示,可見A組較C組細(xì)菌生長繁殖旺盛,B、D組未注菌,無細(xì)菌生長。 3. A、B、C組較D組中性粒細(xì)胞百分比升高,C反應(yīng)蛋白值明顯增高;淋巴細(xì)胞絕對(duì)數(shù)減少,淋巴細(xì)胞百分比下降,以A組最為明顯。 4. CD4+/CD8+比值懸吊組較對(duì)照組低,但經(jīng)分析差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;4組間實(shí)驗(yàn)前后體重變化結(jié)果顯示A組體重減輕最明顯。結(jié)論:失重狀態(tài)下大鼠機(jī)體免疫功能降低,抗肺炎鏈球菌感染能力降低,肺部感染的病理表現(xiàn)更加嚴(yán)重,炎癥反應(yīng)更強(qiáng),體重減輕更明顯,需要給予相應(yīng)的保障措施。
【關(guān)鍵詞】:模擬失重 大鼠 肺炎鏈球菌 肺部感染 抗感染
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號(hào)】:R85
【目錄】:
  • 中英文縮寫對(duì)照表5-6
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-11
  • 1 引言11-13
  • 2 材料與方法13-23
  • 3 結(jié)果23-30
  • 4 討論30-38
  • 5 結(jié)論38-39
  • 參考文獻(xiàn)39-43
  • 附錄43-44
  • 致謝44-46
  • 文獻(xiàn)綜述46-53
  • 參考文獻(xiàn)52-53

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李天志;劉長庭;李向紅;鐘梅;汪德生;袁明;李志利;;模擬失重對(duì)大鼠血清及肺組織細(xì)胞因子的影響研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2007年12期

2 王俊鋒;呂萍;劉長庭;郝從均;王德龍;;模擬失重對(duì)肺組織iNOS表達(dá)的影響及地塞米松的防治作用[J];河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2007年05期

3 汪德生,袁敏,李志利,袁明,劉朝霞,曹毅,仝飛舟;尾部懸吊大鼠肺動(dòng)脈和胸主動(dòng)脈血管反應(yīng)性及一氧化氮合酶抑制劑的影響[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2005年01期

4 汪濤,溫秀蘭,楊光華,胡平,司少艷;-6°臥床對(duì)T淋巴細(xì)胞增殖功能和細(xì)胞因子產(chǎn)生的影響[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;1998年02期

5 王俊鋒 ,劉長庭 ,王德龍;尾懸吊模擬失重大鼠肺組織細(xì)胞凋亡調(diào)控基因的研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2002年11期

6 郝叢軍;劉長庭;王俊鋒;汪德生;袁明;;模擬失重對(duì)大鼠肺動(dòng)脈eNOS表達(dá)的影響[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2006年07期

7 李天志;劉長庭;李向紅;杜顯鋒;汪德生;袁明;李志利;張偉霞;;模擬失重對(duì)大鼠肺組織NF-κB表達(dá)的影響[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2006年10期

8 王俊鋒;郝叢軍;劉長庭;汪德生;袁明;;模擬失重時(shí)肺動(dòng)脈反應(yīng)性變化的內(nèi)皮機(jī)制研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2007年05期

9 王俊鋒;劉長庭;樊尚春;孫喜慶;王德龍;楊長斌;張玉;盧東源;姚永杰;;頭低位-6°臥床模擬失重對(duì)健康人肺功能的影響[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2010年11期

10 李天志;劉長庭;李向紅;杜顯鋒;汪德生;袁明;李志利;;模擬失重對(duì)大鼠血清及肺組織細(xì)胞間黏附分子-1的影響[J];軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào);2006年06期


  本文關(guān)鍵詞:模擬失重狀態(tài)下大鼠抗肺炎鏈球菌感染能力的變化,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):470340

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