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二苯乙烯苷對(duì)6-羥基多巴胺誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用研究

發(fā)布時(shí)間:2017-04-23 18:08

  本文關(guān)鍵詞:二苯乙烯苷對(duì)6-羥基多巴胺誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:觀察二苯乙烯苷(tetrahydroxystilbene glucoside,TSG)對(duì)6-羥基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)誘導(dǎo)的多巴胺能(dopaminergic,DA)神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用,并探討其可能機(jī)制。方法:(1)動(dòng)物實(shí)驗(yàn):大鼠中腦炓質(zhì)注射6-OHDA(8μg)制備帕金森病模型,實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為六組:空白組、假手術(shù)組、TSG(50 mg/kg)組、模型(6-OHDA,8μg)組、6-OHDA+TSG(10 mg/kg)組、6-OHDA+TSG(50 mg/kg)組。大鼠腹腔連續(xù)注射TSG 14 d,其中第一次給藥30 min后大鼠中腦黑質(zhì)注射6-OHDA。采用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)抗酪氨酸羥化酶(tyrosine hydroxylase,TH)抗體和抗補(bǔ)體受體-3(OX-42)抗體,分別觀察TSG對(duì)DA神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用及對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞(microglia,MG)激活的抑制作用。(2)細(xì)胞實(shí)驗(yàn):取胎齡14-15 d的SD大鼠胚胎中腦制備神經(jīng)元—膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)模型,實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為空白組、TSG(80μM)組、6-OHDA(40μM)組、6-OHDA+TSG(20μM)組、6-OHDA+TSG(40μM)組、6-OHDA+TSG(80μM)組。細(xì)胞按分組劑量給予TSG處理30 min后再加入6-OHDA,采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測(cè)抗TH抗體和抗OX-42抗體,分別觀察TSG對(duì)DA神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用及對(duì)MG激活的抑制作用。采用Griess試劑法和ELISA法分別檢測(cè)細(xì)胞上清液中NO、TNF-α和IL-1β含量。采用蛋白免疫印跡法(Western blotting)檢測(cè)TH和MG表面特異性蛋白離子鈣接頭蛋白(ionized calcium-binding adapter molecule-1,Iba-1)以及絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信號(hào)通路中ERK1/2和p38磷酸化蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:(1)動(dòng)物實(shí)驗(yàn):與空白組相比,模型組DA神經(jīng)元明顯減少,激活的MG增多;經(jīng)TSG處理后,DA神經(jīng)元明顯增多,激活的MG明顯減少。(2)細(xì)胞實(shí)驗(yàn):與空白組比較,模型組DA神經(jīng)元及樹突明顯減少,MG激活明顯增多,細(xì)胞培養(yǎng)上清液中NO、TNF-α和IL-1β的含量升高,ERK1/2和p38蛋白磷酸化表達(dá)增強(qiáng);經(jīng)TSG處理后,DA神經(jīng)元明顯增加,MG激活被抑制,細(xì)胞上清液中NO、TNF-α和IL-1β的含量明顯下降,ERK1/2和p38磷酸化蛋白表達(dá)下降。結(jié)論:TSG對(duì)6-OHDA誘導(dǎo)的DA神經(jīng)元損傷具有保護(hù)作用,其作用機(jī)制可能與抑制MG介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥反應(yīng)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:帕金森病 6-羥基多巴胺 二苯乙烯苷 小膠質(zhì)細(xì)胞 神經(jīng)炎癥
【學(xué)位授予單位】:遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R965
【目錄】:
  • 中英縮略詞對(duì)照表4-5
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-9
  • 前言9-11
  • 實(shí)驗(yàn)材料和方法11-18
  • 結(jié)果18-26
  • 討論26-28
  • 結(jié)論28-29
  • 參考文獻(xiàn)29-33
  • 綜述33-45
  • 參考文獻(xiàn)39-45
  • 致謝45-47
  • 作者簡(jiǎn)介47

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞:二苯乙烯苷對(duì)6-羥基多巴胺誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):322797

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