發(fā)布時(shí)間：2017-04-02 00:15

  本文關(guān)鍵詞：沙奎那韋固體臘質(zhì)納米粒的制備及口服吸收研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：固體脂質(zhì)納米粒(Solid lipid nanoparticles, SLN)是近年來(lái)在藥劑學(xué)領(lǐng)域研究比較熱門的一類新型的納米載體,因其具有生物相容性好,提高藥物穩(wěn)定性,調(diào)控藥物釋放行為,可實(shí)現(xiàn)藥物靶向傳遞,及適合工業(yè)生產(chǎn)等特性從而受到廣泛關(guān)注。近幾年的研究發(fā)現(xiàn),固體脂質(zhì)納米粒作為口服藥物載體,可以有效提高藥物的口服吸收和生物利用度。本研究針對(duì)抗HIV藥物沙奎那韋口服生物利用度低的問(wèn)題,利用低毒性、生物相容性好、生物可降解的單甘脂為脂質(zhì)材料,制備沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒,并開(kāi)展聚乙二醇的研究,并考察其作為口服藥物載體,在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為,以期為開(kāi)發(fā)沙奎那韋新型給藥系統(tǒng)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。.研究選用沙奎那韋為模型藥物,首先通過(guò)離子復(fù)合法制備沙奎那韋-卵磷脂復(fù)合物,采用差示熱掃描法(DSC)確證復(fù)合物的結(jié)構(gòu)；以單甘脂為脂質(zhì)材料,采用溶劑擴(kuò)散法,制備沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒,通過(guò)聚乙二醇---硬脂酸(PEG2000-SA)投料量的調(diào)控,研究不同聚乙二醇修飾比例的沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的粒徑大小及形態(tài)、藥物包封率、載藥量及藥物體外釋放等理化性質(zhì)。結(jié)果表明：當(dāng)沙奎那韋與卵磷脂的質(zhì)量比為1：1.5時(shí),沙奎那韋可與卵磷脂有效復(fù)合,形成沙奎那韋-卵磷脂復(fù)合物；通過(guò)粒徑儀測(cè)定和透射電鏡的觀察,發(fā)現(xiàn)未經(jīng)PEG修飾的SLN粒徑在275 nm左右,隨著PEG修飾量的增加粒徑減��；當(dāng)PEG修飾比例為10%時(shí),其粒徑為158 nm左右；水溶性藥物沙奎那韋與卵磷脂復(fù)合后,可被脂質(zhì)材料有效包封,沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的藥物包封率為99.19%,載藥量可達(dá)19.87%,聚乙二醇修飾后其藥物包封率有所下降,但仍在95%以上；體外釋放結(jié)果顯示沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒對(duì)藥物具有緩釋作用,72小時(shí)的藥物累積釋放量為19.23%,且其釋放速率隨著聚乙二醇的修飾比例的增加而減緩。建立HPLC測(cè)定沙奎那韋血藥濃度的方法學(xué)。采用SD大鼠為模型動(dòng)物,以沙奎那韋混懸劑為對(duì)照,考察沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒及不同比例聚乙二醇修飾SLN口服給藥后,在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為。研究結(jié)果顯示：大鼠口服沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒、5%聚乙二醇修飾SLN (pSLN-5%)和10%聚乙二醇修飾SLN (pSLN-10%)的相對(duì)于口服沙奎那韋混懸液的生物利用度分別為200.68%,6175.85%,10115.35%,其口服相對(duì)生物利用度隨著聚乙二醇修飾比例的增加而增加。相比于沙奎那韋混懸劑,pSLN-5%和pSLN-10%,其體內(nèi)平均滯留時(shí)間從4.62小時(shí),增加到36.21小時(shí)和51.68小時(shí)；其Cmax從0.33mg/L增加到,7.46mg/L和8.42mg/L。結(jié)果表明固體脂質(zhì)納米粒通過(guò)PEG修飾可顯著延長(zhǎng)藥物的體內(nèi)滯留時(shí)間,增加藥物轉(zhuǎn)運(yùn)效率,降低藥物的消除速率,可大幅度地提高沙奎那韋的口服生物利用度。為闡明固體脂質(zhì)納米粒及其聚乙二醇修飾SLN (pSLN)提高沙奎那韋口服生物利用度的機(jī)制,進(jìn)一步采用犬腎上皮連續(xù)細(xì)胞系(MDCK)作為體外跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)吸收的評(píng)價(jià)模型細(xì)胞,以四唑藍(lán)比色(MTT)法測(cè)定固體脂質(zhì)納米粒及其聚乙二醇修飾SLN的細(xì)胞毒性；培養(yǎng)MDCK細(xì)胞單層,以沙奎那韋混懸劑為對(duì)照,評(píng)價(jià)SLN及pSLN的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)能力；以異硫氫基熒光素標(biāo)記SLN及pSLN研究納米粒的MDCK細(xì)胞攝取能力。細(xì)胞毒性研究結(jié)法果顯示：沙奎那韋的固體脂質(zhì)納米粒對(duì)MDCK細(xì)胞的半數(shù)致死率(IC50)為269.02μg/mL,聚乙二醇修飾后其毒性進(jìn)一步降低,采用5%和10%聚乙二醇修飾的SLN,其ICs0分別為549.25和550.47μg/mL�？缂�(xì)胞單層膜轉(zhuǎn)運(yùn)結(jié)果表明：相比于沙奎那韋溶液,SLN具有加強(qiáng)的跨細(xì)胞單層膜轉(zhuǎn)運(yùn)能力,其Papp分別為0.09×10-5cm/s、0.18×10-5cm/s,且隨著聚乙二醇修飾比例的增加而提高,10%聚乙二醇修飾SLN (pSLN-10%)的Papp為0.40×10-5cm/s。MDCK細(xì)胞攝取研究結(jié)果表明：SLN具有較強(qiáng)的MDCK細(xì)胞攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)能力,且其攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)能力隨著聚乙二醇修飾比例的增加而增加。本研究的結(jié)果表明,結(jié)合離子復(fù)合和溶劑擴(kuò)散法制備的固體脂質(zhì)納米粒,可實(shí)現(xiàn)對(duì)水溶性藥物沙奎那韋的有效包封和高效負(fù)載,并可通過(guò)胃腸道上皮細(xì)胞的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn),顯著提高藥物的口服吸收和生物利用度,其基于聚乙二醇修飾沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的新型制劑,有望實(shí)現(xiàn)降低沙奎那韋口服制劑的給藥劑量和毒副作用,提高患者的依從性。
