目的研究模擬微重力環(huán)境對(duì)人角質(zhì)細(xì)胞(HaCaT細(xì)胞)創(chuàng)傷修復(fù)相關(guān)蛋白和基因表達(dá)的影響。方法應(yīng)用RCCS系統(tǒng)進(jìn)行模擬微重力細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),將HaCaT細(xì)胞隨機(jī)分為模擬微重力(SMG)組和正常重力對(duì)照(NG)組,培養(yǎng)32、36和42 h后分別收集細(xì)胞,檢測(cè)熱休克蛋白70(HSP70)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)和Caspase-3的mRNA及蛋白表達(dá)水平變化,透射電鏡觀察2組培養(yǎng)42 h后細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果 SMG組Ha Ca T細(xì)胞培養(yǎng)32、36 h HSP70 mRNA表達(dá)量,培養(yǎng)32、36和42 h MMP-9 mRNA及培養(yǎng)36 h Caspase-3 mRNA表達(dá)水平均高于NG組(P<0. 05)。蛋白免疫印跡法檢測(cè)結(jié)果顯示,HaCaT細(xì)胞經(jīng)微重力培養(yǎng)32、36和42 h后HSP70和MMP-9蛋白表達(dá)趨勢(shì)與相應(yīng)蛋白mRNA表達(dá)一致,而Caspase-3蛋白表達(dá)趨勢(shì)與相應(yīng)mRNA表達(dá)存在一定差異。透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn),模擬微重力環(huán)境下培養(yǎng)42 h后的HaCaT細(xì)胞出現(xiàn)皺縮表現(xiàn),線粒體嵴出現(xiàn)斷裂,結(jié)構(gòu)模糊,部分線粒體出現(xiàn)空泡。結(jié)論模擬微重力環(huán)境下HaCaT細(xì)胞HSP70、...

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圖1蛋白免疫印跡法檢測(cè)相關(guān)蛋白的表達(dá)變化

以目標(biāo)檢測(cè)蛋白與相應(yīng)內(nèi)參β-actin蛋白條帶的吸光度值的比值(HSP70/β-actin、MMP-9/β-actin和Caspase-3/β-actin)代表該蛋白的相對(duì)表達(dá)量。SMG組細(xì)胞培養(yǎng)32、36和42h后HSP70和MMP-9蛋白表達(dá)趨勢(shì)與相應(yīng)蛋白mRNA表達(dá)一致，....

圖2模擬微重力條件下HaCaT細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化

NG組細(xì)胞形態(tài)規(guī)則，胞膜、核膜結(jié)構(gòu)完整，線粒體嵴清晰可見(jiàn)。SMG組為模擬微重力環(huán)境下培養(yǎng)42h后的HaCaT細(xì)胞，可見(jiàn)細(xì)胞有皺縮表現(xiàn)，細(xì)胞器較難辨認(rèn)，胞漿內(nèi)存在較多空泡，細(xì)胞核形態(tài)不規(guī)則，核內(nèi)有染色質(zhì)凝結(jié)現(xiàn)象，細(xì)胞線粒體嵴出現(xiàn)斷裂，結(jié)構(gòu)模糊，部分線粒體出現(xiàn)空泡。見(jiàn)圖2。3討論

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