海蜇活性肽的制備及降血壓效果的研究
本文關(guān)鍵詞:海蜇活性肽的制備及降血壓效果的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:本文對新鮮海蜇的頭部和腕部進(jìn)行了一般成分和氨基酸成分的分析,海蜇的蛋白占其干重的50%,其氨基酸成分種類齊全,必須氨基酸含量豐富。分別用酸性蛋白酶、中型蛋白酶、堿性蛋白酶、胃蛋白酶胰、蛋白酶以及復(fù)合酶對海蜇的蛋白部分進(jìn)行了酶解,并根據(jù)酶解后對ACE抑制活性的強(qiáng)弱,選擇出堿性蛋白酶為制備ACE抑制肽的最佳水解酶。通過正交試驗(yàn),確定出堿性蛋白酶酶解的最適反應(yīng)條件為酶用量為2%,反應(yīng)溫度為50℃,pH值為9,底物濃度為4%,反應(yīng)后的水解度為41.8%,酸溶性肽為31.3mg/ml。并對測定海蜇水解液脫苦、調(diào)味、殺菌后ACE的抑制活性沒有改變。 對海蟄水解液進(jìn)行超濾膜分離,選用截流分子量為2500和250的膜進(jìn)行分離出三個(gè)部分,結(jié)果表明,分子量在250—2500之間的組分對ACE的抑制活性最強(qiáng)并動(dòng)物試驗(yàn)中效果明顯,再用SephedexG—15凝膠過濾對其進(jìn)一步分離,分離出對ACE抑制活性較強(qiáng)的組分Ⅲ、組分Ⅳ,進(jìn)行抗消化實(shí)驗(yàn)和氨基酸組成分析,組分Ⅲ、組分Ⅳ被消化酶處理后,活性下降不大,保持較高的ACE抑制活性。組分Ⅲ主要包括Pro、Tyr、Leu、Gly、Lys、Glu6種氨基酸;組分Ⅳ主要包括Tyr、Val、Met、Glu、Gly5種氨基酸。 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)主要研究了海蜇中降壓肽對腎動(dòng)脈狹窄和L—NNA藥物兩種高血壓模型的血壓和心率的影響。腎動(dòng)脈狹窄型組灌胃和L-NNA藥物組的最小有效分別為0.6g/Kg和0.8g/Kg。腎動(dòng)脈狹窄型動(dòng)物灌胃最小有效劑量的海蜇降壓肽其血壓下降為22/16mmHg(收縮壓/舒張壓),持續(xù)時(shí)間為4小時(shí),同樣條件,L—NNA藥物組血壓下降15/8mmHg(收縮壓/舒張壓),,持續(xù)時(shí)間為6小時(shí)。并且在海蜇降壓肽降壓過程中,對心率也有一定的平穩(wěn)作用。由LD50毒理試驗(yàn),海蜇降壓肽LD50均大于10g/kg.bw。根據(jù)急性毒性分級,海蟄降壓肽屬于實(shí)際無毒物質(zhì)。
【關(guān)鍵詞】:海蜇 血管緊張素酶抑制肽 制備 降血壓
【學(xué)位授予單位】:中國海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類號】:R96;TQ464.7
【目錄】:
- 摘要3-4
- Abstract4-8
- 0 緒論8-23
- 1.生物活性肽研究進(jìn)展8-12
- 1.1 生物活性肽的概況8
- 1.2 生物活性肽的特點(diǎn)與分類8-9
- 1.3 生物活性肽的功能的研究9-11
- 1.4 生物活性肽的制備11-12
- 2.抗高血壓藥物及食物中ACE抑制劑的研究進(jìn)展12-19
- 2.1.高血壓的現(xiàn)狀12
- 2.2 抗高血壓藥物的研究進(jìn)展12-14
- 2.3 食物中ACE抑制肽14-19
- 3.立題的依據(jù)及研究目的意義19-23
- 3.1 海洋活性肽研究的前景19-20
- 3.2 海蜇養(yǎng)殖加工現(xiàn)20-21
- 3.3 立題的目的和意義21-23
- 第一章 海蜇的化學(xué)成分分析23-27
- 1.實(shí)驗(yàn)材料與方法23-24
- 2結(jié)果與討論24-27
- 第二章 海蜇降血壓肽的制備27-40
- 1.ACE酶的提取和活性確定27-31
- 2.酶解條件的確定及參數(shù)的建立31-40
- 2.1 不同酶系生產(chǎn)降壓肽活性的比較31-33
- 2.2 復(fù)合酶系對產(chǎn)物ACE抑制活性的影響33-37
- 2.3 酶解條件的優(yōu)化37-38
- 2.4 水解參數(shù)的建立38-40
- 第三章 海蜇降血肽的初步分離純化40-47
- 1.材料與方法40-42
- 2結(jié)果與討論42-45
- 3.小結(jié)45-47
- 第四章 海蜇降血壓肽動(dòng)物降壓效果的研究47-56
- 1材料與方法47-49
- 2結(jié)果49-54
- 3小結(jié)54-56
- 結(jié)論56-58
- 建議58-59
- 參考文獻(xiàn)59-64
- 致謝64
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