發(fā)布時間：2017-05-29 20:11

  本文關鍵詞：肝微粒體酶CYP2C9、CYP2D6和CYP3A對艾瑞昔布在大鼠體內(nèi)代謝的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:建立LC-MS/MS測定大鼠血漿中艾瑞昔布濃度的方法,并對艾瑞昔布在大鼠體內(nèi)的代謝進行研究探索,完善其藥代動力學研究。方法:色譜條件:色譜柱為Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流動相為乙腈:水:甲酸(85:15:0.1,V/V/V),流速為1.0 m L·min-1,柱溫為30℃,進樣量為10μL,內(nèi)標:甲苯磺丁脲。質譜條件:離子化方式:電噴霧離子化源(electrospray ionization,ESI);檢測方式:正離子檢測;掃描方式:多反應監(jiān)測(multiple reaction monitoring,MRM);離子源噴射電壓5500 V;離子源溫度:550℃;氣簾氣壓力:40 psi;霧化氣(GS1,N2)壓力:40 psi;輔助氣(GS2,N2)壓力:40 psi;碰撞氣壓力:6 psi;艾瑞昔布的解簇電壓(declustering potential,DP)和碰撞電壓(collision energy,CE)值分別為100 V和45 e V,甲苯磺丁脲的DP和CE值分別為22 V和32 e V;用于定量分析的離子反應質荷比(mass-charge ratio,m/z)分別為370.1→236.2(艾瑞昔布)和271.2→155.0(甲苯磺丁脲)。動物實驗方法:健康雄性SD大鼠80只,隨機分為四組。四組大鼠分別灌胃給予蒸餾水、胺碘酮(40 mg·kg-1)、帕羅西汀(2 mg·kg-1)和酮康唑(20 mg·kg-1)。連續(xù)給藥7天,1次/d。四組大鼠均于第8天灌胃給予艾瑞昔布(20 mg·kg-1)并分別于給藥前(0 min)和給藥后10 min、20 min、30 min、45 min、1 h、1.5 h、2 h、3 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h于眼底靜脈叢取血0.5 m L,6500×g離心10 min后取血漿200μL,冷凍保存。血漿處理方法:取血漿200μL,加內(nèi)標溶液20μL,渦旋混勻10 s,加提取劑乙酸乙酯1 m L,渦旋混勻1 min,4500×g離心8 min,取上清液于1.5 m L離心管中,40℃水浴氮氣吹干,400μL流動相復溶,10μL進樣測定。藥動學參數(shù)處理方法:采用DAS 2.0軟件對每只大鼠的系列血藥濃度進行統(tǒng)計矩自動擬合并得到藥動學參數(shù),采用SPSS 13.0軟件對實驗組與對照組的主要藥動學參數(shù)進行統(tǒng)計學分析。若比較的兩組參數(shù)均服從正態(tài)分布,則選用兩個獨立樣本的t檢驗進行分析,若其中一組不服從正態(tài)分布,則選用非參數(shù)檢驗進行分析。P值小于0.05認為兩組間差異有統(tǒng)計學意義。結果:艾瑞昔布的保留時間為2.27 min,甲苯磺丁脲的保留時間為2.26 min,血漿內(nèi)源性雜質對其濃度的測定無干擾;標準曲線為Y=0.016 X+0.072(r=0.9997);艾瑞昔布低(20 ng·m L-1)、中(80 ng·m L-1)、高(320 ng·m L-1)三個濃度的方法回收率依次為102.2%,98.71%和97.01%,提取回收率分別為61.65%,65.33%和72.57%,甲苯磺丁脲的提取回收率為51.64%;艾瑞昔布低、中、高三個濃度的日內(nèi)RSD分別為8.8%,2.8%和1.9%,日間RSD分別為7.4%,2.0%和1.9%;艾瑞昔布血漿樣品于 40℃低溫保存30天及反復凍融三次后性質穩(wěn)定,且處理后的血漿樣品于4℃放置12 h對測定無影響。對照組大鼠體內(nèi)艾瑞昔布的藥動學參數(shù)如下:AUC0-t:1125.1±457.6 mg·h·L-1,AUC0-∞:1331.3±592.6 mg·h·L-1,t1/2:7.4±3.8 h,Tmax:1.5±0.6 h,CL:0.02±0.01 L·h-1·kg-1,V:0.17±0.07 L·kg-1和Cmax:162.2±53.0 mg·L-1。