【關(guān)鍵詞】：沙奎那韋 固體脂質(zhì)納米粒 體外釋放 藥代動(dòng)力學(xué) 細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R943
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-15
• 引言15-19
• 第一章 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的合成及理化性質(zhì)研究19-34
• 1.1 材料與儀器19-20
• 1.1.1 材料19
• 1.1.2 儀器19-20
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法20-23
• 1.2.1 沙奎那韋-磷脂復(fù)合物的合成20
• 1.2.2 沙奎那韋-磷脂復(fù)合形成的結(jié)構(gòu)驗(yàn)證20
• 1.2.3 固體脂質(zhì)納米粒的制備20-21
• 1.2.4 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的理化性質(zhì)研究21-23
• 1.3 結(jié)果與討論23-33
• 1.3.1 沙奎那韋-磷脂復(fù)合物的制備23-24
• 1.3.2 沙奎那韋磷脂復(fù)合形成的結(jié)構(gòu)驗(yàn)證24-25
• 1.3.3 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的制備25-26
• 1.3.4 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒粒徑與形態(tài)26-27
• 1.3.5 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的包封率(ER)及載藥量(DL)27-31
• 1.3.6 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的體外藥物釋放研究31-33
• 1.4 小結(jié)33-34
• 第二章 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究34-43
• 2.1 材料與儀器34
• 2.1.1 材料34
• 2.1.2 儀器34
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法34-36
• 2.2.1 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的制備34-35
• 2.2.2 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒血漿中標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備及方法學(xué)驗(yàn)證35
• 2.2.3 生物樣品的分析35-36
• 2.3 結(jié)果與討論36-42
• 2.3.1 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒血漿中標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備及方法學(xué)驗(yàn)證36-39
• 2.3.2 大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)的考察39-42
• 2.4 小結(jié)42-43
• 第三章 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的MDCK細(xì)胞跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)研究43-54
• 3.1 材料與儀器43-44
• 3.1.1 材料43-44
• 3.1.2 儀器44
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法44-47
• 3.2.1 ODA-FITC的合成及熒光標(biāo)記的固體脂質(zhì)納米粒的制備44-45
• 3.2.2 MDCK細(xì)胞的培養(yǎng)45
• 3.2.3 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)45
• 3.2.4 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒細(xì)胞單層膜(MDCK)轉(zhuǎn)運(yùn)45-47
• 3.2.5 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的細(xì)胞攝取研究47
• 3.3 結(jié)果與討論47-53
• 3.3.1 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)47-48
• 3.3.2 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米�？缂�(xì)胞單層膜(MDCK)轉(zhuǎn)運(yùn)研究48-51
• 3.3.3 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的細(xì)胞攝取研究51-53
• 3.4 小結(jié)53-54
• 結(jié)論54-56
• 參考文獻(xiàn)56-61
• 綜述61-77
• 參考文獻(xiàn)74-77
• 作者簡(jiǎn)歷77

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：281559