合用胺碘酮后,大鼠體內(nèi)艾瑞昔布的藥動學參數(shù)如下:AUC0-t:1814.8±693.4 mg·h·L-1,AUC0-∞:2091.6±887.1 mg·h·L-1,t1/2:7.8±4.5 h,Tmax:1.7±0.6 h,CL:0.01±0.01 L·h-1·kg-1,V:0.11±0.05 L·kg-1和Cmax:268.2±115.7 mg·L-1。合用帕羅西汀后,大鼠體內(nèi)艾瑞昔布的藥動學參數(shù)如下:AUC0-t:1485.5±480.3 mg·h·L-1,AUC0-∞:1730.4±606.5 mg·h·L-1,t1/2:7.3±5.2 h,Tmax:1.5±0.7 h,CL:0.01±0.01 L·h-1·kg-1,V:0.12±0.06 L·kg-1和Cmax:192.1±70.6 mg·L-1。合用酮康唑后,大鼠體內(nèi)艾瑞昔布的藥動學參數(shù)如下:AUC0-t:1191.9±626.7 mg·h·L-1,AUC(0-∞):1391.0±692.0 mg·h·L-1,t1/2:8.0±4.2 h,Tmax:1.5±0.7 h,CL:0.02±0.01 L·h-1·kg-1,V:0.19±0.11 L·kg-1和Cmax:159.0±70.5 mg·L-1。與對照組相比,合用胺碘酮后藥動學參數(shù)AUC0-t,AUC0-∞,Cmax均明顯增大,CL,V明顯減小,且差異具有統(tǒng)計學意義;合用帕羅西汀后,AUC0-t,AUC0-∞,Cmax顯著增大,CL顯著減小,差異有統(tǒng)計學意義;合用酮康唑后,所有參數(shù)與對照組間的差異均沒有統(tǒng)計學意義。結論:本文所建立的LC-MS/MS測定艾瑞昔布濃度的方法,簡便、準確、靈敏度高、重現(xiàn)性好,適用于大鼠體內(nèi)血漿中艾瑞昔布濃度的測定。合用胺碘酮后,大鼠體內(nèi)艾瑞昔布的暴露率增大,清除減慢,說明艾瑞昔布的代謝減慢,CYP 2C9受到抑制后影響了艾瑞昔布在大鼠體內(nèi)的代謝,進一步表明CYP 2C9參與了艾瑞昔布在大鼠體內(nèi)的代謝;合用帕羅西汀后,大鼠體內(nèi)艾瑞昔布的AUC明顯增大,CL明顯減小,表明合用帕羅西汀后艾瑞昔布的代謝因CYP 2D6的活性受到抑制而減慢,CYP 2D6參與大鼠體內(nèi)艾瑞昔布的代謝;合用酮康唑前后,大鼠體內(nèi)艾瑞昔布的藥動學參數(shù)均無顯著變化,提示CYP 3A可能沒有參與艾瑞昔布在大鼠體內(nèi)的代謝。
【關鍵詞】：艾瑞昔布 肝微粒體酶 代謝 胺碘酮 帕羅西汀 酮康唑
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R965
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 引言12-14
• 第一部分 LC-MS/MS法測定大鼠血漿中艾瑞昔布的濃度14-35
• 前言14-15
• 材料與方法15-19
• 結果19-21
• 附圖21-25
• 附表25-32
• 討論32-33
• 小結33
• 參考文獻33-35
• 第二部分 CYP 2C9、CYP 2D6 和CYP 3A抑制劑對艾瑞昔布在大鼠體內(nèi)代謝的影響35-74
• 前言35-36
• 材料與方法36-39
• 結果39-40
• 附圖40-58
• 附表58-68
• 討論68-70
• 小結70
• 參考文獻70-74
• 結論74-75
• 綜述 非甾體抗炎藥的研究現(xiàn)狀與展望75-85
• 參考文獻81-85
• 致謝85-86
• 個人簡歷86-87

【引證文獻】

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 黃佳;陳笑艷;段曉濤;郭宗儒;褚鳳鳴;鐘大放;;液相色譜-串聯(lián)質譜法同時測定人血清中艾瑞昔布和艾瑞昔布羥基代謝物[A];2006第六屆中國藥學會學術年會論文集[C];2006年

  本文關鍵詞：肝微粒體酶CYP2C9、CYP2D6和CYP3A對艾瑞昔布在大鼠體內(nèi)代謝的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：405613